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C o l i 的 生 长 及 诱 导 时 间 。 菌 丝 长 度 测 量 法 ： 对 于 丝 状 真 菌 和 一 些 放 线 菌 ， 可 以 在 培 养 基 上 测 定 一 定 时 间 内 菌 丝 生 长 的 长 度 ， 或 是 利 用 一 只 一 端 开 口 并 带 有 刻 度 的 细 玻 璃 管 ， 到 入 合 适 的 培 养 基 ， 卧 放 ， 在 开 口 的 一 端 接 种 微 生 物 ， 一 段 时 间 后 记 录 其 菌 丝 生 长 长 度 ， 借 此 衡 量 丝 状 微 生 物 的 生 长 。 微 生 物 计 数 法 血 球 计 数 板 法 : 血 球 计 数 板 是 一 种 有 特 别 结 构 刻 度 和 厚 度 的 厚 玻 璃 片 ， 玻 片 上 有 四 条 沟 和 两 条 嵴 ， 中 央 有 一 短 横 沟 和 两 个 平 台 ， 两 嵴 的 表 比 两 平 台 的 表 面 高 0 . 1 m m ， 每 个 平 台 上 刻 有 不 同 规 格 的 格 网 ， 中 央 0 . 1 m m 面 积 上 刻 有 4 0 0 个 小 方 格 。 通 过 油 镜 观 察 ， 统 计 一 定 大 格 内 微 生 物 的 数 量 ， 即 可 算 出 1 毫 升 菌 液 中 所 含 的 菌 体 数 。 这 种 方 法 简 便 ， 直 观 ， 快 捷 ， 但 只 适 宜 于 单 细 胞 状 态 的 微 生 物 或 丝 状 微 生 物 所 产 生 的 孢 子 进 行 计 数 ， 并 且 所 得 结 果 是 包 括 死 细 胞 在 内 的 总 菌 数 。 染 色 计 数 法 ： 为 了 弥 补 一 些 微 生 物 在 油 镜 下 不 易 观 察 计 数 ， 而 直 接 用 血 球 计 数 板 法 又 无 法 区 分 死 细 胞 和 活 细 胞 的 不 足 ， 人 们 发 明 了 染 色 计 数 法 。 借 助 不 同 的 染 料 对 菌 体 进 行 适 当 的 染 色 ， 可 以 更 方 便 的 在 显 微 镜 下 进 行 活 菌 计 数 。 如 酵 母 活 细 胞 计 数 可 用 美 蓝 染 色 液 ， 染 色 后 在 显 微 镜 下 观 察 ， 活 细 胞 为 无 色 ， 而 死 细 胞 为 蓝 色 。 比 例 计 数 法 ： 将 已 知 颗 粒 （ 如 霉 菌 孢 子 或 红 细 胞 ） 浓 度 的 液 体 与 一 待 测 细 胞 浓 度 的 菌 液 按 一 定 比 例 均 匀 混 合 ， 在 显 微 镜 视 野 中 数 出 各 自 的 数 目 ， 即 可 得 未 知 菌 液 的 细 胞 浓 度 。 这 种 计 数 方 法 比 较 粗 放 。 并 且 需 要 配 制 已 知 颗 粒 浓 度 的 悬 液 做 标 准 。 液 体 稀 释 法 ： 对 未 知 菌 样 做 连 续 十 倍 系 列 稀 释 ， 根 据 估 计 数 ， 从 最 适 宜 的 三 个 连 续 的 1 0 倍 稀 释 液 中 各 取 5 毫 升 试 样 ， 接 种 1 毫 升 到 3 组 共 1 5 只 装 培 养 液 的 试 管 中 ， 经 培 养 后 记 录 每 个 稀 释 度 出 现 生 长 的 试 管 数 ， 然 后 查 最 大 或 然 数 表 M P N （ m o s t p r o b a b l y n u m b e r ） 得 出 菌 样 的 含 菌 数 ， 根 据 样 品 稀 释 倍 数 计 算 出 活 菌 含 量 。 该 法 常 用 于 食 品 中 微 生 物 的 检 测 ， 例 如 饮 用 水 和 牛 奶 的 微 生 物 限 量 检 查 。 平 板 菌 落 计 数 法 ： 这 是 一 种 最 常 用 的 活 菌 计 数 法 。 将 待 测 菌 液 进 行 梯 度 稀 释 ， 取 一 定 体 积 的 稀 释 菌 液 与 合 适 的 固 体 培 养 基 在 凝 固 前 均 匀 混 合 ， 或 将 菌 液 涂 布 于 已 凝 固 的 固 体 培 养 基 平 板 上 。 保 温 培 养 后 ， 用 平 板 上 出 现 的 菌 落 数 乘 以 菌 液 稀 释 度 ， 即 可 算 出 原 菌 液 的 含 菌 数 。 一 般 以 直 径 9 c m 的 平 板 上 出 现 5 0 5 0 0 个 菌 落 为 宜 。 但 方 法 比 较 麻 烦 ， 操 作 者 需 有 熟 练 的 技 术 。 平 板 菌 落 计 数 法 不 仅 可 以 得 出 菌 液 中 活 菌 的 含 菌 数 ， 而 且 同 时 将 菌 液 中 的 细 菌 进 行 了 一 次 分 离 培 养 ， 获 得 了 单 克 隆 。 试 剂 纸 法 ： 在 平 板 计 数 法 的 基 础 上 ， 发 展 了 小 型 商 品 化 产 品 以 供 快 速 计 数 用 。 形 式 有 小 型 厚 滤 纸 片 ， 琼 脂 片 等 。 在 滤 纸 和 琼 脂 片 中 吸 有 合 适 的 培 养 基 ， 其 中 加 入 活 性 指 示 剂 2 ， 3 ， 5 氯 化 三 苯 基 四 氮 唑 （ T T C ， 无 色 ） 待 蘸 取 测 试 菌 液 后 置 密 封 包 装 袋 中 培 养 。 短 期 培 养 后 在 滤 纸 上 出 现 一 定 密 度 的 玫 瑰 色 微 小 菌 落 与 标 准 纸 色 板 上 图 谱 比 较 即 可 估 算 出 样 品 的 含 菌 量 。 试 剂 纸 法 计 数 快 捷 准 确 ， 相 比 而 言 避 免 了 平 板 计 数 法 的 人 为 操 作 误 差 。 膜 过 滤 法 ： 用 特 殊 的 滤 膜 过 滤 一 定 体 积 的 含 菌 样 品 ， 经 丫 叮 橙 染 色 ， 在 紫 外 显 微 镜 下 观 察 细 胞 的 荧 光 ， 活 细 胞 会 发 橙 色 荧 光 ， 而 死 细 胞 则 发 绿 色 荧 光 。 生 理 指 标 法 ： 微 生 物 的 生 长 伴 随 着 一 系 列 生 理 指 标 发 生 变 化 ， 例 如 酸 碱 度 ， 发 酵 液 中 的 含 氮 量 ， 含 糖 量 ， 产 气 量 等 ， 与 生 长 量 相 平 行 的 生 理 指 标 很 多 ， 它 们 可 作 为 生 长 测 定 的 相 对 值 。 测 定 含 氮 量 ： 大 多 数 细 菌 的 含 氮 量 为 干 重 的 1 2 . 5 % ， 酵 母 为 7 . 5 % ， 霉 菌 为 6 . 0 % 。 根 据 含 氮 量 × 6 . 2 5 ， 即 可 测 定 粗 蛋 白 的 含 量 。 含 氮 量 的 测 定 方 法 有 很 多 ， 如 用 硫 酸 ， 过 氯 酸 ， 碘 酸 ， 磷 酸 等 消 化 法 和 D u m a s 测 N 2 气 法 。 D u m a s 测 N 2 气 法 是 将 样 品 与 C u O 混 合 ， 在 C O 2 气 流 中 加 热 后 产 生 氮 气 ， 收 集 在 呼 吸 计 中 ， 用 K O H 吸 去 C O 2 后 即 可 测 出 N 2 的 量 。 测 定 含 碳 量 ： 将 少 量 （ 干 重 0 . 2 2 . 0 m g ） 生 物 材 料 混 入 1 毫 升 水 或 无 机 缓 冲 液 中 ， 用 2 毫 升 2 % 的 K 2 C r 2 O 7 溶 液 在 1 0 0 C 下 加 热 3 0 分 钟 后 冷 却 。 加 水 稀 释 至 5 毫 升 ， 在 5 8 0 n m 的 波 长 下 读 取 吸 光 光 度 值 ， 即 可 推 算 出 生 长 量 。 需 用 试 剂 做 空 白 对 照 ， 用 标 准 样 品 做 标 准 曲 线 。 还 原 糖 测 定 法 ： 还 原 糖 通 常 是 指 单 糖 或 寡 糖 ， 可 以 被 微 生 物 直 接 利 用 ， 通 过 还 原 糖 的 测 定 可 间 接 反 映 微 生 物 的 生 长 状 况 ， 常 用 于 大 规 模 工 业 发 酵 生 产 上 微 生 物 生 长 的 常 规 监 测 。 方 法 是 ， 离 心 发 酵 液 ， 取 上 清 液 ， 加 入 斐 林 试 剂 ， 沸 水 浴 煮 沸 3 分 钟 ， 取 出 加 少 许 盐 酸 酸 化 ， 加 入 N a 2 S 2 O 3 临 近 终 点 时 加 入 淀 粉 溶 液 ， 继 续 加 N a 2 S 2 O 3 至 终 点 ， 查 表 读 出 还 原 糖 的 含 量 。 氨 基 氮 的 测 定 ： 方 法 是 ， 离 心 发 酵 液 ， 取 上 清 液 ， 加 入 甲 基 红 和 盐 酸 作 指 示 剂 ， 加 入 0 . 0 2 N 的 N a O H 调 色 至 颜 色 刚 刚 褪 去 ， 加 入 底 物 1 8 % 的 中 性 甲 醛 ， 反 应 数 刻 ， 加 入 0 . 0 2 N 的 使 之 变 色 ， 根 据 N a O H 的 用 量 折 算 出 氨 基 氮 的 含 量 。 根 据 培 养 液 中 氨 基 氮 的 含 量 ， 可 间 接 反 映 微 生 物 的 生 长 状 况 。 其 他 生 理 物 质 的 测 定 ： P ， D N A ， R N A ， A T P ， N A M （ 乙 酰 胞 壁 酸 ） 等 含 量 以 及 产 酸 ， 产 气 ， 产 C O 2 （ 用 标 记 葡 萄 糖 做 基 质 ） ， 耗 氧 ， 黏 度 ， 产 热 等 指 标 ， 都 可 用 于 生 长 量 的 测 定 。 也 可 以 根 据 反 应 前 后 的 基 质 浓 度 变 化 ， 最 终 产 气 量 ， 微 生 物 活 性 三 方 面 的 测 定 反 映 微 生 物 的 生 长 。 如 我 所 在 B M P 2 的 发 酵 生 产 上 ， 随 时 监 测 溶 氧 量 的 变 化 和 酸 碱 度 的 变 化 ， 判 断 细 菌 的 长 势 。 商 业 化 快 速 微 生 物 检 测 法 ： 微 生 物 的 检 测 ， 其 发 展 方 向 是 快 速 ， 准 确 ， 简 便 ， 自 动 化 ， 当 前 很 多 生 物 制 品 公 司 利 用 传 统 微 生 物 检 测 原 理 ， 结 合 不 同 的 检 测 方 法 ， 设 计 了 形 式 各 异 的 微 生 物 检 测 仪 器 设 备 ， 正 逐 步 广 泛 应 用 于 医 学 微 生 物 检 测 和 科 学 研 究 领 域 。 例 如 ： 1 、 抗 干 扰 培 养 基 和 微 生 物 数 量 快 速 检 测 技 术 结 合 解 决 了 传 统 微 生 物 检 测 手 段 不 能 解 决 的 难 题 ， 为 建 立 一 套 完 整 的 抗 干 扰 微 生 物 检 测 系 统 奠 定 了 坚 实 的 基 础 。 中 科 院 广 州 分 院 合 作 产 业 处 提 供 的 抗 干 扰 微 生 物 培 养 基 ， 新 型 生 化 鉴 定 管 ， 微 生 物 计 数 卡 ， 环 境 质 量 检 测 试 剂 盒 等 ， 可 方 便 的 用 于 多 项 检 测 。 2 、 B A C T O M E T E R 全 自 动 各 类 总 菌 数 及 快 速 细 菌 检 测 系 统 可 以 数 小 时 内 获 得 监 测 结 果 ， 样 本 颜 色 及 光 学 特 征 都 不 影 响 读 数 ， 对 酵 母 和 霉 菌 检 测 同 样 高 度 敏 感 原 理 是 利 用 电 阻 抗 法 （ I M P E D A N C E T E C H N O L O G Y ） 将 待 测 样 本 与 培 养 基 置 于 反 应 试 剂 盒 内 ， 底 部 有 一 对 不 锈 钢 电 极 ， 测 定 因 微 生 物 生 长 而 产 生 阻 抗 改 变 。 如 微 生 物 生 长 时 可 将 培 养 基 中 的 大 分 子 营 养 物 经 代 谢 转 变 为 活 跃 小 分 子 ， 电 阻 抗 法 可 测 试 这 种 微 弱 变 化 ， 从 而 比 传 统 平 板 法 更 快 速 监 测 微 生 物 的 存 在 及 数 量 。 测 定 项 目 包 括 总 生 菌 数 ， 酵 母 菌 ， 大 肠 杆 菌 群 ， 霉 菌 ， 乳 酸 菌 ， 嗜 热 菌 ， 革 兰 氏 阴 性 菌 ， 金 黄 色 葡 萄 球 菌 等 。 一 微 生 物 致 力 于 为 全 球 微 生 物 学 研 究 与 应 用 的 创 新 发 展 而 服 务 。 美 国 微 生 物 科 学 院 院 士 牵 头 ， 多 名 国 内 外 微 生 物 学 、 机 械 自 动 化 、 电 子 信 息 学 学 科 专 家 组 成 研 发 、 生 产 和 销 售 微 生 物 科 学 实 验 室 科 学 仪 器 的 创 新 性 高 新 技 术 企 业 。 自 主 研 制 的 微 生 物 生 长 曲 线 分 析 仪 ， 高 通 量 微 生 物 筛 选 系 统 ， 高 通 量 测 试 仪 器 , 生 长 曲 线 检 测 , 致 病 菌 检 测 等 国 际 领 先 产 品 。 成 果 在 N A T U R E 、 C E L L 、 S C I E N C E 等 国 际 权 威 科 技 刊 物 上 发 表 了 许 多 高 水 平 高 引 用 文 章 。 欢 迎 有 需 求 的 朋 友 来 公 司 洽 谈 。 2 0 2 4 0 1 0 6 查 看 更 多 今 天 给 大 家 分 享 下 微 生 物 生 长 曲 线 检 测 的 方 法 微 生 物 生 长 曲 线 分 析 仪 今 天 给 大 家 分 享 下 微 生 物 生 长 曲 线 的 检 测 方 法 体 积 测 量 法 ： 又 称 测 菌 丝 浓 度 法 。 通 过 测 定 一 定 体 积 培 养 液 中 所 含 菌 丝 的 量 来 反 映 微 生 物 的 生 长 状 况 。 方 法 是 ， 取 一 定 量 的 待 测 培 养 液 （ 如 1 0 毫 升 ） 放 在 有 刻 度 的 离 心 管 中 ， 设 定 一 定 的 离 心 时 间 （ 如 5 分 钟 ） 和 转 速 （ 如 5 0 0 0 r p m ） ， 离 心 后 ， 倒 出 上 清 夜 ， 测 出 上 清 夜 体 积 为 v ， 则 菌 丝 浓 度 为 （ 1 0 v ） / 1 0 。 菌 丝 浓 度 测 定 法 是 大 规 模 工 业 发 酵 生 产 上 微 生 物 生 长 的 一 个 重 要 监 测 指 标 。 这 种 方 法 比 较 粗 放 ， 简 便 ， 快 速 ， 但 需 要 设 定 一 致 的 处 理 条 件 ， 否 则 偏 差 很 大 ， 由 于 离 心 沉 淀 物 中 夹 杂 有 一 些 固 体 营 养 物 ， 结 果 会 有 一 定 偏 差 。 称 干 重 法 ： 可 用 离 心 或 过 滤 法 测 定 。 一 般 干 重 为 湿 重 的 1 0 2 0 % 。 在 离 心 法 中 ， 将 一 定 体 积 待 测 培 养 液 倒 入 离 心 管 中 ， 设 定 一 定 的 离 心 时 间 和 转 速 ， 进 行 离 心 ， 并 用 清 水 离 心 洗 涤 1 5 次 ， 进 行 干 燥 。 干 燥 可 用 烘 箱 在 1 0 5 ℃ 或 1 0 0 ℃ 下 烘 干 ， 或 采 用 红 外 线 烘 干 ， 也 可 在 8 0 ℃ 或 4 0 ℃ 下 真 空 干 燥 ， 干 燥 后 称 重 。 如 用 过 滤 法 ， 丝 状 真 菌 可 用 滤 纸 过 滤 ， 细 菌 可 用 醋 酸 纤 维 膜 等 滤 膜 过 滤 ， 过 滤 后 用 少 量 水 洗 涤 ， 在 4 0 C 下 进 行 真 空 干 燥 。 称 干 重 发 法 较 为 烦 琐 ， 通 常 获 取 的 微 生 物 产 品 为 菌 体 时 ， 常 采 用 这 种 方 法 ， 如 活 性 干 酵 母 （ a c t i v i t y d r y y e a s t , A D Y ） , 一 些 以 微 生 物 菌 体 为 活 性 物 质 的 饲 料 和 肥 料 。 比 浊 法 ： 微 生 物 的 生 长 引 起 培 养 物 混 浊 度 的 增 高 。 通 过 紫 外 分 光 光 度 计 测 定 一 定 波 长 下 的 吸 光 值 ， 判 断 微 生 物 的 生 长 状 况 。 对 某 一 培 养 物 内 的 菌 体 生 长 作 定 时 跟 踪 时 ， 可 采 用 一 种 特 制 的 有 侧 臂 的 三 角 烧 瓶 。 将 侧 臂 插 入 光 电 比 色 计 的 比 色 座 孔 中 ， 即 可 随 时 测 定 其 生 长 情 况 ， 而 不 必 取 菌 液 。 该 法 主 要 用 于 发 酵 工 业 菌 体 生 长 监 测 。 如 我 所 使 用 U N I C O 公 司 的 紫 外 可 见 分 光 光 度 计 ， 在 波 长 6 0 0 n m 处 用 比 色 管 定 时 测 定 发 酵 液 的 吸 光 光 度 值 O D 6 0 0 ， 以 此 监 控 E . C o l i 的 生 长 及 诱 导 时 间 。 菌 丝 长 度 测 量 法 ： 对 于 丝 状 真 菌 和 一 些 放 线 菌 ， 可 以 在 培 养 基 上 测 定 一 定 时 间 内 菌 丝 生 长 的 长 度 ， 或 是 利 用 一 只 一 端 开 口 并 带 有 刻 度 的 细 玻 璃 管 ， 到 入 合 适 的 培 养 基 ， 卧 放 ， 在 开 口 的 一 端 接 种 微 生 物 ， 一 段 时 间 后 记 录 其 菌 丝 生 长 长 度 ， 借 此 衡 量 丝 状 微 生 物 的 生 长 。 微 生 物 计 数 法 血 球 计 数 板 法 : 血 球 计 数 板 是 一 种 有 特 别 结 构 刻 度 和 厚 度 的 厚 玻 璃 片 ， 玻 片 上 有 四 条 沟 和 两 条 嵴 ， 中 央 有 一 短 横 沟 和 两 个 平 台 ， 两 嵴 的 表 比 两 平 台 的 表 面 高 0 . 1 m m ， 每 个 平 台 上 刻 有 不 同 规 格 的 格 网 ， 中 央 0 . 1 m m 面 积 上 刻 有 4 0 0 个 小 方 格 。 通 过 油 镜 观 察 ， 统 计 一 定 大 格 内 微 生 物 的 数 量 ， 即 可 算 出 1 毫 升 菌 液 中 所 含 的 菌 体 数 。 这 种 方 法 简 便 ， 直 观 ， 快 捷 ， 但 只 适 宜 于 单 细 胞 状 态 的 微 生 物 或 丝 状 微 生 物 所 产 生 的 孢 子 进 行 计 数 ， 并 且 所 得 结 果 是 包 括 死 细 胞 在 内 的 总 菌 数 。 染 色 计 数 法 ： 为 了 弥 补 一 些 微 生 物 在 油 镜 下 不 易 观 察 计 数 ， 而 直 接 用 血 球 计 数 板 法 又 无 法 区 分 死 细 胞 和 活 细 胞 的 不 足 ， 人 们 发 明 了 染 色 计 数 法 。 借 助 不 同 的 染 料 对 菌 体 进 行 适 当 的 染 色 ， 可 以 更 方 便 的 在 显 微 镜 下 进 行 活 菌 计 数 。 如 酵 母 活 细 胞 计 数 可 用 美 蓝 染 色 液 ， 染 色 后 在 显 微 镜 下 观 察 ， 活 细 胞 为 无 色 ， 而 死 细 胞 为 蓝 色 。 比 例 计 数 法 ： 将 已 知 颗 粒 （ 如 霉 菌 孢 子 或 红 细 胞 ） 浓 度 的 液 体 与 一 待 测 细 胞 浓 度 的 菌 液 按 一 定 比 例 均 匀 混 合 ， 在 显 微 镜 视 野 中 数 出 各 自 的 数 目 ， 即 可 得 未 知 菌 液 的 细 胞 浓 度 。 这 种 计 数 方 法 比 较 粗 放 。 并 且 需 要 配 制 已 知 颗 粒 浓 度 的 悬 液 做 标 准 。 液 体 稀 释 法 ： 对 未 知 菌 样 做 连 续 十 倍 系 列 稀 释 ， 根 据 估 计 数 ， 从 最 适 宜 的 三 个 连 续 的 1 0 倍 稀 释 液 中 各 取 5 毫 升 试 样 ， 接 种 1 毫 升 到 3 组 共 1 5 只 装 培 养 液 的 试 管 中 ， 经 培 养 后 记 录 每 个 稀 释 度 出 现 生 长 的 试 管 数 ， 然 后 查 最 大 或 然 数 表 M P N （ m o s t p r o b a b l y n u m b e r ） 得 出 菌 样 的 含 菌 数 ， 根 据 样 品 稀 释 倍 数 计 算 出 活 菌 含 量 。 该 法 常 用 于 食 品 中 微 生 物 的 检 测 ， 例 如 饮 用 水 和 牛 奶 的 微 生 物 限 量 检 查 。 平 板 菌 落 计 数 法 ： 这 是 一 种 最 常 用 的 活 菌 计 数 法 。 将 待 测 菌 液 进 行 梯 度 稀 释 ， 取 一 定 体 积 的 稀 释 菌 液 与 合 适 的 固 体 培 养 基 在 凝 固 前 均 匀 混 合 ， 或 将 菌 液 涂 布 于 已 凝 固 的 固 体 培 养 基 平 板 上 。 保 温 培 养 后 ， 用 平 板 上 出 现 的 菌 落 数 乘 以 菌 液 稀 释 度 ， 即 可 算 出 原 菌 液 的 含 菌 数 。 一 般 以 直 径 9 c m 的 平 板 上 出 现 5 0 5 0 0 个 菌 落 为 宜 。 但 方 法 比 较 麻 烦 ， 操 作 者 需 有 熟 练 的 技 术 。 平 板 菌 落 计 数 法 不 仅 可 以 得 出 菌 液 中 活 菌 的 含 菌 数 ， 而 且 同 时 将 菌 液 中 的 细 菌 进 行 了 一 次 分 离 培 养 ， 获 得 了 单 克 隆 。 试 剂 纸 法 ： 在 平 板 计 数 法 的 基 础 上 ， 发 展 了 小 型 商 品 化 产 品 以 供 快 速 计 数 用 。 形 式 有 小 型 厚 滤 纸 片 ， 琼 脂 片 等 。 在 滤 纸 和 琼 脂 片 中 吸 有 合 适 的 培 养 基 ， 其 中 加 入 活 性 指 示 剂 2 ， 3 ， 5 氯 化 三 苯 基 四 氮 唑 （ T T C ， 无 色 ） 待 蘸 取 测 试 菌 液 后 置 密 封 包 装 袋 中 培 养 。 短 期 培 养 后 在 滤 纸 上 出 现 一 定 密 度 的 玫 瑰 色 微 小 菌 落 与 标 准 纸 色 板 上 图 谱 比 较 即 可 估 算 出 样 品 的 含 菌 量 。 试 剂 纸 法 计 数 快 捷 准 确 ， 相 比 而 言 避 免 了 平 板 计 数 法 的 人 为 操 作 误 差 。 膜 过 滤 法 ： 用 特 殊 的 滤 膜 过 滤 一 定 体 积 的 含 菌 样 品 ， 经 丫 叮 橙 染 色 ， 在 紫 外 显 微 镜 下 观 察 细 胞 的 荧 光 ， 活 细 胞 会 发 橙 色 荧 光 ， 而 死 细 胞 则 发 绿 色 荧 光 。 生 理 指 标 法 ： 微 生 物 的 生 长 伴 随 着 一 系 列 生 理 指 标 发 生 变 化 ， 例 如 酸 碱 度 ， 发 酵 液 中 的 含 氮 量 ， 含 糖 量 ， 产 气 量 等 ， 与 生 长 量 相 平 行 的 生 理 指 标 很 多 ， 它 们 可 作 为 生 长 测 定 的 相 对 值 。 测 定 含 氮 量 ： 大 多 数 细 菌 的 含 氮 量 为 干 重 的 1 2 . 5 % ， 酵 母 为 7 . 5 % ， 霉 菌 为 6 . 0 % 。 根 据 含 氮 量 × 6 . 2 5 ， 即 可 测 定 粗 蛋 白 的 含 量 。 含 氮 量 的 测 定 方 法 有 很 多 ， 如 用 硫 酸 ， 过 氯 酸 ， 碘 酸 ， 磷 酸 等 消 化 法 和 D u m a s 测 N 2 气 法 。 D u m a s 测 N 2 气 法 是 将 样 品 与 C u O 混 合 ， 在 C O 2 气 流 中 加 热 后 产 生 氮 气 ， 收 集 在 呼 吸 计 中 ， 用 K O H 吸 去 C O 2 后 即 可 测 出 N 2 的 量 。 测 定 含 碳 量 ： 将 少 量 （ 干 重 0 . 2 2 . 0 m g ） 生 物 材 料 混 入 1 毫 升 水 或 无 机 缓 冲 液 中 ， 用 2 毫 升 2 % 的 K 2 C r 2 O 7 溶 液 在 1 0 0 C 下 加 热 3 0 分 钟 后 冷 却 。 加 水 稀 释 至 5 毫 升 ， 在 5 8 0 n m 的 波 长 下 读 取 吸 光 光 度 值 ， 即 可 推 算 出 生 长 量 。 需 用 试 剂 做 空 白 对 照 ， 用 标 准 样 品 做 标 准 曲 线 。 还 原 糖 测 定 法 ： 还 原 糖 通 常 是 指 单 糖 或 寡 糖 ， 可 以 被 微 生 物 直 接 利 用 ， 通 过 还 原 糖 的 测 定 可 间 接 反 映 微 生 物 的 生 长 状 况 ， 常 用 于 大 规 模 工 业 发 酵 生 产 上 微 生 物 生 长 的 常 规 监 测 。 方 法 是 ， 离 心 发 酵 液 ， 取 上 清 液 ， 加 入 斐 林 试 剂 ， 沸 水 浴 煮 沸 3 分 钟 ， 取 出 加 少 许 盐 酸 酸 化 ， 加 入 N a 2 S 2 O 3 临 近 终 点 时 加 入 淀 粉 溶 液 ， 继 续 加 N a 2 S 2 O 3 至 终 点 ， 查 表 读 出 还 原 糖 的 含 量 。 氨 基 氮 的 测 定 ： 方 法 是 ， 离 心 发 酵 液 ， 取 上 清 液 ， 加 入 甲 基 红 和 盐 酸 作 指 示 剂 ， 加 入 0 . 0 2 N 的 N a O H 调 色 至 颜 色 刚 刚 褪 去 ， 加 入 底 物 1 8 % 的 中 性 甲 醛 ， 反 应 数 刻 ， 加 入 0 . 0 2 N 的 使 之 变 色 ， 根 据 N a O H 的 用 量 折 算 出 氨 基 氮 的 含 量 。 根 据 培 养 液 中 氨 基 氮 的 含 量 ， 可 间 接 反 映 微 生 物 的 生 长 状 况 。 其 他 生 理 物 质 的 测 定 ： P ， D N A ， R N A ， A T P ， N A M （ 乙 酰 胞 壁 酸 ） 等 含 量 以 及 产 酸 ， 产 气 ， 产 C O 2 （ 用 标 记 葡 萄 糖 做 基 质 ） ， 耗 氧 ， 黏 度 ， 产 热 等 指 标 ， 都 可 用 于 生 长 量 的 测 定 。 也 可 以 根 据 反 应 前 后 的 基 质 浓 度 变 化 ， 最 终 产 气 量 ， 微 生 物 活 性 三 方 面 的 测 定 反 映 微 生 物 的 生 长 。 如 我 所 在 B M P 2 的 发 酵 生 产 上 ， 随 时 监 测 溶 氧 量 的 变 化 和 酸 碱 度 的 变 化 ， 判 断 细 菌 的 长 势 。 商 业 化 快 速 微 生 物 检 测 法 ： 微 生 物 的 检 测 ， 其 发 展 方 向 是 快 速 ， 准 确 ， 简 便 ， 自 动 化 ， 当 前 很 多 生 物 制 品 公 司 利 用 传 统 微 生 物 检 测 原 理 ， 结 合 不 同 的 检 测 方 法 ， 设 计 了 形 式 各 异 的 微 生 物 检 测 仪 器 设 备 ， 正 逐 步 广 泛 应 用 于 医 学 微 生 物 检 测 和 科 学 研 究 领 域 。 例 如 ： 1 、 抗 干 扰 培 养 基 和 微 生 物 数 量 快 速 检 测 技 术 结 合 解 决 了 传 统 微 生 物 检 测 手 段 不 能 解 决 的 难 题 ， 为 建 立 一 套 完 整 的 抗 干 扰 微 生 物 检 测 系 统 奠 定 了 坚 实 的 基 础 。 中 科 院 广 州 分 院 合 作 产 业 处 提 供 的 抗 干 扰 微 生 物 培 养 基 ， 新 型 生 化 鉴 定 管 ， 微 生 物 计 数 卡 ， 环 境 质 量 检 测 试 剂 盒 等 ， 可 方 便 的 用 于 多 项 检 测 。 2 、 B A C T O M E T E R 全 自 动 各 类 总 菌 数 及 快 速 细 菌 检 测 系 统 可 以 数 小 时 内 获 得 监 测 结 果 ， 样 本 颜 色 及 光 学 特 征 都 不 影 响 读 数 ， 对 酵 母 和 霉 菌 检 测 同 样 高 度 敏 感 原 理 是 利 用 电 阻 抗 法 （ I M P E D A N C E T E C H N O L O G Y ） 将 待 测 样 本 与 培 养 基 置 于 反 应 试 剂 盒 内 ， 底 部 有 一 对 不 锈 钢 电 极 ， 测 定 因 微 生 物 生 长 而 产 生 阻 抗 改 变 。 如 微 生 物 生 长 时 可 将 培 养 基 中 的 大 分 子 营 养 物 经 代 谢 转 变 为 活 跃 小 分 子 ， 电 阻 抗 法 可 测 试 这 种 微 弱 变 化 ， 从 而 比 传 统 平 板 法 更 快 速 监 测 微 生 物 的 存 在 及 数 量 。 测 定 项 目 包 括 总 生 菌 数 ， 酵 母 菌 ， 大 肠 杆 菌 群 ， 霉 菌 ， 乳 酸 菌 ， 嗜 热 菌 ， 革 兰 氏 阴 性 菌 ， 金 黄 色 葡 萄 球 菌 等 。 一 微 生 物 致 力 于 为 全 球 微 生 物 学 研 究 与 应 用 的 创 新 发 展 而 服 务 。 美 国 微 生 物 科 学 院 院 士 牵 头 ， 多 名 国 内 外 微 生 物 学 、 机 械 自 动 化 、 电 子 信 息 学 学 科 专 家 组 成 研 发 、 生 产 和 销 售 微 生 物 科 学 实 验 室 科 学 仪 器 的 创 新 性 高 新 技 术 企 业 。 自 主 研 制 的 微 生 物 生 长 曲 线 分 析 仪 ， 高 通 量 微 生 物 筛 选 系 统 ， 高 通 量 测 试 仪 器 , 生 长 曲 线 检 测 , 致 病 菌 检 测 等 国 际 领 先 产 品 。 成 果 在 N A T U R E 、 C E L L 、 S C I E N C E 等 国 际 权 威 科 技 刊 物 上 发 表 了 许 多 高 水 平 高 引 用 文 章 。 欢 迎 有 需 求 的 朋 友 来 公 司 洽 谈 。 2 0 2 4 0 1 0 6 查 看 更 多 各 种 新 型 的 致 病 菌 检 测 技 术 ， 致 病 菌 检 测 （ 三 ） 噬 菌 体 辨 认 与 致 病 菌 检 测 技 能 噬 菌 体 辨 认 与 致 病 菌 检 测 技 能 已 成 为 病 原 菌 致 病 菌 检 测 范 畴 的 研 讨 热 门 。 噬 菌 体 是 一 种 能 够 入 侵 细 菌 并 驻 留 在 宿 主 中 进 行 增 殖 的 病 毒 。 其 主 要 致 病 菌 检 测 办 法 是 集 体 致 病 菌 检 测 ， 包 括 已 报 导 的 根 据 分 子 生 物 学 构 建 的 噬 菌 体 致 病 菌 检 测 技 能 ， 以 及 以 先 进 的 生 物 或 化 学 试 剂 为 弥 补 进 行 致 病 菌 检 测 的 办 法 ， 如 荧 光 标 记 。 其 中 ， 噬 菌 体 扩 增 法 选 用 免 疫 磁 别 离 线 圈 扩 增 法 。 致 病 菌 检 测 限 已 到 达 1 0 0 0 0 C F U / m L 。 然 而 ， 这 种 办 法 的 缺 点 是 ， 致 病 菌 检 测 需 求 许 多 条 件 可 供 选 择 ， 如 其 浓 度 和 感 染 时 刻 ， 有 必 要 提 前 筛 查 。 此 外 ， 还 有 噬 菌 体 技 能 的 报 导 。 他 们 的 报 告 包 含 l u x 基 因 ， 用 于 致 病 菌 检 测 一 些 不 同 样 品 基 质 中 的 大 肠 杆 菌 O 1 5 7 : H 7 。 尽 管 致 病 菌 检 测 时 刻 不 相 同 ， 但 致 病 菌 检 测 极 限 能 够 到 达 1 C F U / m L 。 在 荧 光 标 记 噬 菌 体 技 能 中 ， 它 们 已 经 取 得 了 一 些 杰 出 的 结 果 。 有 人 报 导 了 将 免 疫 磁 别 离 与 荧 光 标 记 噬 菌 体 技 能 相 结 合 来 致 病 菌 检 测 碎 牛 肉 和 鲜 奶 中 的 大 肠 杆 菌 。 牛 肉 中 大 肠 杆 菌 的 致 病 菌 检 测 限 到 达 2 . 2 C F U / g ， 鲜 奶 中 大 肠 杆 菌 致 病 菌 检 测 限 到 达 1 0 C U F / m L ~ 1 0 0 C U F / m L 。 结 论 食 品 安 全 问 题 关 系 到 咱 们 的 国 计 民 生 ， 关 系 到 整 个 经 济 社 会 的 不 断 发 展 。 咱 们 一 定 会 探 究 更 优 异 的 办 法 进 行 更 全 面 的 测 试 。 跟 着 人 们 对 微 生 物 的 理 解 逐 步 加 深 和 深 化 ， 咱 们 信 任 会 有 更 多 的 分 析 办 法 和 致 病 菌 检 测 技 能 能 够 应 用 于 咱 们 的 生 活 。 一 微 生 物 致 力 于 为 全 球 微 生 物 学 研 究 与 应 用 的 创 新 发 展 而 服 务 。 美 国 微 生 物 科 学 院 院 士 牵 头 ， 多 名 国 内 外 微 生 物 学 、 机 械 自 动 化 、 电 子 信 息 学 学 科 专 家 组 成 研 发 、 生 产 和 销 售 微 生 物 科 学 实 验 室 科 学 仪 器 的 创 新 性 高 新 技 术 企 业 。 高 通 量 测 试 仪 器 , 生 长 曲 线 检 测 , 致 病 菌 检 测 , 致 病 菌 检 测 技 术 , 微 生 物 菌 检 测 机 构 ， 自 主 研 制 的 微 生 物 生 长 曲 线 分 析 仪 、 高 通 量 微 生 物 筛 选 系 统 等 国 际 领 先 产 品 。 成 果 在 N A T U R E 、 C E L L 、 S C I E N C E 等 国 际 权 威 科 技 刊 物 上 发 表 了 许 多 高 水 平 高 引 用 文 章 。 2 0 2 4 0 1 0 6 查 看 更 多 产 品 推 荐 提 供 更 实 惠 ， 更 优 质 的 特 色 产 品 全 自 动 微 生 物 生 长 曲 线 分 析 仪 全 自 动 微 生 物 菌 落 工 作 站 全 自 动 菌 落 生 长 监 控 系 统 产 品 中 心 / P r o d u c t c e n t e r > 全 自 动 微 生 物 生 长 曲 线 分 析 仪 > 全 自 动 微 生 物 菌 落 工 作 站 > 全 自 动 菌 落 生 长 监 控 系 统 产 品 中 心 / P r o d u c t c e n t e r 地 址 : 广 东 省 广 州 市 黄 埔 区 南 翔 三 路 1 9 号 A 栋 邮 编 : 5 1 0 7 0 0 Q Q : 1 7 7 4 6 9 5 4 9 8 电 子 邮 箱 : y i w e i s h e n g w u 1 @ 1 6 3 . c o m 全 国 咨 询 服 务 热 线 1 3 8 0 2 9 1 8 3 1 5 在 线 咨 询 C o p y r i g h t © w w w . y i w e i b i o . c o m     广 州 一 微 生 物 科 技 有 限 公 司 高 通 量 测 试 仪 器 哪 家 好 ？ 生 长 曲 线 检 测 报 价 是 多 少 ？ 致 病 菌 检 测 质 量 怎 么 样 ？ 广 州 一 微 生 物 科 技 有 限 公 司 专 业 承 接 高 通 量 测 试 仪 器 , 生 长 曲 线 检 测 , 致 病 菌 检 测 , 致 病 菌 检 测 技 术 , 微 生 物 菌 检 测 机 构 , 电 话 : 1 3 8 0 2 9 1 8 3 1 5 备 案 号 ： 粤 I C P 备 2 0 2 2 0 0 8 3 8 3 号     P o w e r e d b y 筑 巢 E C M S C o p y r i g h t © w w w . y i w e i b i o . c o m ( 复 制 链 接 ) 广 州 一 微 生 物 科 技 有 限 公 司   备 案 号 ： 备 案 号 ： 粤 I C P 备 2 0 2 2 0 0 8 3 8 3 号 高 通 量 测 试 仪 器 哪 家 好 ？ 生 长 曲 线 检 测 报 价 是 多 少 ？ 致 病 菌 检 测 质 量 怎 么 样 ？ 广 州 一 微 生 物 科 技 有 限 公 司 专 业 承 接 高 通 量 测 试 仪 器 , 生 长 曲 线 检 测 , 致 病 菌 检 测 , 致 病 菌 检 测 技 术 , 微 生 物 菌 检 测 机 构 , 电 话 : 1 3 8 0 2 9 1 8 3 1 5 热 门 城 市 推 广 ： 北 京 广 东 山 东 四 川 湖 北 上 海 云 南 江 苏 浙 江 P o w e r e d b y 筑 巢 E C M S 微 信 在 线 客 服 一 键 拨 号 产 品 项 目 新 闻 资 讯 返 回 首 页

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