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网站快照E L I S A 试 剂 盒 酶 联 免 疫 试 剂 盒 高 敏 E L I S A 试 剂 盒 上 海 笃 玛 生 物 科 技 有 限 公 司 官 网 加 入 收 藏 您 好 ， 欢 迎 光 临 上 海 笃 玛 生 物 科 技 有 限 公 司 ！ 登 录 注 册 个 人 中 心 我 的 积 分 我 的 优 惠 我 的 收 藏 我 的 预 约 退 出 购 物 车 全 部 商 品 分 类 E L I S A 试 剂 盒 鱼 E L I S A 试 剂 盒 鸡 E L I S A 试 剂 盒 鱼 E L I S A 试 剂 盒 鸡 E L I S A 试 剂 盒 植 物 E L I S A 试 剂 盒 马 E L I S A 试 剂 盒 其 它 种 属 E L I S A 试 剂 盒 人 E L I S A 试 剂 盒 大 鼠 E L I S A 试 剂 盒 小 鼠 E L I S A 试 剂 盒 牛 E L I S A 试 剂 盒 猴 子 E L I S A 试 剂 盒 猪 E L I S A 试 剂 盒 绵 羊 E L I S A 试 剂 盒 犬 E L I S A 试 剂 盒 豚 鼠 E L I S A 试 剂 盒 网 站 首 页 关 于 我 们 产 品 中 心 技 术 文 章 常 见 问 题 新 闻 资 讯 代 理 品 牌 联 系 我 们 热 销 产 品 了 解 更 多 人 （ H u m a n ） 载 脂 蛋 白 E （ a p o E ） E L I S A 检 测 试 剂 盒 ￥ 2 6 0 0 人 （ H u m a n ） 载 脂 蛋 白 E （ a p o E ） E L I S A 检 测 试 剂 盒 试 剂 盒 性 能 1 . 特 异 性 高 ： 由 于 是 抗 原 抗 体 的 特 异 性 结 合 ， 因 此 试 验 的 特 异 性 很 高 ， 能 够 排 除 其 他 物 质 的 干 扰 。 2 . 灵 敏 度 高 ： 由 于 酶 的 放 大 作 用 ， 使 得 试 验 的 灵 敏 度 大 大 提 高 ， 能 够 检 测 出 微 量 的 抗 原 或 抗 体 。 3 . 操 作 简 便 ： E L I S A 试 验 操 作 相 对 简 单 ， 容 易 掌 握 ， 适 合 于 大 规 模 样 本 检 测 。 4 . 适 用 范 围 广 ： 可 以 用 于 检 测 各 种 抗 原 、 抗 体 和 激 素 等 生 物 分 子 。 样 品 收 集 、 处 理 及 保 存 方 法 1 . 血 清 ： 使 用 不 含 热 原 和 内 毒 素 的 试 管 ， 操 作 过 程 中 避 免 任 何 细 胞 刺 激 ， 收 集 血 液 后 ， 3 0 0 0 转 离 心 1 0 分 钟 将 血 清 和 红 细 胞 迅 速 小 心 地 分 离 。 2 . 血 浆 ： E D T A 、 柠 檬 酸 盐 或 肝 素 抗 凝 。 3 0 0 0 转 离 心 3 0 分 钟 取 上 清 。 3 . 细 胞 上 清 液 ： 3 0 0 0 转 离 心 1 0 分 钟 去 除 颗 粒 和 聚 合 物 。 4 . 组 织 匀 浆 ： 将 组 织 加 入 适 量 生 理 盐 水 捣 碎 。 3 0 0 0 转 离 心 1 0 分 钟 取 上 清 。 5 . 保 存 ： 如 果 样 本 收 集 后 不 及 时 检 测 ， 请 按 一 次 用 量 分 装 ， 冻 存 于 2 0 ℃ ， 避 免 反 复 冻 融 ， 在 室 温 下 解 冻 并 确 保 样 品 均 匀 地 充 分 解 冻 。 实 验 原 理 试 剂 盒 采 用 双 抗 体 一 步 夹 心 法 酶 联 吸 附 试 验 （ E L I S A ） 。 往 预 先 包 被 相 关 指 标 的 抗 体 的 包 被 微 孔 中 ， 依 次 加 入 标 本 、 标 准 品 、 H R P 标 记 的 检 测 抗 体 ， 经 过 温 育 并 洗 涤 。 用 底 物 T M B 显 色 ， T M B 在 过 氧 化 物 酶 的 催 化 下 转 化 成 蓝 色 ， 并 在 酸 的 作 用 下 转 化 成 终 的 黄 色 。 颜 色 的 深 浅 和 样 品 中 的 相 关 指 标 呈 正 相 关 。 用 酶 标 仪 在 4 5 0 n m 波 长 下 测 定 吸 光 度 （ O D 值 ） ， 计 算 样 品 浓 度 。 试 剂 盒 组 成 操 作 步 骤 1 ) 涂 层 : 微 孔 板 的 孔 涂 上 捕 获 抗 体 或 抗 原 。 2 ) 封 闭 : 孔 内 加 入 封 闭 剂 ( 如 牛 血 清 白 蛋 白 或 羧 甲 基 纤 维 素 ) ， 阻 止 非 特 异 性 蛋 白 质 结 合 。 3 ) 样 本 添 加 : 加 入 含 有 未 知 浓 度 的 目 标 抗 原 或 抗 体 的 样 本 。 4 ) 洗 涤 : 去 除 未 结 合 的 物 质 。 5 ) 检 测 抗 体 添 加 : 加 入 对 特 定 抗 原 有 特 异 性 的 酶 标 记 检 测 抗 体 。 6 ) 再 次 洗 涤 : 再 次 去 除 未 结 合 的 检 测 抗 体 。 7 ) 底 物 添 加 : 加 入 酶 的 底 物 ， 酶 作 用 于 底 物 产 生 颜 色 变 化 。 8 ) 终 止 反 应 : 加 入 终 止 溶 液 停 止 酶 的 反 应 ( 在 某 些 类 型 的 E L I S A 中 需 要 ) 。 9 ) 读 数 : 使 用 光 谱 光 度 计 测 定 每 个 孔 的 吸 光 度 ( 通 常 是 在 特 定 波 长 下 ) ， 吸 光 度 与 样 本 中 抗 原 或 抗 体 的 浓 度 成 正 比 。 标 本 的 采 集 及 保 存 1 . 血 清 ： 全 血 标 本 请 于 室 温 放 置 2 小 时 或 4 ℃ 过 一 晚 后 于 1 0 0 0 x g 离 心 2 0 分 钟 ， 取 上 清 即 可 检 测 ， 或 将 标 本 放 于 2 0 ℃ 或 8 0 ℃ 保 存 ， 但 应 避 免 反 复 冻 融 。 2 . 血 浆 ： 可 用 E D T A 或 肝 素 作 为 抗 凝 剂 ， 标 本 采 集 后 3 0 分 钟 内 于 2 8 ° C 1 0 0 0 x g 离 心 1 5 分 钟 ， 或 将 标 本 放 于 2 0 ℃ 或 8 0 ℃ 保 存 ， 但 应 避 免 反 复 冻 融 。 3 . 细 胞 培 养 物 上 清 或 其 它 生 物 标 本 ： 1 0 0 0 x g 离 心 2 0 分 钟 ， 取 上 清 即 可 检 测 ， 或 将 标 本 放 于 2 0 ℃ 或 8 0 ℃ 保 存 ， 但 应 避 免 反 复 冻 融 。 ( 注 ： 标 本 溶 血 会 影 响 * * 检 测 结 果 ， 因 此 溶 血 标 本 不 宜 进 行 此 项 检 测 。 ) 结 果 分 析 根 据 试 剂 盒 提 供 的 标 准 品 浓 度 及 对 应 的 O D 值 ， 利 用 标 准 品 绘 制 的 标 准 曲 线 ， 计 算 待 测 样 品 的 浓 度 。 一 般 采 用 拟 合 曲 线 法 或 直 线 回 归 法 进 行 数 据 处 理 ， 通 过 计 算 得 到 待 测 样 品 的 浓 度 。 免 责 声 明 试 剂 盒 仅 供 研 究 使 用 ， 不 得 用 于 临 床 实 验 或 生 物 体 实 验 ， 否 则 所 产 生 的 一 切 后 果 ， 由 实 验 者 承 担 ， 本 公 司 概 不 负 责 。 严 格 按 照 说 明 书 操 作 ， 不 同 批 号 不 可 交 换 使 用 ， 实 验 者 违 反 说 明 书 操 作 ， 后 果 由 实 验 者 承 担 。 人 P 物 质 ( S P ) E L I S A 试 剂 盒 ￥ 2 6 0 0 人 P 物 质 ( S P ) E L I S A 试 剂 盒 实 验 原 理 试 剂 盒 采 用 双 抗 体 一 步 夹 心 法 酶 联 吸 附 试 验 （ E L I S A ） 。 往 预 先 包 被 相 关 指 标 的 抗 体 的 包 被 微 孔 中 ， 依 次 加 入 标 本 、 标 准 品 、 H R P 标 记 的 检 测 抗 体 ， 经 过 温 育 并 洗 涤 。 用 底 物 T M B 显 色 ， T M B 在 过 氧 化 物 酶 的 催 化 下 转 化 成 蓝 色 ， 并 在 酸 的 作 用 下 转 化 成 终 的 黄 色 。 颜 色 的 深 浅 和 样 品 中 的 相 关 指 标 呈 正 相 关 。 用 酶 标 仪 在 4 5 0 n m 波 长 下 测 定 吸 光 度 （ O D 值 ） ， 计 算 样 品 浓 度 。 试 剂 盒 性 能 1 . 特 异 性 高 ： 由 于 是 抗 原 抗 体 的 特 异 性 结 合 ， 因 此 试 验 的 特 异 性 很 高 ， 能 够 排 除 其 他 物 质 的 干 扰 。 2 . 灵 敏 度 高 ： 由 于 酶 的 放 大 作 用 ， 使 得 试 验 的 灵 敏 度 大 大 提 高 ， 能 够 检 测 出 微 量 的 抗 原 或 抗 体 。 3 . 操 作 简 便 ： E L I S A 试 验 操 作 相 对 简 单 ， 容 易 掌 握 ， 适 合 于 大 规 模 样 本 检 测 。 4 . 适 用 范 围 广 ： 可 以 用 于 检 测 各 种 抗 原 、 抗 体 和 激 素 等 生 物 分 子 。 试 剂 盒 组 成 试 剂 盒 组 成 4 8 孔 配 置 9 6 孔 配 置 保 存 说 明 书 1 份 1 份 封 板 膜 2 片 （ 4 8 ） 2 片 （ 9 6 ） 密 封 袋 1 个 1 个 酶 标 包 被 板 1 × 4 8 1 × 9 6 2 8 ℃ 保 存 标 准 品 0 . 5 m l × 1 瓶 0 . 5 m l × 1 瓶 2 8 ℃ 保 存 标 准 品 稀 释 液 1 . 5 m l × 1 瓶 1 . 5 m l × 1 瓶 2 8 ℃ 保 存 酶 标 试 剂 3 m l × 1 瓶 6 m l × 1 瓶 2 8 ℃ 保 存 样 品 稀 释 液 3 m l × 1 瓶 6 m l × 1 瓶 2 8 ℃ 保 存 显 色 剂 A 液 3 m l × 1 瓶 6 m l × 1 瓶 2 8 ℃ 保 存 显 色 剂 B 液 3 m l × 1 瓶 6 m l × 1 瓶 2 8 ℃ 保 存 终 止 液 3 m l × 1 瓶 6 m l × 1 瓶 2 8 ℃ 保 存 2 0 倍 浓 缩 洗 涤 液 2 0 m l × 1 瓶 2 3 m l × 1 瓶 2 8 ℃ 保 存 操 作 步 骤 人 P 物 质 ( S P ) E L I S A 试 剂 盒 1 . 对 应 板 孔 中 加 入 1 0 0 μ L 标 准 品 工 作 液 或 样 本 ， 3 7 ℃ 孵 育 9 0 分 钟 2 . 弃 掉 板 内 液 体 后 ， 立 即 加 入 1 0 0 μ L 生 物 s u 化 抗 体 工 作 液 ， 3 7 ℃ 孵 育 6 0 分 钟 3 . 弃 掉 板 内 液 体 ， 洗 板 3 次 4 . 每 孔 加 入 1 0 0 μ L H R P 酶 结 合 物 工 作 液 ， 3 7 ℃ 孵 育 3 0 分 钟 ， 弃 掉 板 内 液 体 ， 洗 板 5 次 5 . 每 孔 加 入 9 0 μ L 底 物 溶 液 ， 3 7 ℃ 孵 育 1 5 分 钟 左 右 6 . 每 孔 加 入 5 0 μ L 终 止 液 7 . 立 即 在 4 5 0 n m 波 长 下 读 数 ， 处 理 数 据 标 本 的 采 集 及 保 存 1 . 血 清 ： 全 血 标 本 请 于 室 温 放 置 2 小 时 或 4 ℃ 过 一 晚 后 于 1 0 0 0 x g 离 心 2 0 分 钟 ， 取 上 清 即 可 检 测 ， 或 将 标 本 放 于 2 0 ℃ 或 8 0 ℃ 保 存 ， 但 应 避 免 反 复 冻 融 。 2 . 血 浆 ： 可 用 E D T A 或 肝 素 作 为 抗 凝 剂 ， 标 本 采 集 后 3 0 分 钟 内 于 2 8 ° C 1 0 0 0 x g 离 心 1 5 分 钟 ， 或 将 标 本 放 于 2 0 ℃ 或 8 0 ℃ 保 存 ， 但 应 避 免 反 复 冻 融 。 3 . 细 胞 培 养 物 上 清 或 其 它 生 物 标 本 ： 1 0 0 0 x g 离 心 2 0 分 钟 ， 取 上 清 即 可 检 测 ， 或 将 标 本 放 于 2 0 ℃ 或 8 0 ℃ 保 存 ， 但 应 避 免 反 复 冻 融 。 ( 注 ： 标 本 溶 血 会 影 响 * * 检 测 结 果 ， 因 此 溶 血 标 本 不 宜 进 行 此 项 检 测 。 ) 免 责 声 明 试 剂 盒 仅 供 研 究 使 用 ， 不 得 用 于 临 床 实 验 或 生 物 体 实 验 ， 否 则 所 产 生 的 一 切 后 果 ， 由 实 验 者 承 担 ， 本 公 司 概 不 负 责 。 严 格 按 照 说 明 书 操 作 ， 不 同 批 号 不 可 交 换 使 用 ， 实 验 者 违 反 说 明 书 操 作 ， 后 果 由 实 验 者 承 担 。 相 关 产 品 D M 5 3 9 4 人 微 管 关 联 蛋 白 ( M A P τ ) 酶 联 免 疫 试 剂 盒 D M 5 3 9 5 人 T G F β 诱 导 早 期 应 答 基 因 1 ( T I E G 1 ) 酶 联 免 疫 试 剂 盒 D M 5 3 9 6 人 T o l l 样 受 体 2 ( T L R 2 ) 酶 联 免 疫 试 剂 盒 D M 5 3 9 7 人 T o l l 样 受 体 9 ( T L R 9 ) 酶 联 免 疫 试 剂 盒 D M 5 3 9 8 人 T U 3 A 蛋 白 ( T U 3 A ) 酶 联 免 疫 试 剂 盒 D M 5 3 9 9 人 蛋 白 酶 激 活 受 体 3 ( P A R 3 ) 酶 联 免 疫 试 剂 盒 D M 5 4 0 0 人 T 细 胞 活 化 连 接 蛋 白 ( L A T ) 酶 联 免 疫 试 剂 盒 D M 5 4 0 1 人 T 细 胞 急 性 淋 巴 母 细 胞 白 血 病 相 关 抗 原 ( T A L L A 1 / C D 2 3 1 ) 酶 联 免 疫 试 剂 盒 D M 5 4 0 2 人 T 细 胞 生 长 因 子 Ⅲ ( T C G F Ⅲ ) 酶 联 免 疫 试 剂 盒 D M 5 4 0 3 人 T 细 胞 受 体 ( T C R ) 酶 联 免 疫 试 剂 盒 D M 5 4 0 4 人 T 细 胞 特 异 性 鸟 苷 三 磷 酸 酶 ( T g t p ) 酶 联 免 疫 试 剂 盒 D M 5 4 0 5 人 β 骨 胶 原 交 联 ( β C T x ) 酶 联 免 疫 试 剂 盒 人 （ H u m a n ） 甲 胎 蛋 白 （ A F P ） E L I S A 检 测 试 剂 盒 ￥ 2 6 0 0 本 试 剂 盒 只 能 用 于 科 学 研 究 ， 不 得 用 于 医 学 诊 断 人 （ H u m a n ） 甲 胎 蛋 白 （ A F P ） E L I S A 检 测 试 剂 盒 使 用 说 明 书 检 测 原 理 试 剂 盒 采 用 双 抗 体 一 步 夹 心 法 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 （ E L I S A ） 。 往 预 先 包 被 甲 胎 蛋 白 （ A F P ） 抗 体 的 包 被 微 孔 中 ， 依 次 加 入 标 本 、 标 准 品 、 H R P 标 记 的 检 测 抗 体 ， 经 过 温 育 并 彻 底 洗 涤 。 用 底 物 T M B 显 色 ， T M B 在 过 氧 化 物 酶 的 催 化 下 转 化 成 蓝 色 ， 并 在 酸 的 作 用 下 转 化 成 ＊ 终 的 黄 色 。 颜 色 的 深 浅 和 样 品 中 的 甲 胎 蛋 白 （ A F P ） 呈 正 相 关 。 用 酶 标 仪 在 4 5 0 n m 波 长 下 测 定 吸 光 度 （ O D 值 ） ， 计 算 样 品 浓 度 。 样 品 收 集 、 处 理 及 保 存 方 法 1 . 血 清 ： 使 用 不 含 热 原 和 内 毒 素 的 试 管 ， 操 作 过 程 中 避 免 任 何 细 胞 刺 激 ， 收 集 血 液 后 ， 3 0 0 0 转 离 心 1 0 分 钟 将 血 清 和 红 细 胞 迅 速 小 心 地 分 离 。 2 . 血 浆 ： E D T A 、 柠 檬 酸 盐 或 肝 素 抗 凝 。 3 0 0 0 转 离 心 3 0 分 钟 取 上 清 。 3 . 细 胞 上 清 液 ： 3 0 0 0 转 离 心 1 0 分 钟 去 除 颗 粒 和 聚 合 物 。 4 . 组 织 匀 浆 ： 将 组 织 加 入 适 量 生 理 盐 水 捣 碎 。 3 0 0 0 转 离 心 1 0 分 钟 取 上 清 。 5 . 保 存 ： 如 果 样 本 收 集 后 不 及 时 检 测 ， 请 按 一 次 用 量 分 装 ， 冻 存 于 2 0 ℃ ， 避 免 反 复 冻 融 ， 在 室 温 下 解 冻 并 确 保 样 品 均 匀 地 充 分 解 冻 。 自 备 物 品 1 . 酶 标 仪 （ 4 5 0 n m ） 2 . 高 精 度 加 样 器 及 枪 头 ： 0 . 5 1 0 u L 、 2 2 0 u L 、 2 0 2 0 0 u L 、 2 0 0 1 0 0 0 u L 3 . 3 7 ℃ 恒 温 箱 操 作 注 意 事 项 1 . 试 剂 盒 保 存 在 2 8 ℃ ， 使 用 前 室 温 平 衡 2 0 分 钟 。 从 冰 箱 取 出 的 浓 缩 洗 涤 液 会 有 结 晶 ， 这 属 于 正 常 现 象 ， 水 浴 加 热 使 结 晶 完 全 溶 解 后 再 使 用 。 2 . 实 验 中 不 用 的 板 条 应 立 即 放 回 自 封 袋 中 ， 密 封 （ 低 温 干 燥 ） 保 存 。 3 . 浓 度 为 0 的 S 0 号 标 准 品 即 可 视 为 阴 性 对 照 或 者 空 白 ； 按 照 说 明 书 操 作 时 样 本 已 经 稀 释 5 倍 ， ＊ 终 结 果 乘 以 5 才 是 样 本 实 际 浓 度 。 4 . 严 格 按 照 说 明 书 中 标 明 的 时 间 、 加 液 量 及 顺 序 进 行 温 育 操 作 。 5 . 所 有 液 体 组 分 使 用 前 充 分 摇 匀 。 试 剂 盒 组 成 名 称 9 6 孔 配 置 4 8 孔 配 置 备 注 微 孔 酶 标 板 1 2 孔 × 8 条 1 2 孔 × 4 条 无 标 准 品 0 . 3 m L * 6 管 0 . 3 m L * 6 管 无 样 本 稀 释 液 6 m L 3 m L 无 检 测 抗 体 H R P 1 0 m L 5 m L 无 2 0 × 洗 涤 缓 冲 液 2 5 m L 1 5 m L 按 说 明 书 进 行 稀 释 底 物 A 6 m L 3 m L 无 底 物 B 6 m L 3 m L 无 终 止 液 6 m L 3 m L 无 封 板 膜 2 张 2 张 无 说 明 书 1 份 1 份 无 自 封 袋 1 个 1 个 无 注 ： 标 准 品 （ S 0 S 5 ） 浓 度 依 次 为 ： 0 、 2 、 4 、 8 、 1 6 、 3 2 n g / m L 试 剂 的 准 备 2 0 × 洗 涤 缓 冲 液 的 稀 释 ： 蒸 馏 水 按 1 ： 2 0 稀 释 ， 即 1 份 的 2 0 × 洗 涤 缓 冲 液 加 1 9 份 的 蒸 馏 水 。 洗 板 方 法 1 . 手 工 洗 板 ： 甩 尽 孔 内 液 体 ， 每 孔 加 满 洗 涤 液 ， 静 置 1 m i n 后 甩 尽 孔 内 液 体 ， 在 吸 水 纸 上 拍 干 ， 如 此 洗 板 5 次 。 2 . 自 动 洗 板 机 ： 每 孔 注 入 洗 液 3 5 0 μ L ， 浸 泡 1 m i n ， 洗 板 5 次 。 操 作 步 骤 1 . 从 室 温 平 衡 2 0 m i n 后 的 铝 箔 袋 中 取 出 所 需 板 条 ， 剩 余 板 条 用 自 封 袋 密 封 放 回 4 ℃ 。 2 . 设 置 标 准 品 孔 和 样 本 孔 ， 标 准 品 孔 各 加 不 同 浓 度 的 标 准 品 5 0 μ L ； 3 . 样 本 孔 先 加 待 测 样 本 1 0 μ L ， 再 加 样 本 稀 释 液 4 0 μ L ； 空 白 孔 不 加 。 4 . 除 空 白 孔 外 ， 标 准 品 孔 和 样 本 孔 中 每 孔 加 入 辣 根 过 氧 化 物 酶 （ H R P ） 标 记 的 检 测 抗 体 1 0 0 μ L ， 用 封 板 膜 封 住 反 应 孔 ， 3 7 ℃ 水 浴 锅 或 恒 温 箱 温 育 6 0 m i n 。 5 . 弃 去 液 体 ， 吸 水 纸 上 拍 干 ， 每 孔 加 满 洗 涤 液 ， 静 置 1 m i n ， 甩 去 洗 涤 液 ， 吸 水 纸 上 拍 干 ， 如 此 重 复 洗 板 5 次 （ 也 可 用 洗 板 机 洗 板 ） 。 6 . 每 孔 加 入 底 物 A 、 B 各 5 0 μ L ， 3 7 ℃ 避 光 孵 育 1 5 m i n 。 7 . 每 孔 加 入 终 止 液 5 0 μ L ， 1 5 m i n 内 ， 在 4 5 0 n m 波 长 处 测 定 各 孔 的 O D 值 。 结 果 判 断 绘 制 标 准 曲 线 ： 在 E x c e l 工 作 表 中 ， 以 标 准 品 浓 度 作 横 坐 标 ， 对 应 O D 值 作 纵 坐 标 ， 绘 制 出 标 准 品 线 性 回 归 曲 线 ， 按 曲 线 方 程 计 算 各 样 本 浓 度 值 。 试 剂 盒 性 能 1 . 准 确 性 ： 标 准 品 线 性 回 归 与 预 期 浓 度 相 关 系 数 R 值 ， 大 于 等 于 0 . 9 9 0 0 。 2 . 灵 敏 度 ： ＊ 低 检 测 浓 度 小 于 0 . 1 n g / m L 。 3 . 特 异 性 ： 不 与 其 它 可 溶 性 结 构 类 似 物 交 叉 反 应 。 4 . 重 复 性 ： 板 内 、 板 间 变 异 系 数 均 小 于 1 5 % 。 5 . 贮 藏 ： 2 8 ℃ ， 避 光 防 潮 保 存 。 6 . 有 效 期 ： 6 个 月 免 责 声 明 1 . 试 剂 盒 仅 供 研 究 使 用 ， 不 得 用 于 临 床 实 验 或 人 体 实 验 ， 否 则 所 产 生 的 一 切 后 果 ， 由 实 验 者 承 担 ， 本 公 司 概 不 负 责 。 2 . 严 格 按 照 说 明 书 操 作 ， 实 验 者 违 反 说 明 书 操 作 ， 后 果 由 实 验 者 承 担 。 F O R R E S E A R C H U S E O N L Y . N O T F O R U S E I N D I A G N O S T I C P R O C E D U R E S . H u m a n A l p h a f e t o p r o t e i n ( A F P ) E L I S A K i t i n s t r u c t i o n I n t e n d e d u s e T h i s A F P E L I S A k i t i s i n t e n d e d L a b o r a t o r y f o r R e s e a r c h u s e o n l y a n d i s n o t f o r u s e i n d i a g n o s t i c o r t h e r a p e u t i c p r o c e d u r e s . T h e S t o p S o l u t i o n c h a n g e s t h e c o l o r f r o m b l u e t o y e l l o w a n d t h e i n t e n s i t y o f t h e c o l o r i s m e a s u r e d a t 4 5 0 n m u s i n g a s p e c t r o p h o t o m e t e r . I n o r d e r t o m e a s u r e t h e c o n c e n t r a t i o n o f A F P i n t h e s a m p l e , t h i s A F P E L I S A K i t i n c l u d e s a s e t o f c a l i b r a t i o n s t a n d a r d s . T h e c a l i b r a t i o n s t a n d a r d s a r e a s s a y e d a t t h e s a m e t i m e a s t h e s a m p l e s a n d a l l o w t h e o p e r a t o r t o p r o d u c e a s t a n d a r d c u r v e o f O p t i c a l D e n s i t y v e r s u s A F P c o n c e n t r a t i o n . T h e c o n c e n t r a t i o n o f A F P i n t h e s a m p l e s i s t h e n d e t e r m i n e d b y c o m p a r i n g t h e O . D . o f t h e s a m p l e s t o t h e s t a n d a r d c u r v e . S a m p l e c o l l e c t i o n a n d s t o r a g e s S e r u m U s e a s e r u m s e p a r a t o r t u b e a n d a l l o w s a m p l e s t o c l o t f o r 3 0 m i n u t e s b e f o r e c e n t r i f u g a t i o n f o r 1 0 m i n u t e s a t a p p r o x i m a t e l y 3 0 0 0 × g . R e m o v e s e r u m a n d a s s a y i m m e d i a t e l y o r a l i q u o t a n d s t o r e s a m p l e s a t 2 0 ℃ o r 8 0 ℃ . A v o i d r e p e a t e d f r e e z e t h a w c y c l e s P l a s m a C o l l e c t p l a s m a u s i n g E D T A o r h e p a r i n a s a n a n t i c o a g u l a n t . C e n t r i f u g e s a m p l e s f o r 3 0 m i n u t e s a t 3 0 0 0 × g a t 2 8 ℃ w i t h i n 3 0 m i n u t e s o f c o l l e c t i o n . S t o r e s a m p l e s a t 2 0 ℃ o r 8 0 ℃ . A v o i d r e p e a t e d f r e e z e t h a w c y c l e s . C e l l c u l t u r e s u p e r n a t e s a n d o t h e r b i o l o g i c a l f l u i d s R e m o v e p a r t i c u l a t e s b y c e n t r i f u g a t i o n a n d a s s a y i m m e d i a t e l y o r a l i q u o t a n d s t o r e s a m p l e s a t 2 0 ℃ o r 8 0 ℃ . A v o i d r e p e a t e d f r e e z e t h a w c y c l e s . N o t e : T h e s a m p l e s s h o u l e b e c e n t r i f u g a t e d d e q u a t e l y a n d n o h e m o l y s i s o r g r a n u l e w a s a l l o w e d . M a t e r i a l s r e q u i r e d b u t n o t s u p p l i e d 1 . S t a n d a r d m i c r o p l a t e r e a d e r ( 4 5 0 n m ) 2 . P r e c i s i o n p i p e t t e s a n d D i s p o s a b l e p i p e t t e t i p s . 3 . 3 7 ℃ i n c u b a t o r P r e c a u t i o n s 1 . D o n o t s u b s t i t u t e r e a g e n t s f r o m o n e k i t t o a n o t h e r . S t a n d a r d , c o n j u g a t e a n d m i c r o p l a t e s a r e m a t c h e d f o r o p t i m a l p e r f o r m a n c e . U s e o n l y t h e r e a g e n t s s u p p l i e d b y m a n u f a c t u r e r . 2 . D o n o t r e m o v e m i c r o p l a t e f r o m t h e s t o r a g e b a g u n t i l n e e d e d . U n u s e d s t r i p s s h o u l d b e s t o r e d a t 2 8 ° C i n t h e i r p o u c h w i t h t h e d e s i c c a n t p r o v i d e d . 3 . M i x a l l r e a g e n t s b e f o r e u s i n g . R e m o v e a l l k i t r e a g e n t s f r o m r e f r i g e r a t o r a n d a l l o w t h e m t o r e a c h r o o m t e m p e r a t u r e ( 2 0 2 5 ° C ) M a t e r i a l s s u p p l i e d N a m e 9 6 d e t e r m i n a t i o n s 4 8 d e t e r m i n a t i o n s M i c r o e l i s a s t r i p p l a t e 1 2 * 8 s t r i p s 1 2 * 4 s t r i p s S t a n d a r d 0 . 3 m l * 6 t u b e s 0 . 3 m l * 6 t u b e s S a m p l e D i l u e n t 6 . 0 m l 3 . 0 m l H R P C o n j u g a t e r e a g e n t 1 0 . 0 m l 5 . 0 m l 2 0 X W a s h s o l u t i o n 2 5 m l 1 5 m l C h r o m o g e n S o l u t i o n A 6 . 0 m l 3 . 0 m l C h r o m o g e n S o l u t i o n B 6 . 0 m l 3 . 0 m l S t o p S o l u t i o n 6 . 0 m l 3 . 0 m l C l o s u r e p l a t e m e m b r a n e 2 2 U s e r m a n u a l 1 1 S e a l e d b a g s 1 1 N o t e : S t a n d a r d ( S 0 → S 5 ) c o n c e n t r a t i o n w a s f o l l o w e d b y : 0 , 2 , 4 , 8 , 1 6 , 3 2 n g / m l . R e a g e n t p r e p a r a t i o n 2 0 × w a s h s o l u t i o n : D i l u t e w i t h D i s t i l l e d o r d e i o n i z e d w a t e r 1 : 2 0 . A s s a y p r o c e d u r e 1 . P r e p a r e a l l r e a g e n t s b e f o r e s t a r t i n g a s s a y p r o c e d u r e . I t i s r e c o m m e n d e d t h a t a l l S t a n d a r d s a n d S a m p l e s b e a d d e d i n d u p l i c a t e t o t h e M i c r o e l i s a S t r i p p l a t e . 2 . A d d s t a n d a r d : S e t S t a n d a r d w e l l s , t e s t i n g s a m p l e w e l l s . A d d s t a n d a r d 5 0 μ l t o s t a n d a r d w e l l . 3 . A d d S a m p l e : A d d t e s t i n g s a m p l e 1 0 μ l t h e n a d d S a m p l e D i l u e n t 4 0 μ l t o t e s t i n g s a m p l e w e l l ; B l a n k w e l l d o e s n ’ t a d d a n y t i n g . 4 . A d d 1 0 0 μ l o f H R P c o n j u g a t e r e a g e n t t o e a c h w e l l , c o v e r w i t h a n a d h e s i v e s t r i p a n d i n c u b a t e f o r 6 0 m i n u t e s a t 3 7 ° C . 5 . A s p i r a t e e a c h w e l l a n d w a s h , r e p e a t i n g t h e p r o c e s s f o u r t i m e s f o r a t o t a l o f f i v e w a s h e s . W a s h b y f i l l i n g e a c h w e l l w i t h W a s h S o l u t i o n ( 4 0 0 μ l ) u s i n g a s q u i r t b o t t l e , m a n i f o l d d i s p e n s e r o r a u t o w a s h e r . C o m p l e t e r e m o v a l o f l i q u i d a t e a c h s t e p i s e s s e n t i a l t o g o o d p e r f o r m a n c e . A f t e r t h e l a s t w a s h , r e m o v e a n y r e m a i n i n g W a s h S o l u t i o n b y a s p i r a t i n g o r d e c a n t i n g . I n v e r t t h e p l a t e a n d b l o t i t a g a i n s t c l e a n p a p e r t o w e l s . 6 . A d d c h r o m o g e n s o l u t i o n A 5 0 μ l a n d c h r o m o g e n s o l u t i o n B 5 0 μ l t o e a c h w e l l . G e n t l y m i x a n d i n c u b a t e f o r 1 5 m i n u t e s a t 3 7 ° C . P r o t e c t f r o m l i g h t . 7 . A d d 5 0 μ l S t o p S o l u t i o n t o e a c h w e l l . T h e c o l o r i n t h e w e l l s s h o u l d c h a n g e f r o m b l u e t o y e l l o w . I f t h e c o l o r i n t h e w e l l s i s g r e e n o r t h e c o l o r c h a n g e d o e s n o t a p p e a r u n i f o r m , g e n t l y t a p t h e p l a t e t o e n s u r e t h o r o u g h m i x i n g . 8 . R e a d t h e O p t i c a l D e n s i t y ( O . D . ) a t 4 5 0 n m u s i n g a m i c r o t i t e r p l a t e r e a d e r w i t h i n 1 5 m i n u t e s . C a l c u l a t i o n o f r e s u l t s 1 . T h i s s t a n d a r d c u r v e i s u s e d t o d e t e r m i n e t h e a m o u n t i n a n u n k n o w n s a m p l e . T h e s t a n d a r d c u r v e i s g e n e r a t e d b y p l o t t i n g t h e a v e r a g e O . D . ( 4 5 0 n m ) o b t a i n e d f o r e a c h o f t h e s i x s t a n d a r d c o n c e n t r a t i o n s o n t h e v e r t i c a l ( Y ) a x i s v e r s u s t h e c o r r e s p o n d i n g c o n c e n t r a t i o n o n t h e h o r i z o n t a l ( X ) a x i s . 2 . F i r s t , c a l c u l a t e t h e m e a n O . D . v a l u e f o r e a c h s t a n d a r d a n d s a m p l e . A l l O . D . v a l u e s , a r e s u b t r a c t e d b y t h e m e a n v a l u e o f t h e z e r o s t a n d a r d b e f o r e r e s u l t i n t e r p r e t a t i o n . C o n s t r u c t t h e s t a n d a r d c u r v e u s i n g g r a p h p a p e r o r s t a t i s t i c a l s o f t w a r e . 3 . T o d e t e r m i n e t h e a m o u n t i n e a c h s a m p l e , f i r s t l o c a t e t h e O . D . v a l u e o n t h e Y a x i s a n d e x t e n d a h o r i z o n t a l l i n e t o t h e s t a n d a r d c u r v e . A t t h e p o i n t o f i n t e r s e c t i o n , d r a w a v e r t i c a l l i n e t o t h e X a x i s a n d r e a d t h e c o r r e s p o n d i n g c o n c e n t r a t i o n . 4 . A n y v a r i a t i o n i n o p e r a t o r , p i p e t t i n g a n d w a s h i n g t e c h n i q u e , i n c u b a t i o n t i m e o r t e m p e r a t u r e , a n d k i t a g e c a n c a u s e v a r i a t i o n i n r e s u l t . E a c h u s e r s h o u l d o b t a i n t h e i r o w n s t a n d a r d c u r v e . 5 . T h e s e n s i t i v i t y b y t h i s a s s a y i s 0 . 1 n g / m l 6 . S t a n d a r d c u r v e S t o r a g e ： 2 8 ℃ . v a l i d i t y ： s i x m o n t h s . F O R R E S E A R C H U S E O N L Y ; N O T F O R T H E R A P E U T I C O R D I A G N O S T I C A P P L I C A T I O N S ! P L E A S E R E A D T H R O U G H E N T I R E P R O C E D U R E B E F O R E B E G I N N I N G ! 人 （ H u m a n ） 白 蛋 白 （ A L B ） E L I S A 检 测 试 剂 盒 ￥ 2 6 0 0 本 试 剂 盒 只 能 用 于 科 学 研 究 ， 不 得 用 于 医 学 诊 断 人 （ H u m a n ） 白 蛋 白 （ A L B ） E L I S A 检 测 试 剂 盒 使 用 说 明 书 检 测 原 理 试 剂 盒 采 用 双 抗 体 一 步 夹 心 法 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 （ E L I S A ） 。 往 预 先 包 被 白 蛋 白 （ A L B ） 抗 体 的 包 被 微 孔 中 ， 依 次 加 入 标 本 、 标 准 品 、 H R P 标 记 的 检 测 抗 体 ， 经 过 温 育 并 彻 底 洗 涤 。 用 底 物 T M B 显 色 ， T M B 在 过 氧 化 物 酶 的 催 化 下 转 化 成 蓝 色 ， 并 在 酸 的 作 用 下 转 化 成 ＊ 终 的 黄 色 。 颜 色 的 深 浅 和 样 品 中 的 白 蛋 白 （ A L B ） 呈 正 相 关 。 用 酶 标 仪 在 4 5 0 n m 波 长 下 测 定 吸 光 度 （ O D 值 ） ， 计 算 样 品 浓 度 。 样 品 收 集 、 处 理 及 保 存 方 法 1 . 血 清 ： 使 用 不 含 热 原 和 内 毒 素 的 试 管 ， 操 作 过 程 中 避 免 任 何 细 胞 刺 激 ， 收 集 血 液 后 ， 3 0 0 0 转 离 心 1 0 分 钟 将 血 清 和 红 细 胞 迅 速 小 心 地 分 离 。 2 . 血 浆 ： E D T A 、 柠 檬 酸 盐 或 肝 素 抗 凝 。 3 0 0 0 转 离 心 3 0 分 钟 取 上 清 。 3 . 细 胞 上 清 液 ： 3 0 0 0 转 离 心 1 0 分 钟 去 除 颗 粒 和 聚 合 物 。 4 . 组 织 匀 浆 ： 将 组 织 加 入 适 量 生 理 盐 水 捣 碎 。 3 0 0 0 转 离 心 1 0 分 钟 取 上 清 。 5 . 保 存 ： 如 果 样 本 收 集 后 不 及 时 检 测 ， 请 按 一 次 用 量 分 装 ， 冻 存 于 2 0 ℃ ， 避 免 反 复 冻 融 ， 在 室 温 下 解 冻 并 确 保 样 品 均 匀 地 充 分 解 冻 。 自 备 物 品 1 . 酶 标 仪 （ 4 5 0 n m ） 2 . 高 精 度 加 样 器 及 枪 头 ： 0 . 5 1 0 u L 、 2 2 0 u L 、 2 0 2 0 0 u L 、 2 0 0 1 0 0 0 u L 3 . 3 7 ℃ 恒 温 箱 操 作 注 意 事 项 1 . 试 剂 盒 保 存 在 2 8 ℃ ， 使 用 前 室 温 平 衡 2 0 分 钟 。 从 冰 箱 取 出 的 浓 缩 洗 涤 液 会 有 结 晶 ， 这 属 于 正 常 现 象 ， 水 浴 加 热 使 结 晶 完 全 溶 解 后 再 使 用 。 2 . 实 验 中 不 用 的 板 条 应 立 即 放 回 自 封 袋 中 ， 密 封 （ 低 温 干 燥 ） 保 存 。 3 . 浓 度 为 0 的 S 0 号 标 准 品 即 可 视 为 阴 性 对 照 或 者 空 白 ； 按 照 说 明 书 操 作 时 样 本 已 经 稀 释 5 倍 ， ＊ 终 结 果 乘 以 5 才 是 样 本 实 际 浓 度 。 4 . 严 格 按 照 说 明 书 中 标 明 的 时 间 、 加 液 量 及 顺 序 进 行 温 育 操 作 。 5 . 所 有 液 体 组 分 使 用 前 充 分 摇 匀 。 试 剂 盒 组 成 名 称 9 6 孔 配 置 4 8 孔 配 置 备 注 微 孔 酶 标 板 1 2 孔 × 8 条 1 2 孔 × 4 条 无 标 准 品 0 . 3 m L * 6 管 0 . 3 m L * 6 管 无 样 本 稀 释 液 6 m L 3 m L 无 检 测 抗 体 H R P 1 0 m L 5 m L 无 2 0 × 洗 涤 缓 冲 液 2 5 m L 1 5 m L 按 说 明 书 进 行 稀 释 底 物 A 6 m L 3 m L 无 底 物 B 6 m L 3 m L 无 终 止 液 6 m L 3 m L 无 封 板 膜 2 张 2 张 无 说 明 书 1 份 1 份 无 自 封 袋 1 个 1 个 无 注 ： 标 准 品 （ S 0 S 5 ） 浓 度 依 次 为 ： 0 、 6 . 2 5 、 1 2 . 5 、 2 5 、 5 0 、 1 0 0 m g / m L 试 剂 的 准 备 2 0 × 洗 涤 缓 冲 液 的 稀 释 ： 蒸 馏 水 按 1 ： 2 0 稀 释 ， 即 1 份 的 2 0 × 洗 涤 缓 冲 液 加 1 9 份 的 蒸 馏 水 。 洗 板 方 法 1 . 手 工 洗 板 ： 甩 尽 孔 内 液 体 ， 每 孔 加 满 洗 涤 液 ， 静 置 1 m i n 后 甩 尽 孔 内 液 体 ， 在 吸 水 纸 上 拍 干 ， 如 此 洗 板 5 次 。 2 . 自 动 洗 板 机 ： 每 孔 注 入 洗 液 3 5 0 μ L ， 浸 泡 1 m i n ， 洗 板 5 次 。 操 作 步 骤 1 . 从 室 温 平 衡 2 0 m i n 后 的 铝 箔 袋 中 取 出 所 需 板 条 ， 剩 余 板 条 用 自 封 袋 密 封 放 回 4 ℃ 。 2 . 设 置 标 准 品 孔 和 样 本 孔 ， 标 准 品 孔 各 加 不 同 浓 度 的 标 准 品 5 0 μ L ； 3 . 样 本 孔 先 加 待 测 样 本 1 0 μ L ， 再 加 样 本 稀 释 液 4 0 μ L ； 空 白 孔 不 加 。 4 . 除 空 白 孔 外 ， 标 准 品 孔 和 样 本 孔 中 每 孔 加 入 辣 根 过 氧 化 物 酶 （ H R P ） 标 记 的 检 测 抗 体 1 0 0 μ L ， 用 封 板 膜 封 住 反 应 孔 ， 3 7 ℃ 水 浴 锅 或 恒 温 箱 温 育 6 0 m i n 。 5 . 弃 去 液 体 ， 吸 水 纸 上 拍 干 ， 每 孔 加 满 洗 涤 液 ， 静 置 1 m i n ， 甩 去 洗 涤 液 ， 吸 水 纸 上 拍 干 ， 如 此 重 复 洗 板 5 次 （ 也 可 用 洗 板 机 洗 板 ） 。 6 . 每 孔 加 入 底 物 A 、 B 各 5 0 μ L ， 3 7 ℃ 避 光 孵 育 1 5 m i n 。 7 . 每 孔 加 入 终 止 液 5 0 μ L ， 1 5 m i n 内 ， 在 4 5 0 n m 波 长 处 测 定 各 孔 的 O D 值 。 结 果 判 断 绘 制 标 准 曲 线 ： 在 E x c e l 工 作 表 中 ， 以 标 准 品 浓 度 作 横 坐 标 ， 对 应 O D 值 作 纵 坐 标 ， 绘 制 出 标 准 品 线 性 回 归 曲 线 ， 按 曲 线 方 程 计 算 各 样 本 浓 度 值 。 试 剂 盒 性 能 1 . 准 确 性 ： 标 准 品 线 性 回 归 与 预 期 浓 度 相 关 系 数 R 值 ， 大 于 等 于 0 . 9 9 0 0 。 2 . 灵 敏 度 ： ＊ 低 检 测 浓 度 小 于 1 . 0 m g / m L 。 3 . 特 异 性 ： 不 与 其 它 可 溶 性 结 构 类 似 物 交 叉 反 应 。 4 . 重 复 性 ： 板 内 、 板 间 变 异 系 数 均 小 于 1 5 % 。 5 . 贮 藏 ： 2 8 ℃ ， 避 光 防 潮 保 存 。 6 . 有 效 期 ： 6 个 月 免 责 声 明 1 . 试 剂 盒 仅 供 研 究 使 用 ， 不 得 用 于 临 床 实 验 或 人 体 实 验 ， 否 则 所 产 生 的 一 切 后 果 ， 由 实 验 者 承 担 ， 本 公 司 概 不 负 责 。 2 . 严 格 按 照 说 明 书 操 作 ， 实 验 者 违 反 说 明 书 操 作 ， 后 果 由 实 验 者 承 担 。 F O R R E S E A R C H U S E O N L Y . N O T F O R U S E I N D I A G N O S T I C P R O C E D U R E S . H u m a n A l b u m i n ( A L B ) E L I S A K i t i n s t r u c t i o n I n t e n d e d u s e T h i s A L B E L I S A k i t i s i n t e n d e d L a b o r a t o r y f o r R e s e a r c h u s e o n l y a n d i s n o t f o r u s e i n d i a g n o s t i c o r t h e r a p e u t i c p r o c e d u r e s . T h e S t o p S o l u t i o n c h a n g e s t h e c o l o r f r o m b l u e t o y e l l o w a n d t h e i n t e n s i t y o f t h e c o l o r i s m e a s u r e d a t 4 5 0 n m u s i n g a s p e c t r o p h o t o m e t e r . I n o r d e r t o m e a s u r e t h e c o n c e n t r a t i o n o f A L B i n t h e s a m p l e , t h i s A L B E L I S A K i t i n c l u d e s a s e t o f c a l i b r a t i o n s t a n d a r d s . T h e c a l i b r a t i o n s t a n d a r d s a r e a s s a y e d a t t h e s a m e t i m e a s t h e s a m p l e s a n d a l l o w t h e o p e r a t o r t o p r o d u c e a s t a n d a r d c u r v e o f O p t i c a l D e n s i t y v e r s u s A L B c o n c e n t r a t i o n . T h e c o n c e n t r a t i o n o f A L B i n t h e s a m p l e s i s t h e n d e t e r m i n e d b y c o m p a r i n g t h e O . D . o f t h e s a m p l e s t o t h e s t a n d a r d c u r v e . S a m p l e c o l l e c t i o n a n d s t o r a g e s S e r u m U s e a s e r u m s e p a r a t o r t u b e a n d a l l o w s a m p l e s t o c l o t f o r 3 0 m i n u t e s b e f o r e c e n t r i f u g a t i o n f o r 1 0 m i n u t e s a t a p p r o x i m a t e l y 3 0 0 0 × g . R e m o v e s e r u m a n d a s s a y i m m e d i a t e l y o r a l i q u o t a n d s t o r e s a m p l e s a t 2 0 ℃ o r 8 0 ℃ . A v o i d r e p e a t e d f r e e z e t h a w c y c l e s P l a s m a C o l l e c t p l a s m a u s i n g E D T A o r h e p a r i n a s a n a n t i c o a g u l a n t . C e n t r i f u g e s a m p l e s f o r 3 0 m i n u t e s a t 3 0 0 0 × g a t 2 8 ℃ w i t h i n 3 0 m i n u t e s o f c o l l e c t i o n . S t o r e s a m p l e s a t 2 0 ℃ o r 8 0 ℃ . A v o i d r e p e a t e d f r e e z e t h a w c y c l e s . C e l l c u l t u r e s u p e r n a t e s a n d o t h e r b i o l o g i c a l f l u i d s R e m o v e p a r t i c u l a t e s b y c e n t r i f u g a t i o n a n d a s s a y i m m e d i a t e l y o r a l i q u o t a n d s t o r e s a m p l e s a t 2 0 ℃ o r 8 0 ℃ . A v o i d r e p e a t e d f r e e z e t h a w c y c l e s . N o t e : T h e s a m p l e s s h o u l e b e c e n t r i f u g a t e d d e q u a t e l y a n d n o h e m o l y s i s o r g r a n u l e w a s a l l o w e d . M a t e r i a l s r e q u i r e d b u t n o t s u p p l i e d 1 . S t a n d a r d m i c r o p l a t e r e a d e r ( 4 5 0 n m ) 2 . P r e c i s i o n p i p e t t e s a n d D i s p o s a b l e p i p e t t e t i p s . 3 . 3 7 ℃ i n c u b a t o r P r e c a u t i o n s 1 . D o n o t s u b s t i t u t e r e a g e n t s f r o m o n e k i t t o a n o t h e r . S t a n d a r d , c o n j u g a t e a n d m i c r o p l a t e s a r e m a t c h e d f o r o p t i m a l p e r f o r m a n c e . U s e o n l y t h e r e a g e n t s s u p p l i e d b y m a n u f a c t u r e r . 2 . D o n o t r e m o v e m i c r o p l a t e f r o m t h e s t o r a g e b a g u n t i l n e e d e d . U n u s e d s t r i p s s h o u l d b e s t o r e d a t 2 8 ° C i n t h e i r p o u c h w i t h t h e d e s i c c a n t p r o v i d e d . 3 . M i x a l l r e a g e n t s b e f o r e u s i n g . R e m o v e a l l k i t r e a g e n t s f r o m r e f r i g e r a t o r a n d a l l o w t h e m t o r e a c h r o o m t e m p e r a t u r e ( 2 0 2 5 ° C ) M a t e r i a l s s u p p l i e d N a m e 9 6 d e t e r m i n a t i o n s 4 8 d e t e r m i n a t i o n s M i c r o e l i s a s t r i p p l a t e 1 2 * 8 s t r i p s 1 2 * 4 s t r i p s S t a n d a r d 0 . 3 m l * 6 t u b e s 0 . 3 m l * 6 t u b e s S a m p l e D i l u e n t 6 . 0 m l 3 . 0 m l H R P C o n j u g a t e r e a g e n t 1 0 . 0 m l 5 . 0 m l 2 0 X W a s h s o l u t i o n 2 5 m l 1 5 m l C h r o m o g e n S o l u t i o n A 6 . 0 m l 3 . 0 m l C h r o m o g e n S o l u t i o n B 6 . 0 m l 3 . 0 m l S t o p S o l u t i o n 6 . 0 m l 3 . 0 m l C l o s u r e p l a t e m e m b r a n e 2 2 U s e r m a n u a l 1 1 S e a l e d b a g s 1 1 N o t e : S t a n d a r d ( S 0 → S 5 ) c o n c e n t r a t i o n w a s f o l l o w e d b y : 0 , 6 . 2 5 , 1 2 . 5 , 2 5 , 5 0 , 1 0 0 m g / m L R e a g e n t p r e p a r a t i o n 2 0 × w a s h s o l u t i o n : D i l u t e w i t h D i s t i l l e d o r d e i o n i z e d w a t e r 1 : 2 0 . A s s a y p r o c e d u r e 1 . P r e p a r e a l l r e a g e n t s b e f o r e s t a r t i n g a s s a y p r o c e d u r e . I t i s r e c o m m e n d e d t h a t a l l S t a n d a r d s a n d S a m p l e s b e a d d e d i n d u p l i c a t e t o t h e M i c r o e l i s a S t r i p p l a t e . 2 . A d d s t a n d a r d : S e t S t a n d a r d w e l l s , t e s t i n g s a m p l e w e l l s . A d d s t a n d a r d 5 0 μ l t o s t a n d a r d w e l l . 3 . A d d S a m p l e : A d d t e s t i n g s a m p l e 1 0 μ l t h e n a d d S a m p l e D i l u e n t 4 0 μ l t o t e s t i n g s a m p l e w e l l ; B l a n k w e l l d o e s n ’ t a d d a n y t i n g . 4 . A d d 1 0 0 μ l o f H R P c o n j u g a t e r e a g e n t t o e a c h w e l l , c o v e r w i t h a n a d h e s i v e s t r i p a n d i n c u b a t e f o r 6 0 m i n u t e s a t 3 7 ° C . 5 . A s p i r a t e e a c h w e l l a n d w a s h , r e p e a t i n g t h e p r o c e s s f o u r t i m e s f o r a t o t a l o f f i v e w a s h e s . W a s h b y f i l l i n g e a c h w e l l w i t h W a s h S o l u t i o n ( 4 0 0 μ l ) u s i n g a s q u i r t b o t t l e , m a n i f o l d d i s p e n s e r o r a u t o w a s h e r . C o m p l e t e r e m o v a l o f l i q u i d a t e a c h s t e p i s e s s e n t i a l t o g o o d p e r f o r m a n c e . A f t e r t h e l a s t w a s h , r e m o v e a n y r e m a i n i n g W a s h S o l u t i o n b y a s p i r a t i n g o r d e c a n t i n g . I n v e r t t h e p l a t e a n d b l o t i t a g a i n s t c l e a n p a p e r t o w e l s . 6 . A d d c h r o m o g e n s o l u t i o n A 5 0 μ l a n d c h r o m o g e n s o l u t i o n B 5 0 μ l t o e a c h w e l l . G e n t l y m i x a n d i n c u b a t e f o r 1 5 m i n u t e s a t 3 7 ° C . P r o t e c t f r o m l i g h t . 7 . A d d 5 0 μ l S t o p S o l u t i o n t o e a c h w e l l . T h e c o l o r i n t h e w e l l s s h o u l d c h a n g e f r o m b l u e t o y e l l o w . I f t h e c o l o r i n t h e w e l l s i s g r e e n o r t h e c o l o r c h a n g e d o e s n o t a p p e a r u n i f o r m , g e n t l y t a p t h e p l a t e t o e n s u r e t h o r o u g h m i x i n g . 8 . R e a d t h e O p t i c a l D e n s i t y ( O . D . ) a t 4 5 0 n m u s i n g a m i c r o t i t e r p l a t e r e a d e r w i t h i n 1 5 m i n u t e s . C a l c u l a t i o n o f r e s u l t s 1 . T h i s s t a n d a r d c u r v e i s u s e d t o d e t e r m i n e t h e a m o u n t i n a n u n k n o w n s a m p l e . T h e s t a n d a r d c u r v e i s g e n e r a t e d b y p l o t t i n g t h e a v e r a g e O . D . ( 4 5 0 n m ) o b t a i n e d f o r e a c h o f t h e s i x s t a n d a r d c o n c e n t r a t i o n s o n t h e v e r t i c a l ( Y ) a x i s v e r s u s t h e c o r r e s p o n d i n g c o n c e n t r a t i o n o n t h e h o r i z o n t a l ( X ) a x i s . 2 . F i r s t , c a l c u l a t e t h e m e a n O . D . v a l u e f o r e a c h s t a n d a r d a n d s a m p l e . A l l O . D . v a l u e s , a r e s u b t r a c t e d b y t h e m e a n v a l u e o f t h e z e r o s t a n d a r d b e f o r e r e s u l t i n t e r p r e t a t i o n . C o n s t r u c t t h e s t a n d a r d c u r v e u s i n g g r a p h p a p e r o r s t a t i s t i c a l s o f t w a r e . 3 . T o d e t e r m i n e t h e a m o u n t i n e a c h s a m p l e , f i r s t l o c a t e t h e O . D . v a l u e o n t h e Y a x i s a n d e x t e n d a h o r i z o n t a l l i n e t o t h e s t a n d a r d c u r v e . A t t h e p o i n t o f i n t e r s e c t i o n , d r a w a v e r t i c a l l i n e t o t h e X a x i s a n d r e a d t h e c o r r e s p o n d i n g c o n c e n t r a t i o n . 4 . A n y v a r i a t i o n i n o p e r a t o r , p i p e t t i n g a n d w a s h i n g t e c h n i q u e , i n c u b a t i o n t i m e o r t e m p e r a t u r e , a n d k i t a g e c a n c a u s e v a r i a t i o n i n r e s u l t . E a c h u s e r s h o u l d o b t a i n t h e i r o w n s t a n d a r d c u r v e . 5 . T h e s e n s i t i v i t y b y t h i s a s s a y i s 0 . 1 m g / m L 6 . S t a n d a r d c u r v e S t o r a g e ： 2 8 ℃ . v a l i d i t y ： s i x m o n t h s . F O R R E S E A R C H U S E O N L Y ; N O T F O R T H E R A P E U T I C O R D I A G N O S T I C A P P L I C A T I O N S ! P L E A S E R E A D T H R O U G H E N T I R E P R O C E D U R E B E F O R E B E G I N N I N G ! 小 鼠 4 羟 基 壬 烯 醛 ( 4 H N E ) E L I S A 试 剂 盒 ￥ 2 6 8 0 仅 供 研 究 使 用 小 鼠 4 羟 基 壬 烯 醛 ( 4 H N E ) E L I S A 试 剂 盒 实 验 原 理 ： 试 剂 盒 采 用 双 抗 体 一 步 夹 心 法 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 （ E L I S A ） 。 往 预 先 包 被 小 鼠 4 羟 基 壬 烯 醛 ( 4 H N E ) 捕 获 抗 体 的 包 被 微 孔 中 ， 依 次 加 入 标 本 、 标 准 品 、 H R P 标 记 的 检 测 抗 体 ， 经 过 温 育 并 彻 底 洗 涤 。 用 底 物 T M B 显 色 ， T M B 在 过 氧 化 物 酶 的 催 化 下 转 化 成 蓝 色 ， 并 在 酸 的 作 用 下 转 化 成 ＊ 终 的 黄 色 。 颜 色 的 深 浅 和 样 品 中 的 小 鼠 4 羟 基 壬 烯 醛 ( 4 H N E ) 呈 正 相 关 。 用 酶 标 仪 在 4 5 0 n m 波 长 下 测 定 吸 光 度 （ O D 值 ） ， 计 算 样 品 浓 度 。 试 剂 盒 组 成 ： 试 剂 盒 组 成 4 8 孔 配 置 9 6 孔 配 置 保 存 说 明 书 1 份 1 份 密 封 袋 1 个 1 个 封 板 膜 1 2 孔 × 4 条 2 片 （ 9 6 ） 2 8 ℃ 保 存 微 孔 酶 标 板 1 × 4 8 1 2 孔 × 8 条 2 8 ℃ 保 存 标 准 品 0 . 3 m L * 6 管 0 . 3 m L * 6 管 2 8 ℃ 保 存 标 准 品 稀 释 液 1 . 5 m l × 1 瓶 1 . 5 m l × 1 瓶 2 8 ℃ 保 存 酶 标 试 剂 3 m l × 1 瓶 6 m l × 1 瓶 2 8 ℃ 保 存 样 品 稀 释 液 3 m l × 1 瓶 6 m l × 1 瓶 2 8 ℃ 保 存 显 色 剂 A 液 3 m l × 1 瓶 6 m l × 1 瓶 2 8 ℃ 保 存 显 色 剂 B 液 3 m l × 1 瓶 6 m l × 1 瓶 2 8 ℃ 保 存 终 止 液 3 m l × 1 瓶 6 m l × 1 瓶 2 8 ℃ 保 存 注 意 ： 使 用 前 请 检 查 试 剂 盒 中 试 剂 的 标 签 和 数 量 与 表 格 是 否 一 致 。 试 剂 盒 操 作 步 骤 ： 实 验 开 始 前 ， 请 提 前 配 置 好 所 有 试 剂 ， 试 剂 或 样 品 稀 释 时 ， 均 需 混 匀 ， 混 匀 时 尽 量 避 免 起 泡 。 每 次 检 测 都 应 该 做 标 准 曲 线 。 如 样 品 浓 度 过 高 时 ， 用 样 品 稀 释 液 进 行 稀 释 ， 以 使 样 品 符 合 试 剂 盒 的 检 测 范 围 。 1 . 加 样 ： 分 别 设 空 白 孔 、 标 准 孔 、 待 测 样 品 孔 。 空 白 孔 加 样 品 稀 释 液 1 0 0 μ l ， 余 孔 分 别 加 标 准 品 或 待 测 样 品 1 0 0 μ l ， 注 意 不 要 有 气 泡 ， 加 样 将 样 品 加 于 酶 标 板 孔 底 部 ， 尽 量 不 触 及 孔 壁 ， 轻 轻 晃 动 混 匀 ， 酶 标 板 加 上 盖 或 覆 膜 ， 3 7 ℃ 反 应 1 2 0 分 钟 。 为 保 证 实 验 结 果 有 效 性 ， 每 次 实 验 请 使 用 新 的 标 准 品 溶 液 。 2 . 弃 去 液 体 ， 甩 干 ， 不 用 洗 涤 。 每 孔 加 生 物 素 标 记 抗 体 工 作 液 1 0 0 μ l （ 取 1 μ l 生 物 素 标 记 抗 体 加 9 9 μ l 生 物 素 标 记 抗 体 稀 释 液 的 比 例 配 制 ， 轻 轻 混 匀 ， 在 使 用 前 一 小 时 内 配 制 ） ， 3 7 ℃ , 6 0 分 钟 。 3 . 温 育 6 0 分 钟 后 ， 弃 去 孔 内 液 体 ， 甩 干 ， 洗 板 3 次 ， 每 次 浸 泡 1 2 分 钟 ， 3 5 0 μ l / 每 孔 ， 甩 干 。 4 . 每 孔 加 辣 根 过 氧 化 物 酶 标 记 亲 和 素 工 作 液 （ 同 生 物 素 标 记 抗 体 工 作 液 ） 1 0 0 μ l ， 3 7 ℃ ， 6 0 分 钟 。 5 . 温 育 6 0 分 钟 后 ， 弃 去 孔 内 液 体 ， 甩 干 ， 洗 板 5 次 ， 每 次 浸 泡 1 2 分 钟 ， 3 5 0 μ l / 每 孔 ， 甩 干 。 6 . 依 序 每 孔 加 底 物 溶 液 9 0 μ l ， 3 7 ℃ 避 光 显 色 （ 3 0 分 钟 内 ， 此 时 肉 眼 可 见 标 准 品 的 前 3 4 孔 有 明 显 的 梯 度 蓝 色 ， 后 3 4 孔 梯 度 不 明 显 ， 即 可 终 止 ） 。 7 . 依 序 每 孔 加 终 止 溶 液 5 0 μ l ， 终 止 反 应 （ 此 时 蓝 色 立 转 黄 色 ） 。 终 止 液 的 加 入 顺 序 应 尽 量 与 底 物 液 的 加 入 顺 序 相 同 。 为 了 保 证 实 验 结 果 的 准 确 性 ， 底 物 反 应 时 间 到 后 应 尽 快 加 入 终 止 液 。 8 . 用 酶 联 仪 在 4 5 0 n m 波 长 依 序 测 量 各 孔 的 光 密 度 （ O D 值 ） 。 在 加 终 止 液 后 1 5 分 钟 以 内 进 行 检 测 。 小 鼠 4 羟 基 壬 烯 醛 ( 4 H N E ) E L I S A 试 剂 盒 标 本 的 采 集 及 保 存 ： 血 清 ： 全 血 标 本 请 于 室 温 放 置 2 小 时 或 4 ℃ 过 一 晚 后 于 1 0 0 0 x g 离 心 2 0 分 钟 ， 取 上 清 即 可 检 测 ， 或 将 标 本 放 于 2 0 ℃ 或 8 0 ℃ 保 存 ， 但 应 避 免 反 复 冻 融 。 血 浆 ： 可 用 E D T A 或 肝 素 作 为 抗 凝 剂 ， 标 本 采 集 后 3 0 分 钟 内 于 2 8 ° C 1 0 0 0 x g 离 心 1 5 分 钟 ， 或 将 标 本 放 于 2 0 ℃ 或 8 0 ℃ 保 存 ， 但 应 避 免 反 复 冻 融 。 细 胞 培 养 物 上 清 或 其 它 生 物 标 本 ： 1 0 0 0 x g 离 心 2 0 分 钟 ， 取 上 清 即 可 检 测 ， 或 将 标 本 放 于 2 0 ℃ 或 8 0 ℃ 保 存 ， 但 应 避 免 反 复 冻 融 。 ( 注 ： 标 本 溶 血 会 影 响 * * 检 测 结 果 ， 因 此 溶 血 标 本 不 宜 进 行 此 项 检 测 。 ) 标 本 的 稀 释 原 则 ： 首 先 通 过 文 献 检 索 的 方 式 了 解 待 测 样 本 的 大 致 含 量 ， 确 定 适 当 的 稀 释 倍 数 。 只 有 稀 释 至 标 准 曲 线 的 范 围 内 ， 检 测 的 结 果 才 是 准 确 的 。 稀 释 的 过 程 中 ， 应 做 好 详 细 的 记 录 。 计 算 浓 度 时 ， 稀 释 了 “ N ” 倍 ， 标 本 的 浓 度 应 再 乘 以 “ N ” 。 标 准 品 的 稀 释 原 则 ： 2 瓶 ， 每 瓶 临 用 前 以 样 品 稀 释 液 稀 释 至 1 m l ， 盖 好 后 静 置 1 0 分 钟 以 上 ， 然 后 反 复 颠 倒 / 搓 动 以 助 溶 解 ， 其 浓 度 为 3 0 0 p g / m l ， 做 系 列 倍 比 稀 释 后 ， 分 别 稀 释 3 0 0 p g / m l ， 1 5 0 p g / m l ， 7 5 p g / m l ， 3 7 . 5 p g / m l ， 1 8 . 5 p g / m l ， 9 p g / m l ， 4 . 5 p g / m l ， 样 品 稀 释 液 直 接 作 为 标 准 浓 度 0 p g / m l ， 临 用 前 1 5 分 钟 内 配 制 。 如 配 制 1 5 0 p g / m l 标 准 品 ： 取 0 . 5 m l （ 不 要 少 于 0 . 5 m l ） 3 0 0 p g / m l 的 上 述 标 准 品 加 入 含 0 . 5 m l 样 品 稀 释 液 的 E p p e n d o r f 管 中 ， 混 匀 即 可 ， 其 余 浓 度 以 此 类 推 。 生 物 素 标 记 抗 体 的 稀 释 原 则 ： 临 用 前 以 生 物 素 标 记 抗 体 稀 释 液 稀 释 ， 稀 释 前 根 据 预 先 计 算 好 的 每 次 实 验 所 需 的 总 量 配 制 （ 每 孔 1 0 0 μ l ） ， 实 际 配 制 时 应 多 配 制 0 . 1 0 . 2 m l 。 如 1 0 μ l 生 物 素 标 记 抗 体 加 9 9 0 μ l 生 物 素 标 记 抗 体 稀 释 液 的 比 例 配 制 ， 轻 轻 混 匀 ， 在 使 用 前 一 小 时 内 配 制 。 辣 根 过 氧 化 物 酶 标 记 亲 和 素 的 稀 释 原 则 ： 临 用 前 以 辣 根 过 氧 化 物 酶 标 记 亲 和 素 稀 释 液 稀 释 ， 稀 释 前 根 据 预 先 计 算 好 的 每 次 实 验 所 需 的 总 量 配 制 （ 每 孔 1 0 0 μ l ） ， 实 际 配 制 时 应 多 配 制 0 . 1 0 . 2 m l 。 如 1 0 μ l 辣 根 过 氧 化 物 酶 标 记 亲 和 素 加 9 9 0 μ l 辣 根 过 氧 化 物 酶 标 记 亲 和 素 稀 释 液 的 比 例 配 制 ， 轻 轻 混 匀 ， 在 使 用 前 一 小 时 内 配 制 实 验 结 果 计 算 ： 以 标 准 物 的 浓 度 为 横 坐 标 （ 对 数 坐 标 ） ， O D 值 为 纵 坐 标 （ 普 通 坐 标 ） ， 在 半 对 数 坐 标 纸 上 绘 出 标 准 曲 线 ， 根 据 样 品 的 O D 值 由 标 准 曲 线 查 出 相 应 的 浓 度 ； 再 乘 以 稀 释 倍 数 ； 或 用 标 准 物 的 浓 度 与 O D 值 计 算 出 标 准 曲 线 的 直 线 回 归 方 程 式 ， 将 样 品 的 O D 值 代 入 方 程 式 ， 计 算 出 样 品 浓 度 ， 再 乘 以 稀 释 倍 数 ， 即 为 样 品 的 实 际 浓 度 。 绘 制 标 准 曲 线 ： 在 E x c e l 工 作 表 中 ， 以 标 准 品 浓 度 作 横 坐 标 ， 对 应 O D 值 作 纵 坐 标 ， 绘 制 出 标 准 品 线 性 回 归 曲 线 ， 按 曲 线 方 程 计 算 各 样 本 浓 度 值 。 注 意 事 项 ： 1 . 当 混 合 蛋 白 溶 液 时 应 尽 量 轻 缓 ， 避 免 起 泡 。 2 . 洗 涤 过 程 非 常 重 要 ， 不 充 分 的 洗 涤 易 造 成 假 阳 性 。 3 . 一 次 加 样 时 间 * * 控 制 在 5 分 钟 内 ， 如 标 本 数 量 多 ， 建 议 使 用 排 枪 加 样 。 4 . 请 每 次 测 定 的 同 时 做 标 准 曲 线 ， 做 复 孔 。 5 . 如 标 本 中 待 测 物 质 含 量 过 高 ， 请 先 稀 释 后 再 测 定 ， 计 算 时 请 乘 以 稀 释 倍 数 。 6 . 在 配 制 标 准 品 、 检 测 溶 液 工 作 液 时 ， 请 以 相 应 的 稀 释 液 配 制 ， 不 能 混 淆 。 7 . 底 物 请 避 光 保 存 。 8 . 不 要 用 其 它 生 产 厂 家 的 试 剂 替 换 试 剂 盒 中 的 试 剂 。 试 剂 盒 性 能 1 ． 准 确 性 ： 标 准 品 线 性 回 归 与 预 期 浓 度 相 关 系 数 R 值 ， 大 于 等 于 0 . 9 9 0 0 。 2 ． 灵 敏 度 ： ＊ 低 检 测 浓 度 小 于 1 0 p g / m l 。 3 ． 特 异 性 ： 不 与 其 它 可 溶 性 结 构 类 似 物 交 叉 反 应 。 4 ． 重 复 性 ： 批 内 与 批 见 应 分 别 小 于 9 % 和 1 5 % 。 小 鼠 活 性 氧 ( R O S ) E L I S A 试 剂 盒 ￥ 2 6 0 0 小 鼠 活 性 氧 ( R O S ) E L I S A 试 剂 盒 实 验 原 理 E L I S A 运 用 了 免 疫 学 原 理 和 化 学 反 应 显 色 原 理 ， 需 要 将 抗 原 或 抗 体 预 包 被 在 固 相 载 体 表 面 ， 使 后 来 形 成 的 抗 原 抗 体 酶 ( 荧 光 基 团 ) 底 物 复 合 物 黏 附 在 载 体 上 ， 通 过 检 测 O D 值 或 发 光 值 ， 来 检 测 靶 蛋 白 的 含 量 。 实 验 所 需 自 备 物 品 1 . 酶 标 仪 （ 4 5 0 n m ） 2 . 加 样 器 及 枪 头 ： 0 . 5 1 0 u L 、 2 2 0 u L 、 2 0 2 0 0 u L 、 2 0 0 1 0 0 0 u L 3 . 3 7 ℃ 恒 温 箱 试 剂 盒 组 成 名 称 9 6 孔 配 置 4 8 孔 配 置 备 注 微 孔 酶 标 板 1 2 孔 × 8 条 1 2 孔 × 4 条 无 标 准 品 0 . 5 m L 0 . 5 m L 按 说 明 书 进 行 稀 释 标 准 品 x i s h i 液 6 m L 3 m L 按 说 明 书 进 行 稀 释 样 本 x i s h i 液 6 m L 3 m L 按 说 明 书 进 行 稀 释 检 测 抗 体 H R P 6 m L 3 m L 无 2 0 × 洗 涤 缓 冲 液 2 0 m L 2 0 m L 按 说 明 书 进 行 稀 释 底 物 A 6 m L 3 m L 无 底 物 B 6 m L 3 m L 无 终 止 液 6 m L 3 m L 无 封 板 膜 2 张 2 张 无 说 明 书 1 份 1 份 无 自 封 袋 1 个 1 个 无 操 作 步 骤 1 . 准 备 工 作 ： 将 试 剂 盒 从 冰 箱 中 取 出 ， 室 温 放 置 3 0 分 钟 ， 使 试 剂 盒 恢 复 至 室 温 。 同 时 准 备 好 实 验 所 需 的 材 料 和 器 具 。 2 . 加 样 ： 在 酶 标 板 的 弟 1 个 孔 中 加 入 标 准 品 5 0 μ L ， 然 后 在 后 续 的 孔 中 依 次 加 入 待 测 样 本 5 0 μ L 。 3 . 温 育 ： 将 酶 标 板 密 封 ， 在 3 7 ℃ 下 温 育 3 0 分 钟 。 4 . 洗 涤 ： 用 洗 涤 液 清 洗 酶 标 板 ， 共 洗 涤 5 次 。 每 次 洗 涤 后 ， 用 吸 水 纸 轻 轻 吸 干 孔 内 液 体 。 5 . 加 酶 ： 在 每 个 孔 中 加 入 酶 标 物 1 0 0 μ L 。 6 . 温 育 ： 再 次 将 酶 标 板 密 封 ， 在 3 7 ℃ 下 温 育 3 0 分 钟 。 7 . 洗 涤 ： 用 洗 涤 液 清 洗 酶 标 板 ， 共 洗 涤 5 次 。 每 次 洗 涤 后 ， 用 吸 水 纸 轻 轻 吸 干 孔 内 液 体 。 8 . 加 底 物 ： 在 每 个 孔 中 加 入 底 物 A 液 5 0 μ L ， 再 加 入 底 物 B 液 5 0 μ L 。 9 . 终 止 反 应 ： 在 每 个 孔 中 加 入 终 止 液 5 0 μ L 。 1 0 . 检 测 ： 用 酶 标 仪 在 4 5 0 n m 波 长 下 读 取 各 孔 的 吸 光 度 （ O D 值 ） 。 小 鼠 活 性 氧 ( R O S ) E L I S A 试 剂 盒 结 果 分 析 根 据 标 准 品 和 样 本 的 O D 值 ， 绘 制 标 准 曲 线 ， 从 而 计 算 出 样 本 中 角 蛋 白 1 （ K R T 1 ） 的 浓 度 。 具 体 分 析 方 法 可 参 考 试 剂 盒 说 明 书 或 相 关 文 献 。 注 意 事 项 1 . 在 操 作 过 程 中 ， 应 保 持 酶 标 板 的 干 燥 ， 避 免 水 分 进 入 孔 内 。 2 . 加 样 时 需 确 保 加 样 准 确 、 无 气 泡 产 生 。 3 . 温 育 和 洗 涤 过 程 中 需 严 格 控 制 时 间 和 温 度 ， 确 保 实 验 结 果 的 准 确 性 。 4 . 在 使 用 酶 标 仪 读 取 O D 值 时 ， 需 确 保 波 长 设 置 正 确 ， 避 免 误 差 产 生 。 5 . 在 整 个 实 验 过 程 中 ， 需 保 持 操 作 环 境 的 清 洁 和 整 洁 ， 避 免 交 叉 污 染 。 洗 板 方 法 1 . 手 工 洗 板 ： 甩 尽 孔 内 液 体 ， 每 孔 加 满 洗 涤 液 ， 静 置 1 m i n 后 甩 尽 孔 内 液 体 ， 在 吸 水 纸 上 拍 干 ， 如 此 洗 板 5 次 。 2 . 自 动 洗 板 机 ： 每 孔 注 入 洗 液 3 5 0 μ L ， 浸 泡 1 m i n ， 洗 板 5 次 。 小 鼠 谷 胱 甘 肽 过 氧 化 酶 4 ( G P X 4 ) E L I S A 试 剂 盒 ￥ 2 6 0 0 实 验 原 理 试 剂 盒 采 用 双 抗 体 一 步 夹 心 法 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 （ E L I S A ） 。 往 预 先 包 被 小 鼠 谷 胱 甘 肽 过 氧 化 酶 4 ( G P X 4 ) 捕 获 抗 体 的 包 被 微 孔 中 ， 依 次 加 入 标 本 、 标 准 品 、 H R P 标 记 的 检 测 抗 体 ， 经 过 温 育 并 彻 底 洗 涤 。 用 底 物 T M B 显 色 ， T M B 在 过 氧 化 物 酶 的 催 化 下 转 化 成 蓝 色 ， 并 在 酸 的 作 用 下 转 化 成 ＊ 终 的 黄 色 。 颜 色 的 深 浅 和 样 品 中 的 小 鼠 谷 胱 甘 肽 过 氧 化 酶 4 ( G P X 4 ) 呈 正 相 关 。 用 酶 标 仪 在 4 5 0 n m 波 长 下 测 定 吸 光 度 （ O D 值 ） ， 计 算 样 品 浓 度 。 保 存 条 件 及 有 效 期 1 . 本 试 剂 盒 用 于 体 外 定 量 检 测 血 清 、 血 浆 、 组 织 匀 浆 及 相 关 液 体 样 本 中 小 鼠 谷 胱 甘 肽 过 氧 化 酶 4 ( G P X 4 ) 的 含 量 ； 2 . 试 剂 盒 保 存 ： 2 8 ℃ ； 3 . 有 效 期 ： 6 个 月 。 小 鼠 谷 胱 甘 肽 过 氧 化 酶 4 ( G P X 4 ) E L I S A 试 剂 盒 标 本 的 采 集 及 保 存 1 . 血 清 ： 全 血 标 本 请 于 室 温 放 置 2 小 时 或 4 ℃ 过 一 晚 后 于 1 0 0 0 x g 离 心 2 0 分 钟 ， 取 上 清 即 可 检 测 ， 或 将 标 本 放 于 2 0 ℃ 或 8 0 ℃ 保 存 ， 但 应 避 免 反 复 冻 融 。 2 . 血 浆 ： 可 用 E D T A 或 肝 素 作 为 抗 凝 剂 ， 标 本 采 集 后 3 0 分 钟 内 于 2 8 ° C 1 0 0 0 x g 离 心 1 5 分 钟 ， 或 将 标 本 放 于 2 0 ℃ 或 8 0 ℃ 保 存 ， 但 应 避 免 反 复 冻 融 。 3 . 细 胞 培 养 物 上 清 或 其 它 生 物 标 本 ： 1 0 0 0 x g 离 心 2 0 分 钟 ， 取 上 清 即 可 检 测 ， 或 将 标 本 放 于 2 0 ℃ 或 8 0 ℃ 保 存 ， 但 应 避 免 反 复 冻 融 。 ( 注 ： 标 本 溶 血 会 影 响 * * 检 测 结 果 ， 因 此 溶 血 标 本 不 宜 进 行 此 项 检 测 。 ) 标 本 的 稀 释 原 则 ： 首 先 通 过 文 献 检 索 的 方 式 了 解 待 测 样 本 的 大 致 含 量 ， 确 定 适 当 的 稀 释 倍 数 。 只 有 稀 释 至 标 准 曲 线 的 范 围 内 ， 检 测 的 结 果 才 是 准 确 的 。 稀 释 的 过 程 中 ， 应 做 好 详 细 的 记 录 。 计 算 浓 度 时 ， 稀 释 了 “ N ” 倍 ， 标 本 的 浓 度 应 再 乘 以 “ N ” 。 标 准 品 的 稀 释 原 则 ： 2 瓶 ， 每 瓶 临 用 前 以 样 品 稀 释 液 稀 释 至 1 m l ， 盖 好 后 静 置 1 0 分 钟 以 上 ， 然 后 反 复 颠 倒 / 搓 动 以 助 溶 解 ， 其 浓 度 为 3 0 0 p g / m l ， 做 系 列 倍 比 稀 释 后 ， 分 别 稀 释 3 0 0 p g / m l ， 1 5 0 p g / m l ， 7 5 p g / m l ， 3 7 . 5 p g / m l ， 1 8 . 5 p g / m l ， 9 p g / m l ， 4 . 5 p g / m l ， 样 品 稀 释 液 直 接 作 为 标 准 浓 度 0 p g / m l ， 临 用 前 1 5 分 钟 内 配 制 。 如 配 制 1 5 0 p g / m l 标 准 品 ： 取 0 . 5 m l （ 不 要 少 于 0 . 5 m l ） 3 0 0 p g / m l 的 上 述 标 准 品 加 入 含 0 . 5 m l 样 品 稀 释 液 的 E p p e n d o r f 管 中 ， 混 匀 即 可 ， 其 余 浓 度 以 此 类 推 。 生 物 素 标 记 抗 体 的 稀 释 原 则 ： 临 用 前 以 生 物 素 标 记 抗 体 稀 释 液 稀 释 ， 稀 释 前 根 据 预 先 计 算 好 的 每 次 实 验 所 需 的 总 量 配 制 （ 每 孔 1 0 0 μ l ） ， 实 际 配 制 时 应 多 配 制 0 . 1 0 . 2 m l 。 如 1 0 μ l 生 物 素 标 记 抗 体 加 9 9 0 μ l 生 物 素 标 记 抗 体 稀 释 液 的 比 例 配 制 ， 轻 轻 混 匀 ， 在 使 用 前 一 小 时 内 配 制 。 辣 根 过 氧 化 物 酶 标 记 亲 和 素 的 稀 释 原 则 ： 临 用 前 以 辣 根 过 氧 化 物 酶 标 记 亲 和 素 稀 释 液 稀 释 ， 稀 释 前 根 据 预 先 计 算 好 的 每 次 实 验 所 需 的 总 量 配 制 （ 每 孔 1 0 0 μ l ） ， 实 际 配 制 时 应 多 配 制 0 . 1 0 . 2 m l 。 如 1 0 μ l 辣 根 过 氧 化 物 酶 标 记 亲 和 素 加 9 9 0 μ l 辣 根 过 氧 化 物 酶 标 记 亲 和 素 稀 释 液 的 比 例 配 制 ， 轻 轻 混 匀 ， 在 使 用 前 一 小 时 内 配 制 。 操 作 步 骤 实 验 开 始 前 ， 请 提 前 配 置 好 所 有 试 剂 ， 试 剂 或 样 品 稀 释 时 ， 均 需 混 匀 ， 混 匀 时 尽 量 避 免 起 泡 。 每 次 检 测 都 应 该 做 标 准 曲 线 。 如 样 品 浓 度 过 高 时 ， 用 样 品 稀 释 液 进 行 稀 释 ， 以 使 样 品 符 合 试 剂 盒 的 检 测 范 围 。 1 . 加 样 ： 分 别 设 空 白 孔 、 标 准 孔 、 待 测 样 品 孔 。 空 白 孔 加 样 品 稀 释 液 1 0 0 μ l ， 余 孔 分 别 加 标 准 品 或 待 测 样 品 1 0 0 μ l ， 注 意 不 要 有 气 泡 ， 加 样 将 样 品 加 于 酶 标 板 孔 底 部 ， 尽 量 不 触 及 孔 壁 ， 轻 轻 晃 动 混 匀 ， 酶 标 板 加 上 盖 或 覆 膜 ， 3 7 ℃ 反 应 1 2 0 分 钟 。 为 保 证 实 验 结 果 有 效 性 ， 每 次 实 验 请 使 用 新 的 标 准 品 溶 液 。 2 . 弃 去 液 体 ， 甩 干 ， 不 用 洗 涤 。 每 孔 加 生 物 素 标 记 抗 体 工 作 液 1 0 0 μ l （ 取 1 μ l 生 物 素 标 记 抗 体 加 9 9 μ l 生 物 素 标 记 抗 体 稀 释 液 的 比 例 配 制 ， 轻 轻 混 匀 ， 在 使 用 前 一 小 时 内 配 制 ） ， 3 7 ℃ , 6 0 分 钟 。 3 . 温 育 6 0 分 钟 后 ， 弃 去 孔 内 液 体 ， 甩 干 ， 洗 板 3 次 ， 每 次 浸 泡 1 2 分 钟 ， 3 5 0 μ l / 每 孔 ， 甩 干 。 4 . 每 孔 加 辣 根 过 氧 化 物 酶 标 记 亲 和 素 工 作 液 （ 同 生 物 素 标 记 抗 体 工 作 液 ） 1 0 0 μ l ， 3 7 ℃ ， 6 0 分 钟 。 5 . 温 育 6 0 分 钟 后 ， 弃 去 孔 内 液 体 ， 甩 干 ， 洗 板 5 次 ， 每 次 浸 泡 1 2 分 钟 ， 3 5 0 μ l / 每 孔 ， 甩 干 。 6 . 依 序 每 孔 加 底 物 溶 液 9 0 μ l ， 3 7 ℃ 避 光 显 色 （ 3 0 分 钟 内 ， 此 时 肉 眼 可 见 标 准 品 的 前 3 4 孔 有 明 显 的 梯 度 蓝 色 ， 后 3 4 孔 梯 度 不 明 显 ， 即 可 终 止 ） 。 7 . 依 序 每 孔 加 终 止 溶 液 5 0 μ l ， 终 止 反 应 （ 此 时 蓝 色 立 转 黄 色 ） 。 终 止 液 的 加 入 顺 序 应 尽 量 与 底 物 液 的 加 入 顺 序 相 同 。 为 了 保 证 实 验 结 果 的 准 确 性 ， 底 物 反 应 时 间 到 后 应 尽 快 加 入 终 止 液 。 8 . 用 酶 联 仪 在 4 5 0 n m 波 长 依 序 测 量 各 孔 的 光 密 度 （ O D 值 ） 。 在 加 终 止 液 后 1 5 分 钟 以 内 进 行 检 测 。 注 意 事 项 1 . 用 户 在 初 次 使 用 试 剂 盒 时 ， 应 将 各 种 试 剂 管 离 心 数 分 钟 ， 以 便 试 剂 集 中 到 管 底 。 2 . 每 次 实 验 留 一 孔 作 为 空 白 调 零 孔 ， 该 孔 不 加 任 何 试 剂 ， 只 是 * * 加 底 物 溶 液 及 2 N H 2 S O 4 。 测 量 时 先 用 此 孔 调 O D 值 至 零 。 3 . 为 防 止 样 品 蒸 发 ， 试 验 时 将 反 应 板 放 于 铺 有 湿 布 的 密 闭 盒 内 ， 酶 标 板 加 上 盖 或 覆 膜 。 4 . 未 使 用 完 的 酶 标 板 或 者 试 剂 ， 请 于 2 8 ℃ 保 存 。 标 准 品 、 生 物 素 标 记 抗 体 工 作 液 、 辣 根 过 氧 化 物 酶 标 记 亲 和 素 工 作 液 请 依 据 所 需 的 量 配 置 使 用 。 请 勿 重 复 使 用 已 稀 释 过 的 标 准 品 、 生 物 素 标 记 抗 体 工 作 液 或 、 辣 根 过 氧 化 物 酶 标 记 亲 和 素 工 作 液 。 5 . 建 议 检 测 样 品 时 均 设 双 孔 测 定 ， 以 保 证 检 测 结 果 的 准 确 性 。 洗 板 方 法 手 工 洗 板 方 法 ： 吸 去 （ 不 可 触 及 板 壁 ） 或 甩 掉 酶 标 板 内 的 液 体 ； 在 实 验 台 上 铺 垫 几 层 吸 水 纸 ， 酶 标 板 朝 下 用 力 拍 几 次 ； 将 推 荐 的 洗 涤 缓 冲 液 至 少 0 . 3 m l 注 入 孔 内 ， 浸 泡 1 2 分 钟 。 根 据 需 要 ， 重 复 此 过 程 数 次 。 自 动 洗 板 ： 如 果 有 自 动 洗 板 机 ， 应 在 熟 练 使 用 后 再 用 到 正 式 实 验 过 程 中 。 计 算 以 标 准 物 的 浓 度 为 横 坐 标 （ 对 数 坐 标 ） ， O D 值 为 纵 坐 标 （ 普 通 坐 标 ） ， 在 半 对 数 坐 标 纸 上 绘 出 标 准 曲 线 ， 根 据 样 品 的 O D 值 由 标 准 曲 线 查 出 相 应 的 浓 度 ； 再 乘 以 稀 释 倍 数 ； 或 用 标 准 物 的 浓 度 与 O D 值 计 算 出 标 准 曲 线 的 直 线 回 归 方 程 式 ， 将 样 品 的 O D 值 代 入 方 程 式 ， 计 算 出 样 品 浓 度 ， 再 乘 以 稀 释 倍 数 ， 即 为 样 品 的 实 际 浓 度 。 注 意 事 项 1 . 当 混 合 蛋 白 溶 液 时 应 尽 量 轻 缓 ， 避 免 起 泡 。 2 . 洗 涤 过 程 非 常 重 要 ， 不 充 分 的 洗 涤 易 造 成 假 阳 性 。 3 . 一 次 加 样 时 间 * * 控 制 在 5 分 钟 内 ， 如 标 本 数 量 多 ， 推 荐 使 用 排 枪 加 样 。 4 . 请 每 次 测 定 的 同 时 做 标 准 曲 线 ， 做 复 孔 。 5 . 如 标 本 中 待 测 物 质 含 量 过 高 ， 请 先 稀 释 后 再 测 定 ， 计 算 时 请 乘 以 稀 释 倍 数 。 6 . 在 配 制 标 准 品 、 检 测 溶 液 工 作 液 时 ， 请 以 相 应 的 稀 释 液 配 制 ， 不 能 混 淆 。 7 . 底 物 请 避 光 保 存 。 8 . 不 要 用 其 它 生 产 厂 家 的 试 剂 替 换 试 剂 盒 中 的 试 剂 。 注 意 事 项 ： 收 集 标 本 前 必 须 清 楚 要 检 测 的 成 份 是 否 足 够 稳 定 。 对 收 集 后 当 天 进 行 检 测 的 标 本 ， 储 存 在 4 ℃ 备 用 ， 如 有 特 殊 原 因 需 要 周 期 收 集 标 本 ， 将 标 本 及 时 分 装 后 放 在 2 0 ℃ 或 7 0 ℃ 条 件 下 保 存 。 避 免 反 复 冻 融 。 标 本 2 8 ℃ 可 保 存 4 8 小 时 ， 2 0 ℃ 可 保 存 1 个 月 。 7 0 度 可 保 存 6 个 月 。 部 分 激 素 类 标 本 需 添 加 抑 肽 酶 。 计 算 ： 以 标 准 物 的 浓 度 为 横 坐 标 ， O D 值 为 纵 坐 标 ， 在 坐 标 纸 上 绘 出 标 准 曲 线 ， 根 据 样 品 的 O D 值 由 标 准 曲 线 查 出 相 应 的 浓 度 ； 再 乘 以 稀 释 倍 数 ； 或 用 标 准 物 的 浓 度 与 O D 值 计 算 出 标 准 曲 线 的 直 线 回 归 方 程 式 ， 将 样 品 的 O D 值 代 入 方 程 式 ， 计 算 出 样 品 浓 度 ， 再 乘 以 稀 释 倍 数 ， 即 为 样 品 的 实 际 浓 度 。 小 鼠 谷 胱 甘 肽 过 氧 化 酶 4 ( G P X 4 ) E L I S A 试 剂 盒 试 剂 盒 性 能 1 . 样 品 线 性 回 归 与 预 期 浓 度 相 关 系 数 R 值 为 0 . 9 2 以 上 。 2 . 批 内 与 批 见 应 分 别 小 于 9 % 和 1 5 % 小 鼠 还 原 型 谷 胱 甘 肽 ( G S H ) E L I S A 检 测 试 剂 盒 ￥ 2 6 0 0 小 鼠 还 原 型 谷 胱 甘 肽 ( G S H ) E L I S A 检 测 试 剂 盒 实 验 原 理 E L I S A 运 用 了 免 疫 学 原 理 和 化 学 反 应 显 色 原 理 ， 需 要 将 抗 原 或 抗 体 预 包 被 在 固 相 载 体 表 面 ， 使 后 来 形 成 的 抗 原 抗 体 酶 ( 荧 光 基 团 ) 底 物 复 合 物 黏 附 在 载 体 上 ， 通 过 检 测 O D 值 或 发 光 值 ， 来 检 测 靶 蛋 白 的 含 量 。 实 验 所 需 自 备 物 品 1 . 酶 标 仪 （ 4 5 0 n m ） 2 . 加 样 器 及 枪 头 ： 0 . 5 1 0 u L 、 2 2 0 u L 、 2 0 2 0 0 u L 、 2 0 0 1 0 0 0 u L 3 . 3 7 ℃ 恒 温 箱 试 剂 盒 组 成 名 称 9 6 孔 配 置 4 8 孔 配 置 备 注 微 孔 酶 标 板 1 2 孔 × 8 条 1 2 孔 × 4 条 无 标 准 品 0 . 5 m L 0 . 5 m L 按 说 明 书 进 行 稀 释 标 准 品 x i s h i 液 6 m L 3 m L 按 说 明 书 进 行 稀 释 样 本 x i s h i 液 6 m L 3 m L 按 说 明 书 进 行 稀 释 检 测 抗 体 H R P 6 m L 3 m L 无 2 0 × 洗 涤 缓 冲 液 2 0 m L 2 0 m L 按 说 明 书 进 行 稀 释 底 物 A 6 m L 3 m L 无 底 物 B 6 m L 3 m L 无 终 止 液 6 m L 3 m L 无 封 板 膜 2 张 2 张 无 说 明 书 1 份 1 份 无 自 封 袋 1 个 1 个 无 操 作 步 骤 1 . 准 备 工 作 ： 将 试 剂 盒 从 冰 箱 中 取 出 ， 室 温 放 置 3 0 分 钟 ， 使 试 剂 盒 恢 复 至 室 温 。 同 时 准 备 好 实 验 所 需 的 材 料 和 器 具 。 2 . 加 样 ： 在 酶 标 板 的 弟 1 个 孔 中 加 入 标 准 品 5 0 μ L ， 然 后 在 后 续 的 孔 中 依 次 加 入 待 测 样 本 5 0 μ L 。 3 . 温 育 ： 将 酶 标 板 密 封 ， 在 3 7 ℃ 下 温 育 3 0 分 钟 。 4 . 洗 涤 ： 用 洗 涤 液 清 洗 酶 标 板 ， 共 洗 涤 5 次 。 每 次 洗 涤 后 ， 用 吸 水 纸 轻 轻 吸 干 孔 内 液 体 。 5 . 加 酶 ： 在 每 个 孔 中 加 入 酶 标 物 1 0 0 μ L 。 6 . 温 育 ： 再 次 将 酶 标 板 密 封 ， 在 3 7 ℃ 下 温 育 3 0 分 钟 。 7 . 洗 涤 ： 用 洗 涤 液 清 洗 酶 标 板 ， 共 洗 涤 5 次 。 每 次 洗 涤 后 ， 用 吸 水 纸 轻 轻 吸 干 孔 内 液 体 。 8 . 加 底 物 ： 在 每 个 孔 中 加 入 底 物 A 液 5 0 μ L ， 再 加 入 底 物 B 液 5 0 μ L 。 9 . 终 止 反 应 ： 在 每 个 孔 中 加 入 终 止 液 5 0 μ L 。 1 0 . 检 测 ： 用 酶 标 仪 在 4 5 0 n m 波 长 下 读 取 各 孔 的 吸 光 度 （ O D 值 ） 。 小 鼠 还 原 型 谷 胱 甘 肽 ( G S H ) E L I S A 检 测 试 剂 盒 结 果 分 析 根 据 标 准 品 和 样 本 的 O D 值 ， 绘 制 标 准 曲 线 ， 从 而 计 算 出 样 本 中 角 蛋 白 1 （ K R T 1 ） 的 浓 度 。 具 体 分 析 方 法 可 参 考 试 剂 盒 说 明 书 或 相 关 文 献 。 注 意 事 项 1 . 在 操 作 过 程 中 ， 应 保 持 酶 标 板 的 干 燥 ， 避 免 水 分 进 入 孔 内 。 2 . 加 样 时 需 确 保 加 样 准 确 、 无 气 泡 产 生 。 3 . 温 育 和 洗 涤 过 程 中 需 严 格 控 制 时 间 和 温 度 ， 确 保 实 验 结 果 的 准 确 性 。 4 . 在 使 用 酶 标 仪 读 取 O D 值 时 ， 需 确 保 波 长 设 置 正 确 ， 避 免 误 差 产 生 。 5 . 在 整 个 实 验 过 程 中 ， 需 保 持 操 作 环 境 的 清 洁 和 整 洁 ， 避 免 交 叉 污 染 。 洗 板 方 法 1 . 手 工 洗 板 ： 甩 尽 孔 内 液 体 ， 每 孔 加 满 洗 涤 液 ， 静 置 1 m i n 后 甩 尽 孔 内 液 体 ， 在 吸 水 纸 上 拍 干 ， 如 此 洗 板 5 次 。 2 . 自 动 洗 板 机 ： 每 孔 注 入 洗 液 3 5 0 μ L ， 浸 泡 1 m i n ， 洗 板 5 次 。 小 鼠 还 原 型 谷 胱 甘 肽 ( G S H ) E L I S A 检 测 试 剂 盒 ￥ 2 5 8 0 小 鼠 还 原 型 谷 胱 甘 肽 ( G S H ) E L I S A 检 测 试 剂 盒 实 验 原 理 E L I S A 运 用 了 免 疫 学 原 理 和 化 学 反 应 显 色 原 理 ， 需 要 将 抗 原 或 抗 体 预 包 被 在 固 相 载 体 表 面 ， 使 后 来 形 成 的 抗 原 抗 体 酶 ( 荧 光 基 团 ) 底 物 复 合 物 黏 附 在 载 体 上 ， 通 过 检 测 O D 值 或 发 光 值 ， 来 检 测 靶 蛋 白 的 含 量 。 实 验 所 需 自 备 物 品 1 . 酶 标 仪 （ 4 5 0 n m ） 2 . 加 样 器 及 枪 头 ： 0 . 5 1 0 u L 、 2 2 0 u L 、 2 0 2 0 0 u L 、 2 0 0 1 0 0 0 u L 3 . 3 7 ℃ 恒 温 箱 试 剂 盒 组 成 名 称 9 6 孔 配 置 4 8 孔 配 置 备 注 微 孔 酶 标 板 1 2 孔 × 8 条 1 2 孔 × 4 条 无 标 准 品 0 . 5 m L 0 . 5 m L 按 说 明 书 进 行 稀 释 标 准 品 x i s h i 液 6 m L 3 m L 按 说 明 书 进 行 稀 释 样 本 x i s h i 液 6 m L 3 m L 按 说 明 书 进 行 稀 释 检 测 抗 体 H R P 6 m L 3 m L 无 2 0 × 洗 涤 缓 冲 液 2 0 m L 2 0 m L 按 说 明 书 进 行 稀 释 底 物 A 6 m L 3 m L 无 底 物 B 6 m L 3 m L 无 终 止 液 6 m L 3 m L 无 封 板 膜 2 张 2 张 无 说 明 书 1 份 1 份 无 自 封 袋 1 个 1 个 无 操 作 步 骤 1 . 准 备 工 作 ： 将 试 剂 盒 从 冰 箱 中 取 出 ， 室 温 放 置 3 0 分 钟 ， 使 试 剂 盒 恢 复 至 室 温 。 同 时 准 备 好 实 验 所 需 的 材 料 和 器 具 。 2 . 加 样 ： 在 酶 标 板 的 弟 1 个 孔 中 加 入 标 准 品 5 0 μ L ， 然 后 在 后 续 的 孔 中 依 次 加 入 待 测 样 本 5 0 μ L 。 3 . 温 育 ： 将 酶 标 板 密 封 ， 在 3 7 ℃ 下 温 育 3 0 分 钟 。 4 . 洗 涤 ： 用 洗 涤 液 清 洗 酶 标 板 ， 共 洗 涤 5 次 。 每 次 洗 涤 后 ， 用 吸 水 纸 轻 轻 吸 干 孔 内 液 体 。 5 . 加 酶 ： 在 每 个 孔 中 加 入 酶 标 物 1 0 0 μ L 。 6 . 温 育 ： 再 次 将 酶 标 板 密 封 ， 在 3 7 ℃ 下 温 育 3 0 分 钟 。 7 . 洗 涤 ： 用 洗 涤 液 清 洗 酶 标 板 ， 共 洗 涤 5 次 。 每 次 洗 涤 后 ， 用 吸 水 纸 轻 轻 吸 干 孔 内 液 体 。 8 . 加 底 物 ： 在 每 个 孔 中 加 入 底 物 A 液 5 0 μ L ， 再 加 入 底 物 B 液 5 0 μ L 。 9 . 终 止 反 应 ： 在 每 个 孔 中 加 入 终 止 液 5 0 μ L 。 1 0 . 检 测 ： 用 酶 标 仪 在 4 5 0 n m 波 长 下 读 取 各 孔 的 吸 光 度 （ O D 值 ） 。 小 鼠 还 原 型 谷 胱 甘 肽 ( G S H ) E L I S A 检 测 试 剂 盒 结 果 分 析 根 据 标 准 品 和 样 本 的 O D 值 ， 绘 制 标 准 曲 线 ， 从 而 计 算 出 样 本 中 角 蛋 白 1 （ K R T 1 ） 的 浓 度 。 具 体 分 析 方 法 可 参 考 试 剂 盒 说 明 书 或 相 关 文 献 。 注 意 事 项 1 . 在 操 作 过 程 中 ， 应 保 持 酶 标 板 的 干 燥 ， 避 免 水 分 进 入 孔 内 。 2 . 加 样 时 需 确 保 加 样 准 确 、 无 气 泡 产 生 。 3 . 温 育 和 洗 涤 过 程 中 需 严 格 控 制 时 间 和 温 度 ， 确 保 实 验 结 果 的 准 确 性 。 4 . 在 使 用 酶 标 仪 读 取 O D 值 时 ， 需 确 保 波 长 设 置 正 确 ， 避 免 误 差 产 生 。 5 . 在 整 个 实 验 过 程 中 ， 需 保 持 操 作 环 境 的 清 洁 和 整 洁 ， 避 免 交 叉 污 染 。 洗 板 方 法 1 . 手 工 洗 板 ： 甩 尽 孔 内 液 体 ， 每 孔 加 满 洗 涤 液 ， 静 置 1 m i n 后 甩 尽 孔 内 液 体 ， 在 吸 水 纸 上 拍 干 ， 如 此 洗 板 5 次 。 2 . 自 动 洗 板 机 ： 每 孔 注 入 洗 液 3 5 0 μ L ， 浸 泡 1 m i n ， 洗 板 5 次 。 兔 白 介 素 1 0 ( I L 1 0 ) E L I S A 试 剂 盒 ￥ 2 6 0 0 实 验 原 理 试 剂 盒 采 用 双 抗 体 一 步 夹 心 法 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 （ E L I S A ） 。 往 预 先 包 被 兔 白 介 素 1 0 ( I L 1 0 ) 捕 获 抗 体 的 包 被 微 孔 中 ， 依 次 加 入 标 本 、 标 准 品 、 H R P 标 记 的 检 测 抗 体 ， 经 过 温 育 并 彻 底 洗 涤 。 用 底 物 T M B 显 色 ， T M B 在 过 氧 化 物 酶 的 催 化 下 转 化 成 蓝 色 ， 并 在 酸 的 作 用 下 转 化 成 ＊ 终 的 黄 色 。 颜 色 的 深 浅 和 样 品 中 的 兔 白 介 素 1 0 ( I L 1 0 ) 呈 正 相 关 。 用 酶 标 仪 在 4 5 0 n m 波 长 下 测 定 吸 光 度 （ O D 值 ） ， 计 算 样 品 浓 度 。 保 存 条 件 及 有 效 期 1 . 本 试 剂 盒 用 于 体 外 定 量 检 测 血 清 、 血 浆 、 组 织 匀 浆 及 相 关 液 体 样 本 中 兔 白 介 素 1 0 ( I L 1 0 ) 的 含 量 ； 2 . 试 剂 盒 保 存 ： 2 8 ℃ ； 3 . 有 效 期 ： 6 个 月 。 兔 白 介 素 1 0 ( I L 1 0 ) E L I S A 试 剂 盒 标 本 的 采 集 及 保 存 1 . 血 清 ： 全 血 标 本 请 于 室 温 放 置 2 小 时 或 4 ℃ 过 一 晚 后 于 1 0 0 0 x g 离 心 2 0 分 钟 ， 取 上 清 即 可 检 测 ， 或 将 标 本 放 于 2 0 ℃ 或 8 0 ℃ 保 存 ， 但 应 避 免 反 复 冻 融 。 2 . 血 浆 ： 可 用 E D T A 或 肝 素 作 为 抗 凝 剂 ， 标 本 采 集 后 3 0 分 钟 内 于 2 8 ° C 1 0 0 0 x g 离 心 1 5 分 钟 ， 或 将 标 本 放 于 2 0 ℃ 或 8 0 ℃ 保 存 ， 但 应 避 免 反 复 冻 融 。 3 . 细 胞 培 养 物 上 清 或 其 它 生 物 标 本 ： 1 0 0 0 x g 离 心 2 0 分 钟 ， 取 上 清 即 可 检 测 ， 或 将 标 本 放 于 2 0 ℃ 或 8 0 ℃ 保 存 ， 但 应 避 免 反 复 冻 融 。 ( 注 ： 标 本 溶 血 会 影 响 * * 检 测 结 果 ， 因 此 溶 血 标 本 不 宜 进 行 此 项 检 测 。 ) 兔 白 介 素 1 0 ( I L 1 0 ) E L I S A 试 剂 盒 标 本 的 稀 释 原 则 ： 首 先 通 过 文 献 检 索 的 方 式 了 解 待 测 样 本 的 大 致 含 量 ， 确 定 适 当 的 稀 释 倍 数 。 只 有 稀 释 至 标 准 曲 线 的 范 围 内 ， 检 测 的 结 果 才 是 准 确 的 。 稀 释 的 过 程 中 ， 应 做 好 详 细 的 记 录 。 计 算 浓 度 时 ， 稀 释 了 “ N ” 倍 ， 标 本 的 浓 度 应 再 乘 以 “ N ” 。 标 准 品 的 稀 释 原 则 ： 2 瓶 ， 每 瓶 临 用 前 以 样 品 稀 释 液 稀 释 至 1 m l ， 盖 好 后 静 置 1 0 分 钟 以 上 ， 然 后 反 复 颠 倒 / 搓 动 以 助 溶 解 ， 其 浓 度 为 3 0 0 p g / m l ， 做 系 列 倍 比 稀 释 后 ， 分 别 稀 释 3 0 0 p g / m l ， 1 5 0 p g / m l ， 7 5 p g / m l ， 3 7 . 5 p g / m l ， 1 8 . 5 p g / m l ， 9 p g / m l ， 4 . 5 p g / m l ， 样 品 稀 释 液 直 接 作 为 标 准 浓 度 0 p g / m l ， 临 用 前 1 5 分 钟 内 配 制 。 如 配 制 1 5 0 p g / m l 标 准 品 ： 取 0 . 5 m l （ 不 要 少 于 0 . 5 m l ） 3 0 0 p g / m l 的 上 述 标 准 品 加 入 含 0 . 5 m l 样 品 稀 释 液 的 E p p e n d o r f 管 中 ， 混 匀 即 可 ， 其 余 浓 度 以 此 类 推 。 生 物 素 标 记 抗 体 的 稀 释 原 则 ： 临 用 前 以 生 物 素 标 记 抗 体 稀 释 液 稀 释 ， 稀 释 前 根 据 预 先 计 算 好 的 每 次 实 验 所 需 的 总 量 配 制 （ 每 孔 1 0 0 μ l ） ， 实 际 配 制 时 应 多 配 制 0 . 1 0 . 2 m l 。 如 1 0 μ l 生 物 素 标 记 抗 体 加 9 9 0 μ l 生 物 素 标 记 抗 体 稀 释 液 的 比 例 配 制 ， 轻 轻 混 匀 ， 在 使 用 前 一 小 时 内 配 制 。 辣 根 过 氧 化 物 酶 标 记 亲 和 素 的 稀 释 原 则 ： 临 用 前 以 辣 根 过 氧 化 物 酶 标 记 亲 和 素 稀 释 液 稀 释 ， 稀 释 前 根 据 预 先 计 算 好 的 每 次 实 验 所 需 的 总 量 配 制 （ 每 孔 1 0 0 μ l ） ， 实 际 配 制 时 应 多 配 制 0 . 1 0 . 2 m l 。 如 1 0 μ l 辣 根 过 氧 化 物 酶 标 记 亲 和 素 加 9 9 0 μ l 辣 根 过 氧 化 物 酶 标 记 亲 和 素 稀 释 液 的 比 例 配 制 ， 轻 轻 混 匀 ， 在 使 用 前 一 小 时 内 配 制 。 兔 白 介 素 1 0 ( I L 1 0 ) E L I S A 试 剂 盒 操 作 步 骤 实 验 开 始 前 ， 请 提 前 配 置 好 所 有 试 剂 ， 试 剂 或 样 品 稀 释 时 ， 均 需 混 匀 ， 混 匀 时 尽 量 避 免 起 泡 。 每 次 检 测 都 应 该 做 标 准 曲 线 。 如 样 品 浓 度 过 高 时 ， 用 样 品 稀 释 液 进 行 稀 释 ， 以 使 样 品 符 合 试 剂 盒 的 检 测 范 围 。 1 . 加 样 ： 分 别 设 空 白 孔 、 标 准 孔 、 待 测 样 品 孔 。 空 白 孔 加 样 品 稀 释 液 1 0 0 μ l ， 余 孔 分 别 加 标 准 品 或 待 测 样 品 1 0 0 μ l ， 注 意 不 要 有 气 泡 ， 加 样 将 样 品 加 于 酶 标 板 孔 底 部 ， 尽 量 不 触 及 孔 壁 ， 轻 轻 晃 动 混 匀 ， 酶 标 板 加 上 盖 或 覆 膜 ， 3 7 ℃ 反 应 1 2 0 分 钟 。 为 保 证 实 验 结 果 有 效 性 ， 每 次 实 验 请 使 用 新 的 标 准 品 溶 液 。 2 . 弃 去 液 体 ， 甩 干 ， 不 用 洗 涤 。 每 孔 加 生 物 素 标 记 抗 体 工 作 液 1 0 0 μ l （ 取 1 μ l 生 物 素 标 记 抗 体 加 9 9 μ l 生 物 素 标 记 抗 体 稀 释 液 的 比 例 配 制 ， 轻 轻 混 匀 ， 在 使 用 前 一 小 时 内 配 制 ） ， 3 7 ℃ , 6 0 分 钟 。 3 . 温 育 6 0 分 钟 后 ， 弃 去 孔 内 液 体 ， 甩 干 ， 洗 板 3 次 ， 每 次 浸 泡 1 2 分 钟 ， 3 5 0 μ l / 每 孔 ， 甩 干 。 4 . 每 孔 加 辣 根 过 氧 化 物 酶 标 记 亲 和 素 工 作 液 （ 同 生 物 素 标 记 抗 体 工 作 液 ） 1 0 0 μ l ， 3 7 ℃ ， 6 0 分 钟 。 5 . 温 育 6 0 分 钟 后 ， 弃 去 孔 内 液 体 ， 甩 干 ， 洗 板 5 次 ， 每 次 浸 泡 1 2 分 钟 ， 3 5 0 μ l / 每 孔 ， 甩 干 。 6 . 依 序 每 孔 加 底 物 溶 液 9 0 μ l ， 3 7 ℃ 避 光 显 色 （ 3 0 分 钟 内 ， 此 时 肉 眼 可 见 标 准 品 的 前 3 4 孔 有 明 显 的 梯 度 蓝 色 ， 后 3 4 孔 梯 度 不 明 显 ， 即 可 终 止 ） 。 7 . 依 序 每 孔 加 终 止 溶 液 5 0 μ l ， 终 止 反 应 （ 此 时 蓝 色 立 转 黄 色 ） 。 终 止 液 的 加 入 顺 序 应 尽 量 与 底 物 液 的 加 入 顺 序 相 同 。 为 了 保 证 实 验 结 果 的 准 确 性 ， 底 物 反 应 时 间 到 后 应 尽 快 加 入 终 止 液 。 8 . 用 酶 联 仪 在 4 5 0 n m 波 长 依 序 测 量 各 孔 的 光 密 度 （ O D 值 ） 。 在 加 终 止 液 后 1 5 分 钟 以 内 进 行 检 测 。 兔 白 介 素 1 0 ( I L 1 0 ) E L I S A 试 剂 盒 注 意 事 项 1 . 用 户 在 初 次 使 用 试 剂 盒 时 ， 应 将 各 种 试 剂 管 离 心 数 分 钟 ， 以 便 试 剂 集 中 到 管 底 。 2 . 每 次 实 验 留 一 孔 作 为 空 白 调 零 孔 ， 该 孔 不 加 任 何 试 剂 ， 只 是 * * 加 底 物 溶 液 及 2 N H 2 S O 4 。 测 量 时 先 用 此 孔 调 O D 值 至 零 。 3 . 为 防 止 样 品 蒸 发 ， 试 验 时 将 反 应 板 放 于 铺 有 湿 布 的 密 闭 盒 内 ， 酶 标 板 加 上 盖 或 覆 膜 。 4 . 未 使 用 完 的 酶 标 板 或 者 试 剂 ， 请 于 2 8 ℃ 保 存 。 标 准 品 、 生 物 素 标 记 抗 体 工 作 液 、 辣 根 过 氧 化 物 酶 标 记 亲 和 素 工 作 液 请 依 据 所 需 的 量 配 置 使 用 。 请 勿 重 复 使 用 已 稀 释 过 的 标 准 品 、 生 物 素 标 记 抗 体 工 作 液 或 、 辣 根 过 氧 化 物 酶 标 记 亲 和 素 工 作 液 。 5 . 建 议 检 测 样 品 时 均 设 双 孔 测 定 ， 以 保 证 检 测 结 果 的 准 确 性 。 兔 白 介 素 1 0 ( I L 1 0 ) E L I S A 试 剂 盒 洗 板 方 法 手 工 洗 板 方 法 ： 吸 去 （ 不 可 触 及 板 壁 ） 或 甩 掉 酶 标 板 内 的 液 体 ； 在 实 验 台 上 铺 垫 几 层 吸 水 纸 ， 酶 标 板 朝 下 用 力 拍 几 次 ； 将 推 荐 的 洗 涤 缓 冲 液 至 少 0 . 3 m l 注 入 孔 内 ， 浸 泡 1 2 分 钟 。 根 据 需 要 ， 重 复 此 过 程 数 次 。 自 动 洗 板 ： 如 果 有 自 动 洗 板 机 ， 应 在 熟 练 使 用 后 再 用 到 正 式 实 验 过 程 中 。 计 算 以 标 准 物 的 浓 度 为 横 坐 标 （ 对 数 坐 标 ） ， O D 值 为 纵 坐 标 （ 普 通 坐 标 ） ， 在 半 对 数 坐 标 纸 上 绘 出 标 准 曲 线 ， 根 据 样 品 的 O D 值 由 标 准 曲 线 查 出 相 应 的 浓 度 ； 再 乘 以 稀 释 倍 数 ； 或 用 标 准 物 的 浓 度 与 O D 值 计 算 出 标 准 曲 线 的 直 线 回 归 方 程 式 ， 将 样 品 的 O D 值 代 入 方 程 式 ， 计 算 出 样 品 浓 度 ， 再 乘 以 稀 释 倍 数 ， 即 为 样 品 的 实 际 浓 度 。 注 意 事 项 1 . 当 混 合 蛋 白 溶 液 时 应 尽 量 轻 缓 ， 避 免 起 泡 。 2 . 洗 涤 过 程 非 常 重 要 ， 不 充 分 的 洗 涤 易 造 成 假 阳 性 。 3 . 一 次 加 样 时 间 * * 控 制 在 5 分 钟 内 ， 如 标 本 数 量 多 ， 推 荐 使 用 排 枪 加 样 。 4 . 请 每 次 测 定 的 同 时 做 标 准 曲 线 ， 做 复 孔 。 5 . 如 标 本 中 待 测 物 质 含 量 过 高 ， 请 先 稀 释 后 再 测 定 ， 计 算 时 请 乘 以 稀 释 倍 数 。 6 . 在 配 制 标 准 品 、 检 测 溶 液 工 作 液 时 ， 请 以 相 应 的 稀 释 液 配 制 ， 不 能 混 淆 。 7 . 底 物 请 避 光 保 存 。 8 . 不 要 用 其 它 生 产 厂 家 的 试 剂 替 换 试 剂 盒 中 的 试 剂 。 注 意 事 项 ： 收 集 标 本 前 必 须 清 楚 要 检 测 的 成 份 是 否 足 够 稳 定 。 对 收 集 后 当 天 进 行 检 测 的 标 本 ， 储 存 在 4 ℃ 备 用 ， 如 有 特 殊 原 因 需 要 周 期 收 集 标 本 ， 将 标 本 及 时 分 装 后 放 在 2 0 ℃ 或 7 0 ℃ 条 件 下 保 存 。 避 免 反 复 冻 融 。 标 本 2 8 ℃ 可 保 存 4 8 小 时 ， 2 0 ℃ 可 保 存 1 个 月 。 7 0 度 可 保 存 6 个 月 。 部 分 激 素 类 标 本 需 添 加 抑 肽 酶 。 计 算 ： 以 标 准 物 的 浓 度 为 横 坐 标 ， O D 值 为 纵 坐 标 ， 在 坐 标 纸 上 绘 出 标 准 曲 线 ， 根 据 样 品 的 O D 值 由 标 准 曲 线 查 出 相 应 的 浓 度 ； 再 乘 以 稀 释 倍 数 ； 或 用 标 准 物 的 浓 度 与 O D 值 计 算 出 标 准 曲 线 的 直 线 回 归 方 程 式 ， 将 样 品 的 O D 值 代 入 方 程 式 ， 计 算 出 样 品 浓 度 ， 再 乘 以 稀 释 倍 数 ， 即 为 样 品 的 实 际 浓 度 。 兔 白 介 素 1 0 ( I L 1 0 ) E L I S A 试 剂 盒 试 剂 盒 性 能 1 . 样 品 线 性 回 归 与 预 期 浓 度 相 关 系 数 R 值 为 0 . 9 2 以 上 。 2 . 批 内 与 批 见 应 分 别 小 于 9 % 和 1 5 % 兔 白 细 胞 介 素 6 ( I L 6 ) E L I S A 试 剂 盒 ￥ 2 6 0 0 实 验 原 理 试 剂 盒 采 用 双 抗 体 一 步 夹 心 法 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 （ E L I S A ） 。 往 预 先 包 被 兔 白 细 胞 介 素 6 ( I L 6 ) 捕 获 抗 体 的 包 被 微 孔 中 ， 依 次 加 入 标 本 、 标 准 品 、 H R P 标 记 的 检 测 抗 体 ， 经 过 温 育 并 彻 底 洗 涤 。 用 底 物 T M B 显 色 ， T M B 在 过 氧 化 物 酶 的 催 化 下 转 化 成 蓝 色 ， 并 在 酸 的 作 用 下 转 化 成 ＊ 终 的 黄 色 。 颜 色 的 深 浅 和 样 品 中 的 兔 白 细 胞 介 素 6 ( I L 6 ) 呈 正 相 关 。 用 酶 标 仪 在 4 5 0 n m 波 长 下 测 定 吸 光 度 （ O D 值 ） ， 计 算 样 品 浓 度 。 保 存 条 件 及 有 效 期 1 . 本 试 剂 盒 用 于 体 外 定 量 检 测 血 清 、 血 浆 、 组 织 匀 浆 及 相 关 液 体 样 本 中 兔 白 细 胞 介 素 6 ( I L 6 ) 的 含 量 ； 2 . 试 剂 盒 保 存 ： 2 8 ℃ ； 3 . 有 效 期 ： 6 个 月 。 兔 白 细 胞 介 素 6 ( I L 6 ) E L I S A 试 剂 盒 标 本 的 采 集 及 保 存 1 . 血 清 ： 全 血 标 本 请 于 室 温 放 置 2 小 时 或 4 ℃ 过 一 晚 后 于 1 0 0 0 x g 离 心 2 0 分 钟 ， 取 上 清 即 可 检 测 ， 或 将 标 本 放 于 2 0 ℃ 或 8 0 ℃ 保 存 ， 但 应 避 免 反 复 冻 融 。 2 . 血 浆 ： 可 用 E D T A 或 肝 素 作 为 抗 凝 剂 ， 标 本 采 集 后 3 0 分 钟 内 于 2 8 ° C 1 0 0 0 x g 离 心 1 5 分 钟 ， 或 将 标 本 放 于 2 0 ℃ 或 8 0 ℃ 保 存 ， 但 应 避 免 反 复 冻 融 。 3 . 细 胞 培 养 物 上 清 或 其 它 生 物 标 本 ： 1 0 0 0 x g 离 心 2 0 分 钟 ， 取 上 清 即 可 检 测 ， 或 将 标 本 放 于 2 0 ℃ 或 8 0 ℃ 保 存 ， 但 应 避 免 反 复 冻 融 。 ( 注 ： 标 本 溶 血 会 影 响 * * 检 测 结 果 ， 因 此 溶 血 标 本 不 宜 进 行 此 项 检 测 。 ) 兔 白 细 胞 介 素 6 ( I L 6 ) E L I S A 试 剂 盒 标 本 的 稀 释 原 则 ： 首 先 通 过 文 献 检 索 的 方 式 了 解 待 测 样 本 的 大 致 含 量 ， 确 定 适 当 的 稀 释 倍 数 。 只 有 稀 释 至 标 准 曲 线 的 范 围 内 ， 检 测 的 结 果 才 是 准 确 的 。 稀 释 的 过 程 中 ， 应 做 好 详 细 的 记 录 。 计 算 浓 度 时 ， 稀 释 了 “ N ” 倍 ， 标 本 的 浓 度 应 再 乘 以 “ N ” 。 标 准 品 的 稀 释 原 则 ： 2 瓶 ， 每 瓶 临 用 前 以 样 品 稀 释 液 稀 释 至 1 m l ， 盖 好 后 静 置 1 0 分 钟 以 上 ， 然 后 反 复 颠 倒 / 搓 动 以 助 溶 解 ， 其 浓 度 为 3 0 0 p g / m l ， 做 系 列 倍 比 稀 释 后 ， 分 别 稀 释 3 0 0 p g / m l ， 1 5 0 p g / m l ， 7 5 p g / m l ， 3 7 . 5 p g / m l ， 1 8 . 5 p g / m l ， 9 p g / m l ， 4 . 5 p g / m l ， 样 品 稀 释 液 直 接 作 为 标 准 浓 度 0 p g / m l ， 临 用 前 1 5 分 钟 内 配 制 。 如 配 制 1 5 0 p g / m l 标 准 品 ： 取 0 . 5 m l （ 不 要 少 于 0 . 5 m l ） 3 0 0 p g / m l 的 上 述 标 准 品 加 入 含 0 . 5 m l 样 品 稀 释 液 的 E p p e n d o r f 管 中 ， 混 匀 即 可 ， 其 余 浓 度 以 此 类 推 。 生 物 素 标 记 抗 体 的 稀 释 原 则 ： 临 用 前 以 生 物 素 标 记 抗 体 稀 释 液 稀 释 ， 稀 释 前 根 据 预 先 计 算 好 的 每 次 实 验 所 需 的 总 量 配 制 （ 每 孔 1 0 0 μ l ） ， 实 际 配 制 时 应 多 配 制 0 . 1 0 . 2 m l 。 如 1 0 μ l 生 物 素 标 记 抗 体 加 9 9 0 μ l 生 物 素 标 记 抗 体 稀 释 液 的 比 例 配 制 ， 轻 轻 混 匀 ， 在 使 用 前 一 小 时 内 配 制 。 辣 根 过 氧 化 物 酶 标 记 亲 和 素 的 稀 释 原 则 ： 临 用 前 以 辣 根 过 氧 化 物 酶 标 记 亲 和 素 稀 释 液 稀 释 ， 稀 释 前 根 据 预 先 计 算 好 的 每 次 实 验 所 需 的 总 量 配 制 （ 每 孔 1 0 0 μ l ） ， 实 际 配 制 时 应 多 配 制 0 . 1 0 . 2 m l 。 如 1 0 μ l 辣 根 过 氧 化 物 酶 标 记 亲 和 素 加 9 9 0 μ l 辣 根 过 氧 化 物 酶 标 记 亲 和 素 稀 释 液 的 比 例 配 制 ， 轻 轻 混 匀 ， 在 使 用 前 一 小 时 内 配 制 。 兔 白 细 胞 介 素 6 ( I L 6 ) E L I S A 试 剂 盒 操 作 步 骤 实 验 开 始 前 ， 请 提 前 配 置 好 所 有 试 剂 ， 试 剂 或 样 品 稀 释 时 ， 均 需 混 匀 ， 混 匀 时 尽 量 避 免 起 泡 。 每 次 检 测 都 应 该 做 标 准 曲 线 。 如 样 品 浓 度 过 高 时 ， 用 样 品 稀 释 液 进 行 稀 释 ， 以 使 样 品 符 合 试 剂 盒 的 检 测 范 围 。 1 . 加 样 ： 分 别 设 空 白 孔 、 标 准 孔 、 待 测 样 品 孔 。 空 白 孔 加 样 品 稀 释 液 1 0 0 μ l ， 余 孔 分 别 加 标 准 品 或 待 测 样 品 1 0 0 μ l ， 注 意 不 要 有 气 泡 ， 加 样 将 样 品 加 于 酶 标 板 孔 底 部 ， 尽 量 不 触 及 孔 壁 ， 轻 轻 晃 动 混 匀 ， 酶 标 板 加 上 盖 或 覆 膜 ， 3 7 ℃ 反 应 1 2 0 分 钟 。 为 保 证 实 验 结 果 有 效 性 ， 每 次 实 验 请 使 用 新 的 标 准 品 溶 液 。 2 . 弃 去 液 体 ， 甩 干 ， 不 用 洗 涤 。 每 孔 加 生 物 素 标 记 抗 体 工 作 液 1 0 0 μ l （ 取 1 μ l 生 物 素 标 记 抗 体 加 9 9 μ l 生 物 素 标 记 抗 体 稀 释 液 的 比 例 配 制 ， 轻 轻 混 匀 ， 在 使 用 前 一 小 时 内 配 制 ） ， 3 7 ℃ , 6 0 分 钟 。 3 . 温 育 6 0 分 钟 后 ， 弃 去 孔 内 液 体 ， 甩 干 ， 洗 板 3 次 ， 每 次 浸 泡 1 2 分 钟 ， 3 5 0 μ l / 每 孔 ， 甩 干 。 4 . 每 孔 加 辣 根 过 氧 化 物 酶 标 记 亲 和 素 工 作 液 （ 同 生 物 素 标 记 抗 体 工 作 液 ） 1 0 0 μ l ， 3 7 ℃ ， 6 0 分 钟 。 5 . 温 育 6 0 分 钟 后 ， 弃 去 孔 内 液 体 ， 甩 干 ， 洗 板 5 次 ， 每 次 浸 泡 1 2 分 钟 ， 3 5 0 μ l / 每 孔 ， 甩 干 。 6 . 依 序 每 孔 加 底 物 溶 液 9 0 μ l ， 3 7 ℃ 避 光 显 色 （ 3 0 分 钟 内 ， 此 时 肉 眼 可 见 标 准 品 的 前 3 4 孔 有 明 显 的 梯 度 蓝 色 ， 后 3 4 孔 梯 度 不 明 显 ， 即 可 终 止 ） 。 7 . 依 序 每 孔 加 终 止 溶 液 5 0 μ l ， 终 止 反 应 （ 此 时 蓝 色 立 转 黄 色 ） 。 终 止 液 的 加 入 顺 序 应 尽 量 与 底 物 液 的 加 入 顺 序 相 同 。 为 了 保 证 实 验 结 果 的 准 确 性 ， 底 物 反 应 时 间 到 后 应 尽 快 加 入 终 止 液 。 8 . 用 酶 联 仪 在 4 5 0 n m 波 长 依 序 测 量 各 孔 的 光 密 度 （ O D 值 ） 。 在 加 终 止 液 后 1 5 分 钟 以 内 进 行 检 测 。 兔 白 细 胞 介 素 6 ( I L 6 ) E L I S A 试 剂 盒 注 意 事 项 1 . 用 户 在 初 次 使 用 试 剂 盒 时 ， 应 将 各 种 试 剂 管 离 心 数 分 钟 ， 以 便 试 剂 集 中 到 管 底 。 2 . 每 次 实 验 留 一 孔 作 为 空 白 调 零 孔 ， 该 孔 不 加 任 何 试 剂 ， 只 是 * * 加 底 物 溶 液 及 2 N H 2 S O 4 。 测 量 时 先 用 此 孔 调 O D 值 至 零 。 3 . 为 防 止 样 品 蒸 发 ， 试 验 时 将 反 应 板 放 于 铺 有 湿 布 的 密 闭 盒 内 ， 酶 标 板 加 上 盖 或 覆 膜 。 4 . 未 使 用 完 的 酶 标 板 或 者 试 剂 ， 请 于 2 8 ℃ 保 存 。 标 准 品 、 生 物 素 标 记 抗 体 工 作 液 、 辣 根 过 氧 化 物 酶 标 记 亲 和 素 工 作 液 请 依 据 所 需 的 量 配 置 使 用 。 请 勿 重 复 使 用 已 稀 释 过 的 标 准 品 、 生 物 素 标 记 抗 体 工 作 液 或 、 辣 根 过 氧 化 物 酶 标 记 亲 和 素 工 作 液 。 5 . 建 议 检 测 样 品 时 均 设 双 孔 测 定 ， 以 保 证 检 测 结 果 的 准 确 性 。 兔 白 细 胞 介 素 6 ( I L 6 ) E L I S A 试 剂 盒 洗 板 方 法 手 工 洗 板 方 法 ： 吸 去 （ 不 可 触 及 板 壁 ） 或 甩 掉 酶 标 板 内 的 液 体 ； 在 实 验 台 上 铺 垫 几 层 吸 水 纸 ， 酶 标 板 朝 下 用 力 拍 几 次 ； 将 推 荐 的 洗 涤 缓 冲 液 至 少 0 . 3 m l 注 入 孔 内 ， 浸 泡 1 2 分 钟 。 根 据 需 要 ， 重 复 此 过 程 数 次 。 自 动 洗 板 ： 如 果 有 自 动 洗 板 机 ， 应 在 熟 练 使 用 后 再 用 到 正 式 实 验 过 程 中 。 计 算 以 标 准 物 的 浓 度 为 横 坐 标 （ 对 数 坐 标 ） ， O D 值 为 纵 坐 标 （ 普 通 坐 标 ） ， 在 半 对 数 坐 标 纸 上 绘 出 标 准 曲 线 ， 根 据 样 品 的 O D 值 由 标 准 曲 线 查 出 相 应 的 浓 度 ； 再 乘 以 稀 释 倍 数 ； 或 用 标 准 物 的 浓 度 与 O D 值 计 算 出 标 准 曲 线 的 直 线 回 归 方 程 式 ， 将 样 品 的 O D 值 代 入 方 程 式 ， 计 算 出 样 品 浓 度 ， 再 乘 以 稀 释 倍 数 ， 即 为 样 品 的 实 际 浓 度 。 注 意 事 项 1 . 当 混 合 蛋 白 溶 液 时 应 尽 量 轻 缓 ， 避 免 起 泡 。 2 . 洗 涤 过 程 非 常 重 要 ， 不 充 分 的 洗 涤 易 造 成 假 阳 性 。 3 . 一 次 加 样 时 间 * * 控 制 在 5 分 钟 内 ， 如 标 本 数 量 多 ， 推 荐 使 用 排 枪 加 样 。 4 . 请 每 次 测 定 的 同 时 做 标 准 曲 线 ， 做 复 孔 。 5 . 如 标 本 中 待 测 物 质 含 量 过 高 ， 请 先 稀 释 后 再 测 定 ， 计 算 时 请 乘 以 稀 释 倍 数 。 6 . 在 配 制 标 准 品 、 检 测 溶 液 工 作 液 时 ， 请 以 相 应 的 稀 释 液 配 制 ， 不 能 混 淆 。 7 . 底 物 请 避 光 保 存 。 8 . 不 要 用 其 它 生 产 厂 家 的 试 剂 替 换 试 剂 盒 中 的 试 剂 。 注 意 事 项 ： 收 集 标 本 前 必 须 清 楚 要 检 测 的 成 份 是 否 足 够 稳 定 。 对 收 集 后 当 天 进 行 检 测 的 标 本 ， 储 存 在 4 ℃ 备 用 ， 如 有 特 殊 原 因 需 要 周 期 收 集 标 本 ， 将 标 本 及 时 分 装 后 放 在 2 0 ℃ 或 7 0 ℃ 条 件 下 保 存 。 避 免 反 复 冻 融 。 标 本 2 8 ℃ 可 保 存 4 8 小 时 ， 2 0 ℃ 可 保 存 1 个 月 。 7 0 度 可 保 存 6 个 月 。 部 分 激 素 类 标 本 需 添 加 抑 肽 酶 。 计 算 ： 以 标 准 物 的 浓 度 为 横 坐 标 ， O D 值 为 纵 坐 标 ， 在 坐 标 纸 上 绘 出 标 准 曲 线 ， 根 据 样 品 的 O D 值 由 标 准 曲 线 查 出 相 应 的 浓 度 ； 再 乘 以 稀 释 倍 数 ； 或 用 标 准 物 的 浓 度 与 O D 值 计 算 出 标 准 曲 线 的 直 线 回 归 方 程 式 ， 将 样 品 的 O D 值 代 入 方 程 式 ， 计 算 出 样 品 浓 度 ， 再 乘 以 稀 释 倍 数 ， 即 为 样 品 的 实 际 浓 度 。 兔 白 细 胞 介 素 6 ( I L 6 ) E L I S A 试 剂 盒 试 剂 盒 性 能 1 . 样 品 线 性 回 归 与 预 期 浓 度 相 关 系 数 R 值 为 0 . 9 2 以 上 。 2 . 批 内 与 批 见 应 分 别 小 于 9 % 和 1 5 % 兔 白 细 胞 介 素 6 ( I L 6 ) E L I S A 试 剂 盒 兔 γ 干 扰 素 ( I F N γ ) E L I S A 试 剂 盒 ￥ 2 6 8 0 兔 γ 干 扰 素 ( I F N γ ) E L I S A 试 剂 盒 兔 γ 干 扰 素 ( I F N γ ) E L I S A 试 剂 盒 检 测 原 理 试 剂 盒 采 用 双 抗 体 一 步 夹 心 法 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 （ E L I S A ） 。 往 预 先 包 被 活 性 氧 簇 （ R O S ） 抗 体 的 包 被 微 孔 中 ， 依 次 加 入 标 本 、 标 准 品 、 H R P 标 记 的 检 测 抗 体 ， 经 过 温 育 并 彻 底 洗 涤 。 用 底 物 T M B 显 色 ， T M B 在 过 氧 化 物 酶 的 催 化 下 转 化 成 蓝 色 ， 并 在 酸 的 作 用 下 转 化 成 ＊ 终 的 黄 色 。 颜 色 的 深 浅 和 样 品 中 的 活 性 氧 簇 （ R O S ） 呈 正 相 关 。 用 酶 标 仪 在 4 5 0 n m 波 长 下 测 定 吸 光 度 （ O D 值 ） ， 计 算 样 品 活 性 。 兔 γ 干 扰 素 ( I F N γ ) E L I S A 试 剂 盒 样 品 收 集 、 处 理 及 保 存 方 法 1 . 血 清 ： 使 用 不 含 热 原 和 内 毒 素 的 试 管 ， 操 作 过 程 中 避 免 任 何 细 胞 刺 激 ， 收 集 血 液 后 ， 3 0 0 0 转 离 心 1 0 分 钟 将 血 清 和 红 细 胞 迅 速 小 心 地 分 离 。 2 . 血 浆 ： E D T A 、 柠 檬 酸 盐 或 肝 素 抗 凝 。 3 0 0 0 转 离 心 3 0 分 钟 取 上 清 。 3 . 细 胞 上 清 液 ： 3 0 0 0 转 离 心 1 0 分 钟 去 除 颗 粒 和 聚 合 物 。 4 . 组 织 匀 浆 ： 将 组 织 加 入 适 量 生 理 盐 水 捣 碎 。 3 0 0 0 转 离 心 1 0 分 钟 取 上 清 。 5 . 保 存 ： 如 果 样 本 收 集 后 不 及 时 检 测 ， 请 按 一 次 用 量 分 装 ， 冻 存 于 2 0 ℃ ， 避 免 反 复 冻 融 ， 在 室 温 下 解 冻 并 确 保 样 品 均 匀 地 充 分 解 冻 。 兔 γ 干 扰 素 ( I F N γ ) E L I S A 试 剂 盒 自 备 物 品 1 . 酶 标 仪 （ 4 5 0 n m ） 2 . 高 精 度 加 样 器 及 枪 头 ： 0 . 5 1 0 u L 、 2 2 0 u L 、 2 0 2 0 0 u L 、 2 0 0 1 0 0 0 u L 3 . 3 7 ℃ 恒 温 箱 操 作 注 意 事 项 1 . 试 剂 盒 保 存 在 2 8 ℃ ， 使 用 前 室 温 平 衡 2 0 分 钟 。 从 冰 箱 取 出 的 浓 缩 洗 涤 液 会 有 结 晶 ， 这 属 于 正 常 现 象 ， 水 浴 加 热 使 结 晶 完 全 溶 解 后 再 使 用 。 2 . 实 验 中 不 用 的 板 条 应 立 即 放 回 自 封 袋 中 ， 密 封 （ 低 温 干 燥 ） 保 存 。 3 . 浓 度 为 0 的 S 0 号 标 准 品 即 可 视 为 阴 性 对 照 或 者 空 白 ； 按 照 说 明 书 操 作 时 样 本 已 经 稀 释 5 倍 ， ＊ 终 结 果 乘 以 5 才 是 样 本 实 际 浓 度 。 4 . 严 格 按 照 说 明 书 中 标 明 的 时 间 、 加 液 量 及 顺 序 进 行 温 育 操 作 。 5 . 所 有 液 体 组 分 使 用 前 充 分 摇 匀 。 试 剂 盒 组 成 名 称 9 6 孔 配 置 4 8 孔 配 置 备 注 微 孔 酶 标 板 1 2 孔 × 8 条 1 2 孔 × 4 条 无 标 准 品 0 . 3 m L * 6 管 0 . 3 m L * 6 管 无 样 本 稀 释 液 6 m L 3 m L 无 检 测 抗 体 H R P 1 0 m L 5 m L 无 2 0 × 洗 涤 缓 冲 液 2 5 m L 1 5 m L 按 说 明 书 进 行 稀 释 底 物 A 6 m L 3 m L 无 底 物 B 6 m L 3 m L 无 终 止 液 6 m L 3 m L 无 封 板 膜 2 张 2 张 无 说 明 书 1 份 1 份 无 自 封 袋 1 个 1 个 无 注 ： 标 准 品 （ S 0 S 5 ） 浓 度 依 次 为 ： 0 、 3 0 、 6 0 、 1 2 0 、 2 4 0 、 4 8 0 U / m l 试 剂 的 准 备 2 0 × 洗 涤 缓 冲 液 的 稀 释 ： 蒸 馏 水 按 1 ： 2 0 稀 释 ， 即 1 份 的 2 0 × 洗 涤 缓 冲 液 加 1 9 份 的 蒸 馏 水 。 洗 板 方 法 1 . 手 工 洗 板 ： 甩 尽 孔 内 液 体 ， 每 孔 加 满 洗 涤 液 ， 静 置 1 m i n 后 甩 尽 孔 内 液 体 ， 在 吸 水 纸 上 拍 干 ， 如 此 洗 板 5 次 。 2 . 自 动 洗 板 机 ： 每 孔 注 入 洗 液 3 5 0 μ L ， 浸 泡 1 m i n ， 洗 板 5 次 。 操 作 步 骤 1 . 从 室 温 平 衡 2 0 m i n 后 的 铝 箔 袋 中 取 出 所 需 板 条 ， 剩 余 板 条 用 自 封 袋 密 封 放 回 4 ℃ 。 2 . 设 置 标 准 品 孔 和 样 本 孔 ， 标 准 品 孔 各 加 不 同 浓 度 的 标 准 品 5 0 μ L ； 3 . 样 本 孔 先 加 待 测 样 本 1 0 μ L ， 再 加 样 本 稀 释 液 4 0 μ L ； 空 白 孔 不 加 。 4 . 除 空 白 孔 外 ， 标 准 品 孔 和 样 本 孔 中 每 孔 加 入 辣 根 过 氧 化 物 酶 （ H R P ） 标 记 的 检 测 抗 体 1 0 0 μ L ， 用 封 板 膜 封 住 反 应 孔 ， 3 7 ℃ 水 浴 锅 或 恒 温 箱 温 育 6 0 m i n 。 5 . 弃 去 液 体 ， 吸 水 纸 上 拍 干 ， 每 孔 加 满 洗 涤 液 ， 静 置 1 m i n ， 甩 去 洗 涤 液 ， 吸 水 纸 上 拍 干 ， 如 此 重 复 洗 板 5 次 （ 也 可 用 洗 板 机 洗 板 ） 。 6 . 每 孔 加 入 底 物 A 、 B 各 5 0 μ L ， 3 7 ℃ 避 光 孵 育 1 5 m i n 。 7 . 每 孔 加 入 终 止 液 5 0 μ L ， 1 5 m i n 内 ， 在 4 5 0 n m 波 长 处 测 定 各 孔 的 O D 值 。 结 果 判 断 绘 制 标 准 曲 线 ： 在 E x c e l 工 作 表 中 ， 以 标 准 品 浓 度 作 横 坐 标 ， 对 应 O D 值 作 纵 坐 标 ， 绘 制 出 标 准 品 线 性 回 归 曲 线 ， 按 曲 线 方 程 计 算 各 样 本 浓 度 值 。 兔 γ 干 扰 素 ( I F N γ ) E L I S A 试 剂 盒 试 剂 盒 性 能 1 . 准 确 性 ： 标 准 品 线 性 回 归 与 预 期 浓 度 相 关 系 数 R 值 ， 大 于 等 于 0 . 9 9 0 0 。 2 . 灵 敏 度 ： ＊ 低 检 测 浓 度 小 于 1 . 0 U / m l 。 3 . 特 异 性 ： 不 与 其 它 可 溶 性 结 构 类 似 物 交 叉 反 应 。 4 . 重 复 性 ： 板 内 、 板 间 变 异 系 数 均 小 于 1 5 % 。 5 . 贮 藏 ： 2 8 ℃ ， 避 光 防 潮 保 存 。 6 . 有 效 期 ： 6 个 月 免 责 声 明 1 . 试 剂 盒 仅 供 研 究 使 用 ， 不 得 用 于 临 床 实 验 或 人 体 实 验 ， 否 则 所 产 生 的 一 切 后 果 ， 由 实 验 者 承 担 ， 本 公 司 概 不 负 责 。 2 . 严 格 按 照 说 明 书 操 作 ， 实 验 者 违 反 说 明 书 操 作 ， 后 果 由 实 验 者 承 担 。 兔 γ 干 扰 素 ( I F N γ ) E L I S A 试 剂 盒 兔 肿 瘤 坏 死 因 子 α ( T N F α ) E L I S A 试 剂 盒 ￥ 2 6 8 0 一 、 兔 肿 瘤 坏 死 因 子 α ( T N F α ) E L I S A 试 剂 盒 实 验 原 理 是 采 用 双 抗 体 一 步 夹 心 法 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 （ E L I S A ） 。 往 预 先 包 被 人 胰 岛 素 受 体 α ( I N S R A ) 捕 获 抗 体 的 包 被 微 孔 中 ， 依 次 加 入 标 本 、 标 准 品 、 H R P 标 记 的 检 测 抗 体 ， 经 过 温 育 并 彻 底 洗 涤 。 用 底 物 T M B 显 色 ， T M B 在 过 氧 化 物 酶 的 催 化 下 转 化 成 蓝 色 ， 并 在 酸 的 作 用 下 转 化 成 z u i 终 的 黄 色 。 颜 色 的 深 浅 和 样 品 中 的 人 胰 岛 素 受 体 α ( I N S R A ) 呈 正 相 关 。 用 酶 标 仪 在 4 5 0 n m 波 长 下 测 定 吸 光 度 （ O D 值 ） ， 计 算 样 品 浓 度 。 二 、 兔 肿 瘤 坏 死 因 子 α ( T N F α ) E L I S A 试 剂 盒 样 本 处 理 要 求 1 . 血 清 ： 室 温 血 液 自 然 凝 固 1 0 2 0 分 钟 ， 离 心 2 0 分 钟 左 右 （ 2 0 0 0 3 0 0 0 转 / 分 ） 。 仔 细 收 集 上 清 ， 保 存 过 程 中 如 出 现 沉 淀 ， 应 再 次 离 心 。 2 . 血 浆 ： 应 根 据 标 本 的 要 求 选 择 E D T A 或 柠 檬 酸 钠 作 为 抗 凝 剂 ， 混 合 1 0 2 0 分 钟 后 ， 离 心 2 0 分 钟 左 右 （ 2 0 0 0 3 0 0 0 转 / 分 ） 。 仔 细 收 集 上 清 ， 保 存 过 程 中 如 有 沉 淀 形 成 ， 应 该 再 次 离 心 。 3 . 尿 液 ： 用 无 菌 管 收 集 ， 离 心 2 0 分 钟 左 右 （ 2 0 0 0 3 0 0 0 转 / 分 ） 。 仔 细 收 集 上 清 ， 保 存 过 程 中 如 有 沉 淀 形 成 ， 应 再 次 离 心 。 胸 腹 水 、 脑 脊 液 参 照 实 行 。 4 . 细 胞 培 养 上 清 ： 检 测 分 泌 性 的 成 份 时 ， 用 无 菌 管 收 集 。 离 心 2 0 分 钟 左 右 （ 2 0 0 0 3 0 0 0 转 / 分 ） 。 仔 细 收 集 上 清 。 检 测 细 胞 内 的 成 份 时 ， 用 P B S （ P H 7 . 2 7 . 4 ） 稀 释 细 胞 悬 液 ， 细 胞 浓 度 达 到 1 0 0 万 / m l 左 右 。 通 过 反 复 冻 融 ， 以 使 细 胞 破 坏 并 放 出 细 胞 内 成 份 。 离 心 2 0 分 钟 左 右 （ 2 0 0 0 3 0 0 0 转 / 分 ） 。 仔 细 收 集 上 清 。 保 存 过 程 中 如 有 沉 淀 形 成 ， 应 再 次 离 心 。 5 . 组 织 标 本 ： 切 割 标 本 后 ， 称 取 重 量 。 加 入 一 定 量 的 P B S ， P H 7 . 4 。 用 液 氮 迅 速 冷 冻 保 存 备 用 。 标 本 融 化 后 仍 然 保 持 2 8 ℃ 的 温 度 。 加 入 一 定 量 的 P B S （ P H 7 . 4 ） ， 用 手 工 或 匀 浆 器 将 标 本 匀 浆 充 分 。 离 心 2 0 分 钟 左 右 （ 2 0 0 0 3 0 0 0 转 / 分 ） 。 仔 细 收 集 上 清 。 分 装 后 一 份 待 检 测 ， 其 余 冷 冻 备 用 。 6 . 标 本 采 集 后 尽 早 进 行 提 取 ， 提 取 按 相 关 文 献 进 行 ， 提 取 后 应 尽 快 进 行 实 验 。 若 不 能 人 上 进 行 试 验 ， 可 将 标 本 放 于 2 0 ℃ 保 存 ， 但 应 避 免 反 复 冻 融 . 7 . 不 能 检 测 含 N a N 3 的 样 品 ， 因 N a N 3 抑 制 辣 根 过 氧 化 物 酶 的 （ H R P ） 活 性 。 三 、 兔 肿 瘤 坏 死 因 子 α ( T N F α ) E L I S A 试 剂 盒 产 品 优 势 1 . 品 种 齐 全 、 质 量 可 靠 、 灵 敏 度 高 、 操 作 简 便 、 稳 定 性 好 。 2 . 特 异 性 强 ： 不 与 其 它 可 溶 性 结 构 类 似 物 交 叉 反 应 。 3 . 重 复 性 好 ： 板 内 变 异 系 数 小 于 1 0 % ， 板 间 变 异 系 数 小 于 1 5 % 。 4 . 同 城 （ 上 海 ） 需 要 代 测 可 免 费 上 门 取 样 ， 享 送 货 上 门 服 务 。 5 . 根 据 客 户 需 求 定 制 e l i s a 试 剂 盒 并 提 供 免 费 代 测 服 务 。 6 . 臻 科 生 物 可 提 供 专 业 技 术 服 务 , 全 方 位 为 您 解 决 实 验 进 程 中 所 遇 到 一 切 实 验 问 题 。 四 、 兔 肿 瘤 坏 死 因 子 α ( T N F α ) E L I S A 试 剂 盒 组 成 试 剂 盒 组 成 4 8 孔 配 置 9 6 孔 配 置 保 存 说 明 书 1 份 1 份 封 板 膜 2 片 （ 4 8 ） 2 片 （ 9 6 ） 密 封 袋 1 个 1 个 酶 标 包 被 板 1 × 4 8 1 × 9 6 2 8 ℃ 保 存 标 准 品 ： 3 6 U / L 0 . 5 m l × 1 瓶 0 . 5 m l × 1 瓶 2 8 ℃ 保 存 标 准 品 稀 释 液 1 . 5 m l × 1 瓶 1 . 5 m l × 1 瓶 2 8 ℃ 保 存 酶 标 试 剂 3 m l × 1 瓶 6 m l × 1 瓶 2 8 ℃ 保 存 样 品 稀 释 液 3 m l × 1 瓶 6 m l × 1 瓶 2 8 ℃ 保 存 试 剂 盒 组 成 4 8 孔 配 置 9 6 孔 配 置 保 存 说 明 书 1 份 1 份 封 板 膜 2 片 （ 4 8 ） 2 片 （ 9 6 ） 五 、 兔 肿 瘤 坏 死 因 子 α ( T N F α ) E L I S A 试 剂 盒 注 意 事 项 1 . 严 格 按 照 规 定 的 时 间 和 温 度 进 行 温 育 以 保 证 准 确 结 果 。 所 有 试 剂 都 必 须 在 使 用 前 达 到 室 温 2 0 2 5 ℃ 。 使 用 后 立 即 冷 藏 保 存 试 剂 。 2 . 洗 板 不 正 确 可 以 导 致 不 准 确 的 结 果 。 在 加 入 底 物 前 确 保 尽 量 吸 干 孔 内 液 体 。 温 育 过 程 中 不 要 让 微 孔 干 燥 掉 。 3 . 消 除 板 底 残 留 的 液 体 和 手 指 印 ， 否 则 影 响 O D 值 。 4 . 底 物 显 色 液 应 呈 无 色 或 很 浅 的 颜 色 ， 已 经 变 蓝 的 底 物 液 不 能 使 用 。 5 . 避 免 试 剂 和 标 本 的 交 叉 污 染 以 免 造 成 错 误 结 果 。 6 . 在 储 存 和 温 育 时 避 免 强 光 直 接 照 射 。 7 . 平 衡 至 室 温 后 再 打 开 密 封 袋 以 防 水 滴 凝 聚 在 冷 板 条 上 。 8 . 任 何 反 应 试 剂 不 能 接 触 漂 白 溶 剂 或 漂 白 溶 剂 所 散 发 的 强 烈 气 体 。 任 何 漂 白 成 分 都 会 破 坏 试 剂 盒 中 反 应 试 剂 的 生 物 活 性 。 9 . 不 能 使 用 过 期 产 品 。 1 0 . 实 验 还 需 要 酶 标 仪 （ 4 5 0 n m ） ， 3 7 ℃ 恒 温 箱 ， 高 精 度 加 样 器 及 枪 头 ： 0 . 5 1 0 u L 、 2 2 0 u L 、 2 0 2 0 0 u L 、 2 0 0 1 0 0 0 u L 以 及 蒸 馏 水 或 去 离 子 水 。 1 1 . 试 剂 盒 从 冷 藏 环 境 中 取 出 应 在 室 温 平 衡 后 方 可 使 用 。 1 2 . 2 0 × 洗 涤 缓 冲 液 的 稀 释 ： 蒸 馏 水 按 1 ： 2 0 稀 释 ， 即 1 份 2 0 × 洗 涤 缓 冲 液 加 1 9 份 蒸 馏 水 。 1 3 . 如 果 可 能 传 播 疾 病 ， 所 有 的 样 品 都 应 管 理 好 ， 按 照 规 定 的 程 序 处 理 样 品 和 检 测 装 置 。 六 、 兔 肿 瘤 坏 死 因 子 α ( T N F α ) E L I S A 试 剂 盒 操 作 步 骤 1 . 对 应 板 孔 中 加 入 1 0 0 μ L 标 准 品 工 作 液 或 样 本 ， 3 7 ℃ 孵 育 9 0 分 钟 2 . 弃 掉 板 内 液 体 后 ， 立 即 加 入 1 0 0 μ L 生 物 素 化 抗 体 工 作 液 ， 3 7 ℃ 孵 育 6 0 分 钟 3 . 弃 掉 板 内 液 体 ， 洗 板 3 次 4 . 每 孔 加 入 1 0 0 μ L H R P 酶 结 合 物 工 作 液 ， 3 7 ℃ 孵 育 3 0 分 钟 ， 弃 掉 板 内 液 体 ， 洗 板 5 次 5 . 每 孔 加 入 9 0 μ L 底 物 溶 液 ， 3 7 ℃ 孵 育 1 5 分 钟 左 右 6 . 每 孔 加 入 5 0 μ L 终 止 液 7 . 立 即 在 4 5 0 n m 波 长 下 读 数 ， 处 理 数 据 七 、 兔 肿 瘤 坏 死 因 子 α ( T N F α ) E L I S A 试 剂 盒 实 验 结 果 计 算 以 所 测 标 准 品 的 O D 值 为 横 坐 标 ， 标 准 品 的 浓 度 值 为 纵 坐 标 ， 在 坐 标 纸 上 或 用 相 关 软 件 绘 制 标 准 曲 线 ， 并 得 到 直 线 回 归 方 程 ， 将 样 品 的 O D 值 代 入 方 程 ， 计 算 出 样 品 的 浓 度 。 人 （ H u m a n ） 视 神 经 萎 缩 症 蛋 白 1 （ O P A 1 ） E L I S A 检 测 试 剂 盒 ￥ 2 6 0 0 人 （ H u m a n ） 视 神 经 萎 缩 症 蛋 白 1 （ O P A 1 ） E L I S A 检 测 试 剂 盒 检 测 原 理 试 剂 盒 采 用 双 抗 体 一 步 夹 心 法 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 （ E L I S A ） 。 往 预 先 包 被 视 神 经 萎 缩 症 蛋 白 1 （ O P A 1 ） 抗 体 的 包 被 微 孔 中 ， 依 次 加 入 标 本 、 标 准 品 、 H R P 标 记 的 检 测 抗 体 ， 经 过 温 育 并 彻 底 洗 涤 。 用 底 物 T M B 显 色 ， T M B 在 过 氧 化 物 酶 的 催 化 下 转 化 成 蓝 色 ， 并 在 酸 的 作 用 下 转 化 成 ＊ 终 的 黄 色 。 颜 色 的 深 浅 和 样 品 中 的 视 神 经 萎 缩 症 蛋 白 1 （ O P A 1 ） 呈 正 相 关 。 用 酶 标 仪 在 4 5 0 n m 波 长 下 测 定 吸 光 度 （ O D 值 ） ， 计 算 样 品 浓 度 。 人 （ H u m a n ） 视 神 经 萎 缩 症 蛋 白 1 （ O P A 1 ） E L I S A 检 测 试 剂 盒 试 剂 盒 组 成 名 称 9 6 孔 配 置 4 8 孔 配 置 备 注 微 孔 酶 标 板 1 2 孔 × 8 条 1 2 孔 × 4 条 无 标 准 品 0 . 3 m L * 6 管 0 . 3 m L * 6 管 无 样 本 稀 释 液 6 m L 3 m L 无 检 测 抗 体 H R P 1 0 m L 5 m L 无 2 0 × 洗 涤 缓 冲 液 2 5 m L 1 5 m L 按 说 明 书 进 行 稀 释 底 物 A 6 m L 3 m L 无 底 物 B 6 m L 3 m L 无 终 止 液 6 m L 3 m L 无 封 板 膜 2 张 2 张 无 说 明 书 1 份 1 份 无 自 封 袋 1 个 1 个 无 注 ： 标 准 品 （ S 0 S 5 ） 浓 度 依 次 为 ： 0 、 5 、 1 0 、 2 0 、 4 0 、 8 0 n g / m l 样 品 收 集 、 处 理 及 保 存 方 法 1 . 血 清 ： 使 用 不 含 热 原 和 内 毒 素 的 试 管 ， 操 作 过 程 中 避 免 任 何 细 胞 刺 激 ， 收 集 血 液 后 ， 3 0 0 0 转 离 心 1 0 分 钟 将 血 清 和 红 细 胞 迅 速 小 心 地 分 离 。 2 . 血 浆 ： E D T A 、 柠 檬 酸 盐 或 肝 素 抗 凝 。 3 0 0 0 转 离 心 3 0 分 钟 取 上 清 。 3 . 细 胞 上 清 液 ： 3 0 0 0 转 离 心 1 0 分 钟 去 除 颗 粒 和 聚 合 物 。 4 . 组 织 匀 浆 ： 将 组 织 加 入 适 量 生 理 盐 水 捣 碎 。 3 0 0 0 转 离 心 1 0 分 钟 取 上 清 。 5 . 保 存 ： 如 果 样 本 收 集 后 不 及 时 检 测 ， 请 按 一 次 用 量 分 装 ， 冻 存 于 2 0 ℃ ， 避 免 反 复 冻 融 ， 在 室 温 下 解 冻 并 确 保 样 品 均 匀 地 充 分 解 冻 。 人 （ H u m a n ） 视 神 经 萎 缩 症 蛋 白 1 （ O P A 1 ） E L I S A 检 测 试 剂 盒 自 备 物 品 1 . 酶 标 仪 （ 4 5 0 n m ） 2 . 高 精 度 加 样 器 及 枪 头 ： 0 . 5 1 0 u L 、 2 2 0 u L 、 2 0 2 0 0 u L 、 2 0 0 1 0 0 0 u L 3 . 3 7 ℃ 恒 温 箱 人 （ H u m a n ） 视 神 经 萎 缩 症 蛋 白 1 （ O P A 1 ） E L I S A 检 测 试 剂 盒 操 作 注 意 事 项 1 . 试 剂 盒 保 存 在 2 8 ℃ ， 使 用 前 室 温 平 衡 2 0 分 钟 。 从 冰 箱 取 出 的 浓 缩 洗 涤 液 会 有 结 晶 ， 这 属 于 正 常 现 象 ， 水 浴 加 热 使 结 晶 完 全 溶 解 后 再 使 用 。 2 . 实 验 中 不 用 的 板 条 应 立 即 放 回 自 封 袋 中 ， 密 封 （ 低 温 干 燥 ） 保 存 。 3 . 浓 度 为 0 的 S 0 号 标 准 品 即 可 视 为 阴 性 对 照 或 者 空 白 ； 按 照 说 明 书 操 作 时 样 本 已 经 稀 释 5 倍 ， ＊ 终 结 果 乘 以 5 才 是 样 本 实 际 浓 度 。 4 . 严 格 按 照 说 明 书 中 标 明 的 时 间 、 加 液 量 及 顺 序 进 行 温 育 操 作 。 5 . 所 有 液 体 组 分 使 用 前 充 分 摇 匀 。 试 剂 的 准 备 2 0 × 洗 涤 缓 冲 液 的 稀 释 ： 蒸 馏 水 按 1 ： 2 0 稀 释 ， 即 1 份 的 2 0 × 洗 涤 缓 冲 液 加 1 9 份 的 蒸 馏 水 。 人 （ H u m a n ） 视 神 经 萎 缩 症 蛋 白 1 （ O P A 1 ） E L I S A 检 测 试 剂 盒 洗 板 方 法 1 . 手 工 洗 板 ： 甩 尽 孔 内 液 体 ， 每 孔 加 满 洗 涤 液 ， 静 置 1 m i n 后 甩 尽 孔 内 液 体 ， 在 吸 水 纸 上 拍 干 ， 如 此 洗 板 5 次 。 2 . 自 动 洗 板 机 ： 每 孔 注 入 洗 液 3 5 0 μ L ， 浸 泡 1 m i n ， 洗 板 5 次 。 操 作 步 骤 1 . 从 室 温 平 衡 2 0 m i n 后 的 铝 箔 袋 中 取 出 所 需 板 条 ， 剩 余 板 条 用 自 封 袋 密 封 放 回 4 ℃ 。 2 . 设 置 标 准 品 孔 和 样 本 孔 ， 标 准 品 孔 各 加 不 同 浓 度 的 标 准 品 5 0 μ L ； 3 . 样 本 孔 先 加 待 测 样 本 1 0 μ L ， 再 加 样 本 稀 释 液 4 0 μ L ； 空 白 孔 不 加 。 4 . 除 空 白 孔 外 ， 标 准 品 孔 和 样 本 孔 中 每 孔 加 入 辣 根 过 氧 化 物 酶 （ H R P ） 标 记 的 检 测 抗 体 1 0 0 μ L ， 用 封 板 膜 封 住 反 应 孔 ， 3 7 ℃ 水 浴 锅 或 恒 温 箱 温 育 6 0 m i n 。 5 . 弃 去 液 体 ， 吸 水 纸 上 拍 干 ， 每 孔 加 满 洗 涤 液 ， 静 置 1 m i n ， 甩 去 洗 涤 液 ， 吸 水 纸 上 拍 干 ， 如 此 重 复 洗 板 5 次 （ 也 可 用 洗 板 机 洗 板 ） 。 6 . 每 孔 加 入 底 物 A 、 B 各 5 0 μ L ， 3 7 ℃ 避 光 孵 育 1 5 m i n 。 7 . 每 孔 加 入 终 止 液 5 0 μ L ， 1 5 m i n 内 ， 在 4 5 0 n m 波 长 处 测 定 各 孔 的 O D 值 。 人 （ H u m a n ） 视 神 经 萎 缩 症 蛋 白 1 （ O P A 1 ） E L I S A 检 测 试 剂 盒 结 果 判 断 绘 制 标 准 曲 线 ： 在 E x c e l 工 作 表 中 ， 以 标 准 品 浓 度 作 横 坐 标 ， 对 应 O D 值 作 纵 坐 标 ， 绘 制 出 标 准 品 线 性 回 归 曲 线 ， 按 曲 线 方 程 计 算 各 样 本 浓 度 值 。 试 剂 盒 性 能 1 . 准 确 性 ： 标 准 品 线 性 回 归 与 预 期 浓 度 相 关 系 数 R 值 ， 大 于 等 于 0 . 9 9 0 0 。 2 . 灵 敏 度 ： ＊ 低 检 测 浓 度 小 于 1 . 0 n g / m l 。 3 . 特 异 性 ： 不 与 其 它 可 溶 性 结 构 类 似 物 交 叉 反 应 。 4 . 重 复 性 ： 板 内 、 板 间 变 异 系 数 均 小 于 1 5 % 。 5 . 贮 藏 ： 2 8 ℃ ， 避 光 防 潮 保 存 。 6 . 有 效 期 ： 6 个 月 人 （ H u m a n ） 视 神 经 萎 缩 症 蛋 白 1 （ O P A 1 ） E L I S A 检 测 试 剂 盒 免 责 声 明 1 . 试 剂 盒 仅 供 研 究 使 用 ， 不 得 用 于 临 床 实 验 或 人 体 实 验 ， 否 则 所 产 生 的 一 切 后 果 ， 由 实 验 者 承 担 ， 本 公 司 概 不 负 责 。 2 . 严 格 按 照 说 明 书 操 作 ， 实 验 者 违 反 说 明 书 操 作 ， 后 果 由 实 验 者 承 担 。 人 （ H u m a n ） 线 粒 体 动 力 相 关 蛋 白 1 （ D R P 1 ） E L I S A 检 测 试 剂 盒 ￥ 2 6 0 0 人 （ H u m a n ） 线 粒 体 动 力 相 关 蛋 白 1 （ D R P 1 ） E L I S A 检 测 试 剂 盒 检 测 原 理 试 剂 盒 采 用 双 抗 体 一 步 夹 心 法 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 （ E L I S A ） 。 往 预 先 包 被 线 粒 体 动 力 相 关 蛋 白 1 （ D R P 1 ） 抗 体 的 包 被 微 孔 中 ， 依 次 加 入 标 本 、 标 准 品 、 H R P 标 记 的 检 测 抗 体 ， 经 过 温 育 并 彻 底 洗 涤 。 用 底 物 T M B 显 色 ， T M B 在 过 氧 化 物 酶 的 催 化 下 转 化 成 蓝 色 ， 并 在 酸 的 作 用 下 转 化 成 ＊ 终 的 黄 色 。 颜 色 的 深 浅 和 样 品 中 的 线 粒 体 动 力 相 关 蛋 白 1 （ D R P 1 ） 呈 正 相 关 。 用 酶 标 仪 在 4 5 0 n m 波 长 下 测 定 吸 光 度 （ O D 值 ） ， 计 算 样 品 浓 度 。 人 （ H u m a n ） 线 粒 体 动 力 相 关 蛋 白 1 （ D R P 1 ） E L I S A 检 测 试 剂 盒 样 品 收 集 、 处 理 及 保 存 方 法 1 . 血 清 ： 使 用 不 含 热 原 和 内 毒 素 的 试 管 ， 操 作 过 程 中 避 免 任 何 细 胞 刺 激 ， 收 集 血 液 后 ， 3 0 0 0 转 离 心 1 0 分 钟 将 血 清 和 红 细 胞 迅 速 小 心 地 分 离 。 2 . 血 浆 ： E D T A 、 柠 檬 酸 盐 或 肝 素 抗 凝 。 3 0 0 0 转 离 心 3 0 分 钟 取 上 清 。 3 . 细 胞 上 清 液 ： 3 0 0 0 转 离 心 1 0 分 钟 去 除 颗 粒 和 聚 合 物 。 4 . 组 织 匀 浆 ： 将 组 织 加 入 适 量 生 理 盐 水 捣 碎 。 3 0 0 0 转 离 心 1 0 分 钟 取 上 清 。 5 . 保 存 ： 如 果 样 本 收 集 后 不 及 时 检 测 ， 请 按 一 次 用 量 分 装 ， 冻 存 于 2 0 ℃ ， 避 免 反 复 冻 融 ， 在 室 温 下 解 冻 并 确 保 样 品 均 匀 地 充 分 解 冻 。 自 备 物 品 1 . 酶 标 仪 （ 4 5 0 n m ） 2 . 高 精 度 加 样 器 及 枪 头 ： 0 . 5 1 0 u L 、 2 2 0 u L 、 2 0 2 0 0 u L 、 2 0 0 1 0 0 0 u L 3 . 3 7 ℃ 恒 温 箱 人 （ H u m a n ） 线 粒 体 动 力 相 关 蛋 白 1 （ D R P 1 ） E L I S A 检 测 试 剂 盒 操 作 注 意 事 项 1 . 试 剂 盒 保 存 在 2 8 ℃ ， 使 用 前 室 温 平 衡 2 0 分 钟 。 从 冰 箱 取 出 的 浓 缩 洗 涤 液 会 有 结 晶 ， 这 属 于 正 常 现 象 ， 水 浴 加 热 使 结 晶 完 全 溶 解 后 再 使 用 。 2 . 实 验 中 不 用 的 板 条 应 立 即 放 回 自 封 袋 中 ， 密 封 （ 低 温 干 燥 ） 保 存 。 3 . 浓 度 为 0 的 S 0 号 标 准 品 即 可 视 为 阴 性 对 照 或 者 空 白 ； 按 照 说 明 书 操 作 时 样 本 已 经 稀 释 5 倍 ， ＊ 终 结 果 乘 以 5 才 是 样 本 实 际 浓 度 。 4 . 严 格 按 照 说 明 书 中 标 明 的 时 间 、 加 液 量 及 顺 序 进 行 温 育 操 作 。 5 . 所 有 液 体 组 分 使 用 前 充 分 摇 匀 。 人 （ H u m a n ） 线 粒 体 动 力 相 关 蛋 白 1 （ D R P 1 ） E L I S A 检 测 试 剂 盒 试 剂 盒 组 成 名 称 9 6 孔 配 置 4 8 孔 配 置 备 注 微 孔 酶 标 板 1 2 孔 × 8 条 1 2 孔 × 4 条 无 标 准 品 0 . 3 m L * 6 管 0 . 3 m L * 6 管 无 样 本 稀 释 液 6 m L 3 m L 无 检 测 抗 体 H R P 1 0 m L 5 m L 无 2 0 × 洗 涤 缓 冲 液 2 5 m L 1 5 m L 按 说 明 书 进 行 稀 释 底 物 A 6 m L 3 m L 无 底 物 B 6 m L 3 m L 无 终 止 液 6 m L 3 m L 无 封 板 膜 2 张 2 张 无 说 明 书 1 份 1 份 无 自 封 袋 1 个 1 个 无 注 ： 标 准 品 （ S 0 S 5 ） 浓 度 依 次 为 ： 0 、 2 5 、 5 0 、 1 0 0 、 2 0 0 、 4 0 0 p g / m L 试 剂 的 准 备 2 0 × 洗 涤 缓 冲 液 的 稀 释 ： 蒸 馏 水 按 1 ： 2 0 稀 释 ， 即 1 份 的 2 0 × 洗 涤 缓 冲 液 加 1 9 份 的 蒸 馏 水 。 洗 板 方 法 1 . 手 工 洗 板 ： 甩 尽 孔 内 液 体 ， 每 孔 加 满 洗 涤 液 ， 静 置 1 m i n 后 甩 尽 孔 内 液 体 ， 在 吸 水 纸 上 拍 干 ， 如 此 洗 板 5 次 。 2 . 自 动 洗 板 机 ： 每 孔 注 入 洗 液 3 5 0 μ L ， 浸 泡 1 m i n ， 洗 板 5 次 。 人 （ H u m a n ） 线 粒 体 动 力 相 关 蛋 白 1 （ D R P 1 ） E L I S A 检 测 试 剂 盒 操 作 步 骤 1 . 从 室 温 平 衡 2 0 m i n 后 的 铝 箔 袋 中 取 出 所 需 板 条 ， 剩 余 板 条 用 自 封 袋 密 封 放 回 4 ℃ 。 2 . 设 置 标 准 品 孔 和 样 本 孔 ， 标 准 品 孔 各 加 不 同 浓 度 的 标 准 品 5 0 μ L ； 3 . 样 本 孔 先 加 待 测 样 本 1 0 μ L ， 再 加 样 本 稀 释 液 4 0 μ L ； 空 白 孔 不 加 。 4 . 除 空 白 孔 外 ， 标 准 品 孔 和 样 本 孔 中 每 孔 加 入 辣 根 过 氧 化 物 酶 （ H R P ） 标 记 的 检 测 抗 体 1 0 0 μ L ， 用 封 板 膜 封 住 反 应 孔 ， 3 7 ℃ 水 浴 锅 或 恒 温 箱 温 育 6 0 m i n 。 5 . 弃 去 液 体 ， 吸 水 纸 上 拍 干 ， 每 孔 加 满 洗 涤 液 ， 静 置 1 m i n ， 甩 去 洗 涤 液 ， 吸 水 纸 上 拍 干 ， 如 此 重 复 洗 板 5 次 （ 也 可 用 洗 板 机 洗 板 ） 。 6 . 每 孔 加 入 底 物 A 、 B 各 5 0 μ L ， 3 7 ℃ 避 光 孵 育 1 5 m i n 。 7 . 每 孔 加 入 终 止 液 5 0 μ L ， 1 5 m i n 内 ， 在 4 5 0 n m 波 长 处 测 定 各 孔 的 O D 值 。 人 （ H u m a n ） 线 粒 体 动 力 相 关 蛋 白 1 （ D R P 1 ） E L I S A 检 测 试 剂 盒 结 果 判 断 绘 制 标 准 曲 线 ： 在 E x c e l 工 作 表 中 ， 以 标 准 品 浓 度 作 横 坐 标 ， 对 应 O D 值 作 纵 坐 标 ， 绘 制 出 标 准 品 线 性 回 归 曲 线 ， 按 曲 线 方 程 计 算 各 样 本 浓 度 值 。 人 （ H u m a n ） 线 粒 体 动 力 相 关 蛋 白 1 （ D R P 1 ） E L I S A 检 测 试 剂 盒 试 剂 盒 性 能 1 . 准 确 性 ： 标 准 品 线 性 回 归 与 预 期 浓 度 相 关 系 数 R 值 ， 大 于 等 于 0 . 9 9 0 0 。 2 . 灵 敏 度 ： ＊ 低 检 测 浓 度 小 于 1 . 0 p g / m L 。 3 . 特 异 性 ： 不 与 其 它 可 溶 性 结 构 类 似 物 交 叉 反 应 。 4 . 重 复 性 ： 板 内 、 板 间 变 异 系 数 均 小 于 1 5 % 。 5 . 贮 藏 ： 2 8 ℃ ， 避 光 防 潮 保 存 。 6 . 有 效 期 ： 6 个 月 人 （ H u m a n ） 线 粒 体 动 力 相 关 蛋 白 1 （ D R P 1 ） E L I S A 检 测 试 剂 盒 免 责 声 明 1 . 试 剂 盒 仅 供 研 究 使 用 ， 不 得 用 于 临 床 实 验 或 人 体 实 验 ， 否 则 所 产 生 的 一 切 后 果 ， 由 实 验 者 承 担 ， 本 公 司 概 不 负 责 。 2 . 严 格 按 照 说 明 书 操 作 ， 实 验 者 违 反 说 明 书 操 作 ， 后 果 由 实 验 者 承 担 。 大 鼠 睾 酮 ( T ) E L I S A 试 剂 盒 ￥ 2 6 6 0 大 鼠 睾 酮 ( T ) E L I S A 试 剂 盒 大 鼠 睾 酮 ( T ) E L I S A 试 剂 盒 检 测 原 理 试 剂 盒 采 用 双 抗 体 一 步 夹 心 法 酶 联 免 疫 吸 附 试 验 （ E L I S A ） 。 往 预 先 包 被 活 性 氧 簇 （ R O S ） 抗 体 的 包 被 微 孔 中 ， 依 次 加 入 标 本 、 标 准 品 、 H R P 标 记 的 检 测 抗 体 ， 经 过 温 育 并 彻 底 洗 涤 。 用 底 物 T M B 显 色 ， T M B 在 过 氧 化 物 酶 的 催 化 下 转 化 成 蓝 色 ， 并 在 酸 的 作 用 下 转 化 成 ＊ 终 的 黄 色 。 颜 色 的 深 浅 和 样 品 中 的 活 性 氧 簇 （ R O S ） 呈 正 相 关 。 用 酶 标 仪 在 4 5 0 n m 波 长 下 测 定 吸 光 度 （ O D 值 ） ， 计 算 样 品 活 性 。 大 鼠 睾 酮 ( T ) E L I S A 试 剂 盒 样 品 收 集 、 处 理 及 保 存 方 法 1 . 血 清 ： 使 用 不 含 热 原 和 内 毒 素 的 试 管 ， 操 作 过 程 中 避 免 任 何 细 胞 刺 激 ， 收 集 血 液 后 ， 3 0 0 0 转 离 心 1 0 分 钟 将 血 清 和 红 细 胞 迅 速 小 心 地 分 离 。 2 . 血 浆 ： E D T A 、 柠 檬 酸 盐 或 肝 素 抗 凝 。 3 0 0 0 转 离 心 3 0 分 钟 取 上 清 。 3 . 细 胞 上 清 液 ： 3 0 0 0 转 离 心 1 0 分 钟 去 除 颗 粒 和 聚 合 物 。 4 . 组 织 匀 浆 ： 将 组 织 加 入 适 量 生 理 盐 水 捣 碎 。 3 0 0 0 转 离 心 1 0 分 钟 取 上 清 。 5 . 保 存 ： 如 果 样 本 收 集 后 不 及 时 检 测 ， 请 按 一 次 用 量 分 装 ， 冻 存 于 2 0 ℃ ， 避 免 反 复 冻 融 ， 在 室 温 下 解 冻 并 确 保 样 品 均 匀 地 充 分 解 冻 。 大 鼠 睾 酮 ( T ) E L I S A 试 剂 盒 自 备 物 品 1 . 酶 标 仪 （ 4 5 0 n m ） 2 . 高 精 度 加 样 器 及 枪 头 ： 0 . 5 1 0 u L 、 2 2 0 u L 、 2 0 2 0 0 u L 、 2 0 0 1 0 0 0 u L 3 . 3 7 ℃ 恒 温 箱 操 作 注 意 事 项 1 . 试 剂 盒 保 存 在 2 8 ℃ ， 使 用 前 室 温 平 衡 2 0 分 钟 。 从 冰 箱 取 出 的 浓 缩 洗 涤 液 会 有 结 晶 ， 这 属 于 正 常 现 象 ， 水 浴 加 热 使 结 晶 完 全 溶 解 后 再 使 用 。 2 . 实 验 中 不 用 的 板 条 应 立 即 放 回 自 封 袋 中 ， 密 封 （ 低 温 干 燥 ） 保 存 。 3 . 浓 度 为 0 的 S 0 号 标 准 品 即 可 视 为 阴 性 对 照 或 者 空 白 ； 按 照 说 明 书 操 作 时 样 本 已 经 稀 释 5 倍 ， ＊ 终 结 果 乘 以 5 才 是 样 本 实 际 浓 度 。 4 . 严 格 按 照 说 明 书 中 标 明 的 时 间 、 加 液 量 及 顺 序 进 行 温 育 操 作 。 5 . 所 有 液 体 组 分 使 用 前 充 分 摇 匀 。 试 剂 盒 组 成 名 称 9 6 孔 配 置 4 8 孔 配 置 备 注 微 孔 酶 标 板 1 2 孔 × 8 条 1 2 孔 × 4 条 无 标 准 品 0 . 3 m L * 6 管 0 . 3 m L * 6 管 无 样 本 稀 释 液 6 m L 3 m L 无 检 测 抗 体 H R P 1 0 m L 5 m L 无 2 0 × 洗 涤 缓 冲 液 2 5 m L 1 5 m L 按 说 明 书 进 行 稀 释 底 物 A 6 m L 3 m L 无 底 物 B 6 m L 3 m L 无 终 止 液 6 m L 3 m L 无 封 板 膜 2 张 2 张 无 说 明 书 1 份 1 份 无 自 封 袋 1 个 1 个 无 注 ： 标 准 品 （ S 0 S 5 ） 浓 度 依 次 为 ： 0 、 3 0 、 6 0 、 1 2 0 、 2 4 0 、 4 8 0 U / m l 试 剂 的 准 备 2 0 × 洗 涤 缓 冲 液 的 稀 释 ： 蒸 馏 水 按 1 ： 2 0 稀 释 ， 即 1 份 的 2 0 × 洗 涤 缓 冲 液 加 1 9 份 的 蒸 馏 水 。 洗 板 方 法 1 . 手 工 洗 板 ： 甩 尽 孔 内 液 体 ， 每 孔 加 满 洗 涤 液 ， 静 置 1 m i n 后 甩 尽 孔 内 液 体 ， 在 吸 水 纸 上 拍 干 ， 如 此 洗 板 5 次 。 2 . 自 动 洗 板 机 ： 每 孔 注 入 洗 液 3 5 0 μ L ， 浸 泡 1 m i n ， 洗 板 5 次 。 操 作 步 骤 1 . 从 室 温 平 衡 2 0 m i n 后 的 铝 箔 袋 中 取 出 所 需 板 条 ， 剩 余 板 条 用 自 封 袋 密 封 放 回 4 ℃ 。 2 . 设 置 标 准 品 孔 和 样 本 孔 ， 标 准 品 孔 各 加 不 同 浓 度 的 标 准 品 5 0 μ L ； 3 . 样 本 孔 先 加 待 测 样 本 1 0 μ L ， 再 加 样 本 稀 释 液 4 0 μ L ； 空 白 孔 不 加 。 4 . 除 空 白 孔 外 ， 标 准 品 孔 和 样 本 孔 中 每 孔 加 入 辣 根 过 氧 化 物 酶 （ H R P ） 标 记 的 检 测 抗 体 1 0 0 μ L ， 用 封 板 膜 封 住 反 应 孔 ， 3 7 ℃ 水 浴 锅 或 恒 温 箱 温 育 6 0 m i n 。 5 . 弃 去 液 体 ， 吸 水 纸 上 拍 干 ， 每 孔 加 满 洗 涤 液 ， 静 置 1 m i n ， 甩 去 洗 涤 液 ， 吸 水 纸 上 拍 干 ， 如 此 重 复 洗 板 5 次 （ 也 可 用 洗 板 机 洗 板 ） 。 6 . 每 孔 加 入 底 物 A 、 B 各 5 0 μ L ， 3 7 ℃ 避 光 孵 育 1 5 m i n 。 7 . 每 孔 加 入 终 止 液 5 0 μ L ， 1 5 m i n 内 ， 在 4 5 0 n m 波 长 处 测 定 各 孔 的 O D 值 。 结 果 判 断 绘 制 标 准 曲 线 ： 在 E x c e l 工 作 表 中 ， 以 标 准 品 浓 度 作 横 坐 标 ， 对 应 O D 值 作 纵 坐 标 ， 绘 制 出 标 准 品 线 性 回 归 曲 线 ， 按 曲 线 方 程 计 算 各 样 本 浓 度 值 。 大 鼠 睾 酮 ( T ) E L I S A 试 剂 盒 试 剂 盒 性 能 1 . 准 确 性 ： 标 准 品 线 性 回 归 与 预 期 浓 度 相 关 系 数 R 值 ， 大 于 等 于 0 . 9 9 0 0 。 2 . 灵 敏 度 ： ＊ 低 检 测 浓 度 小 于 1 . 0 U / m l 。 3 . 特 异 性 ： 不 与 其 它 可 溶 性 结 构 类 似 物 交 叉 反 应 。 4 . 重 复 性 ： 板 内 、 板 间 变 异 系 数 均 小 于 1 5 % 。 5 . 贮 藏 ： 2 8 ℃ ， 避 光 防 潮 保 存 。 6 . 有 效 期 ： 6 个 月 免 责 声 明 1 . 试 剂 盒 仅 供 研 究 使 用 ， 不 得 用 于 临 床 实 验 或 人 体 实 验 ， 否 则 所 产 生 的 一 切 后 果 ， 由 实 验 者 承 担 ， 本 公 司 概 不 负 责 。 2 . 严 格 按 照 说 明 书 操 作 ， 实 验 者 违 反 说 明 书 操 作 ， 后 果 由 实 验 者 承 担 。 大 鼠 睾 酮 ( T ) E L I S A 试 剂 盒 产 品 中 心 更 多 > > E L I S A 试 人 E L I S A 大 鼠 E L I S 小 鼠 E L I S 抗 凝 羊 血 分 类 ： 动 物 血 清 抗 凝 羊 血 分 类 ： 动 物 ￥ 8 8 0 人 雌 二 醇 ( E 2 ) E L ￥ 2 6 0 0 无 菌 抗 凝 绵 羊 全 血 分 类 ： 动 物 血 清 无 菌 抗 凝 绵 羊 全 血 分 ￥ 8 8 0 人 （ H u m a n ） 抗 A ￥ 2 6 0 0 人 （ H u m a n ） 抗 A ￥ 2 6 0 0 人 α 1 酸 性 糖 蛋 白 ( α ￥ 2 6 0 0 人 血 管 紧 张 素 转 化 酶 ￥ 2 6 0 0 人 可 溶 性 白 细 胞 抗 原 G ￥ 2 6 0 0 人 类 凋 亡 抑 制 因 子 4 （ ￥ 2 6 0 0 人 血 管 生 长 素 ( A N G ￥ 2 6 0 0 荣 誉 资 质 荣 誉 资 质 荣 誉 资 质 荣 誉 资 质 公 司 简 介 了 解 更 多 荣 誉 资 质 了 解 更 多 上 海 笃 玛 生 物 科 技 有 限 公 司 是 一 家 从 事 生 物 学 试 剂 及 试 剂 盒 的 高 科 技 生 物 企 业 。 总 部 位 于 上 海 ， 并 在 全 国 设 有 经 销 或 代 理 机 构 ， 是 一 家 E L I S A 试 剂 盒 厂 家 。 产 品 因 可 靠 而 稳 定 的 质 量 和 较 为 完 善 的 售 后 服 务 确 立 了 “ 笃 玛 生 物 ” 良 好 的 品 牌 形 象 。 公 司 秉 承 “ 以 客 户 为 中 心 、 以 产 品 为 保 障 、 以 诚 信 为 基 础 、 以 创 新 为 宗 旨 ” 的 发 展 理 念 ， 拥 有 专 业 的 研 发 和 质 量 检 测 团 队 以 及 先 进 的 仓 储 和 物 流 系 统 。 “ 笃 玛 生 物 ” 已 经 得 到 全 国 科 研 工 作 者 的 认 可 ， 成 为 广 大 经 销 商 推 崇 的 知 名 品 牌 。 公 司 拥 有 一 批 专 业 的 研 发 人 员 ， 我 们 专 注 于 生 物 产 品 的 不 断 完 善 和 创 新 。 产 品 覆 盖 面 广 ， 品 质 可 靠 。 先 后 开 发 了 涵 盖 分 子 生 物 学 、 细 胞 生 物 学 、 免 疫 学 、 生 物 医 学 等 领 域 的 多 种 试 剂 及 试 剂 盒 。 同 时 ， 提 供 各 种 常 规 生 化 试 剂 ， 库 存 常 备 产 品 多 达 1 0 0 0 0 多 种 ， 可 随 时 为 广 大 科 研 工 作 者 提 供 各 类 专 业 试 剂 。 在 质 量 方 面 ， 谨 记 公 司 信 念 ： 质 量 高 于 一 切 。 所 有 研 发 的 产 品 都 设 有 严 谨 的 生 产 流 程 ， 科 学 的 质 量 检 测 方 法 和 成 熟 的 质 量 检 测 程 序 ， 我 们 恪 守 对 每 一 位 用 户 的 承 诺 ： 用 专 业 的 态 度 做 专 业 的 品 牌 。 同 时 ， 公 司 组 建 了 一 支 专 业 的 技 术 服 务 队 伍 ， 能 够 为 科 研 工 作 者 提 供 专 业 的 技 术 服 务 。 每 一 位 购 买 笃 玛 生 物 产 品 的 用 户 都 能 够 得 到 专 业 的 咨 询 和 完 善 的 售 后 服 务 。 上 海 笃 玛 生 物 科 技 有 限 公 司 坚 持 与 国 际 接 轨 ， 注 重 和 国 际 先 进 企 业 的 合 作 与 交 流 ， 目 前 已 经 和 S i g m a 、 L i f e 、 A m r e s c o 、 a b c a m 、 C S T 、 s a n t a 、 C o r n i n g 、 R ＆ D 、 M i l l i p o r e 、 A A T 、 A p p l i c h e m 、 以 及 D r a g o n 等 ＊ ＊ 企 业 结 成 紧 密 的 合 作 关 系 ， 并 提 供 产 品 代 理 、 市 场 咨 询 等 多 项 服 务 。 公 司 将 一 如 既 往 与 世 界 更 多 知 名 品 牌 合 作 ， 不 断 为 广 大 生 物 科 研 工 作 者 提 供 更 优 质 的 产 品 和 服 务 。 新 闻 资 讯 了 解 更 多 年 终 放 肆 购 ， 科 研 不 将 就 大 鼠 E L I S A 试 剂 盒 在 使 用 之 时 还 需 要 注 意 哪 些 问 题 E L I S A 试 剂 盒 要 怎 样 挑 选 为 什 么 E L I S A 实 验 会 出 现 不 显 色 的 结 果 热 点 新 闻 1 科 研 基 础 小 知 识 分 享 ， 细 胞 传 代 2 样 本 对 e l i s a 实 验 的 影 响 3 上 海 笃 玛 生 物 科 技 有 限 公 司 2 0 2 4 年 元 旦 放 假 通 知 4 E L I S A 常 见 问 题 及 解 决 方 案 5 冬 季 养 生 小 妙 招 6 一 些 适 合 科 研 人 的 生 物 软 件 7 植 物 样 本 的 处 理 方 法 8 年 终 放 肆 购 ， 科 研 不 将 就 9 笃 玛 E L I S A 试 剂 盒 产 品 包 装 升 级 换 新 1 0 E L I S A 试 剂 盒 说 明 书 代 理 品 牌 了 解 更 多 代 理 品 牌 P e p r o T e c h P e p r o T e c h 于 1 9 8 8 年 创 立 于 美 国 新 泽 西 州 ， 经 过 2 6 年 的 发 展 ， 已 成 为 世 界 上 ＊ 大 的 重 组 细 胞 因 子 和 蛋 白 、 相 关 抗 体 及 E L I S A 试 剂 盒 生 产 商 之 一 。 P e p r o T e c h 公 司 已 开 发 出 2 , 0 0 0 多 种 产 品 ， 其 精 良 的 技 术 保 证 了 产 品 的 高 质 量 、 高 可 靠 性 和 高 稳 定 性 。 P e p r o t e c h 的 产 品 具 有 很 高 的 性 价 比 ， 在 世 界 上 众 多 高 水 平 的 实 验 室 和 研 究 机 构 中 广 泛 使 用 。 截 至 2 0 1 3 年 底 ， 已 被 1 3 , 0 0 0 篇 S C I 文 献 引 用 。 代 理 品 牌 T h e r m o F i s h e r S c i e n t i f i c 赛 默 飞 世 尔 科 技 公 司 ( T h e r m o F i s h e r S c i e n t i f i c ) 是 一 家 总 部 位 于 马 萨 诸 塞 州 沃 尔 瑟 姆 的 美 国 科 技 服 务 供 应 商 ， 在 1 9 5 6 年 由 数 个 公 司 合 并 而 成 ， 其 主 要 客 户 类 型 包 括 医 药 和 生 物 公 司 ， 医 院 和 临 床 诊 断 实 验 室 ， 大 学 、 科 研 院 所 和 政 府 机 构 ， 以 及 环 境 与 工 业 过 程 控 制 装 备 制 造 商 等 ， 为 其 提 供 用 于 研 究 、 分 析 、 发 现 和 诊 断 的 分 析 仪 器 、 设 备 、 试 剂 和 耗 材 、 软 件 和 服 务 。 T h e r m o S c i e n t i f i c 能 够 提 供 一 整 套 包 括 高 端 分 析 仪 器 、 实 验 室 装 备 、 软 件 、 服 务 、 耗 材 和 试 剂 在 内 的 实 验 室 综 合 解 决 方 案 。 代 理 品 牌 S a n t a C r u z B i o t t e c h n o l o g y 圣 克 鲁 斯 生 物 技 术 在 生 物 医 药 研 究 市 场 的 发 展 中 处 于 ＊ ＊ ＊ ＊ 地 位 。 在 过 去 的 3 0 年 中 , 本 公 司 已 把 重 点 放 在 不 断 发 展 的 研 究 单 克 隆 抗 体 、 生 物 化 学 、 实 验 室 器 具 和 C R I S P R 产 品 。 代 理 品 牌 T o c r i s B i o s c i e n c e T o c r i s B i o s c i e n c e 是 一 家 专 卖 生 命 科 学 研 究 c h e m i c a l s , p e p t i d e s a n d a n t i b o d i e s 的 知 名 品 牌 ， 其 产 品 也 广 为 各 大 药 厂 、 大 学 、 研 究 机 构 ， 超 过 五 万 名 科 学 研 究 者 所 采 用 。 T o c r i s b i o s c i e n c e 是 位 于 英 国 布 里 斯 托 尔 （ B r i s t o l ） 的 高 品 质 试 剂 提 供 商 ， 共 有 2 0 0 0 多 种 产 品 ， 主 要 集 中 在 神 经 科 学 和 信 号 传 导 领 域 ， 产 品 类 型 包 括 小 分 子 、 多 肽 、 抗 体 、 配 体 和 化 合 物 筛 选 文 库 等 ， 主 要 产 品 包 括 G P C R l i g a n d s ， 神 经 传 递 素 ， 离 子 通 道 调 控 剂 ， 信 号 通 路 抑 制 剂 等 ， 这 些 产 品 被 广 泛 选 择 性 地 用 于 阻 断 或 激 活 生 物 学 通 路 。 代 理 品 牌 R & D R & D 细 胞 因 子 ， R & D E L I S A 试 剂 盒 ， R D 试 剂 产 品 描 述 ： 我 公 司 专 业 代 理 R & D 产 品 ， 产 品 多 样 ， 涉 及 细 胞 因 子 ， 生 物 试 剂 ， E L I S A 试 剂 盒 。 保 证 原 装 ， 价 格 ， 货 期 快 ， 服 务 好 ！ 代 理 品 牌 Q I A G E N Q I A G E N ， 是 全 球 ＊ ＊ 的 样 品 制 备 和 检 测 技 术 供 应 商 。 样 品 制 备 技 术 用 来 分 离 和 处 理 从 血 液 或 组 织 等 生 物 样 品 中 的 D N A ， R N A 和 蛋 白 质 ， 检 测 技 术 使 这 些 分 离 的 分 子 ， 在 随 后 的 分 析 中 显 现 ， 如 特 定 病 毒 的 D N A 。 其 使 命 是 使 客 户 在 生 命 科 学 ， 应 用 测 试 ， 制 药 ， 分 子 诊 断 等 方 面 实 现 卓 越 的 成 就 和 突 破 。 代 理 品 牌 代 理 品 牌 代 理 品 牌 I n v i t r o g e n I n v i t r o g e n 是 全 球 ＊ ＊ 的 生 命 技 术 公 司 ， 公 司 创 立 于 1 9 8 7 年 ， 总 部 位 于 美 国 加 利 福 尼 亚 州 卡 尔 斯 巴 德 。 主 要 为 全 球 从 事 生 命 科 学 研 究 的 学 术 、 政 府 研 究 机 构 、 医 药 和 生 物 技 术 公 司 提 供 生 物 技 术 产 品 和 服 务 。 I n v i t r o g e n 将 研 发 力 量 集 中 在 包 括 功 能 基 因 组 、 蛋 白 组 学 、 生 物 信 息 学 和 细 胞 生 物 学 等 生 命 科 学 研 究 领 域 内 的 突 破 性 创 新 ， 向 全 球 各 主 要 实 验 室 提 供 在 研 究 中 所 需 要 的 新 技 术 、 新 产 品 及 服 务 。 I n v i t r o g e n 旗 下 包 括 I n v i t r o g e n 、 G i b c o 、 M o l e c u l a r P r o b e s 、 D y n a l 、 B i o s o u r c e 、 C a l t a g 、 Z y m e d 、 P a n v e r a 、 I n f o r M a x 、 B i o R e l i a n c e 等 众 多 行 业 ＊ ＊ ＊ ＊ 。 为 分 子 生 物 、 疾 病 研 究 ， 药 物 研 发 和 生 物 制 品 生 产 等 提 供 全 面 的 技 术 和 服 务 。 代 理 品 牌 C e l l S i g n a l i n g T e c h n o l o g y C e l l S i g n a l i n g T e c h n o l o g y ( C S T ) 是 美 国 ＊ ＊ 的 生 物 公 司 和 细 胞 信 号 转 导 研 究 的 ＊ ＊ ， 提 供 特 色 的 信 号 转 导 检 测 用 抗 体 及 磷 酸 化 、 乙 酰 化 、 甲 基 化 、 泛 素 化 抗 体 、 E L I S A 试 剂 盒 、 细 胞 因 子 、 化 学 试 剂 、 激 酶 等 产 品 。 C S T 一 家 总 部 位 于 美 国 马 萨 诸 塞 州 丹 弗 斯 的 私 营 公 司 , 拥 有 专 业 的 生 产 和 研 发 队 伍 ， 致 力 于 提 供 全 球 高 品 质 创 新 型 研 究 产 品 ， 以 加 速 生 物 学 认 知 代 理 品 牌 代 理 品 牌 代 理 品 牌 A n a S p e c A n a S p e c 于 1 9 9 3 年 在 美 国 成 立 ， 是 一 家 由 多 肽 合 成 、 荧 光 标 记 、 抗 体 、 树 脂 合 成 专 家 团 队 组 成 的 生 物 企 业 ， 为 全 世 界 的 科 研 工 作 者 提 供 全 套 的 蛋 白 质 组 学 研 究 解 决 方 案 。 代 理 品 牌 代 理 品 牌 代 理 品 牌 A b c a m A b c a m A b c a m 位 于 英 国 的 剑 桥 科 学 园 ， 成 立 于 1 9 9 8 年 ， 为 生 命 科 学 研 究 提 供 严 格 验 证 的 抗 体 , 试 剂 , 蛋 白 , 试 剂 盒 。 超 过 1 1 万 种 优 质 高 效 的 蛋 白 研 究 工 具 , 提 供 数 据 表 、 多 项 验 证 并 附 有 客 户 评 价 , 现 货 速 达 , 帮 您 更 快 完 成 实 验 。 代 理 品 牌 B i o V i s i o n . I n c . B i o V i s i o n . I n c . 位 于 美 国 加 州 ， 是 世 界 上 ＊ ＊ ＊ ＊ 专 著 于 凋 亡 和 细 胞 信 号 研 究 的 公 司 。 其 产 品 质 优 、 价 廉 、 包 装 使 用 方 便 。 B i o V i s i o n 致 力 于 为 研 究 者 们 提 供 ＊ 好 、 ＊ 新 的 研 究 工 具 而 不 断 扩 大 产 品 及 服 务 质 量 。 该 公 司 提 供 用 于 检 测 早 、 中 、 晚 期 凋 亡 的 试 剂 ， 可 以 检 测 凋 亡 发 生 的 不 同 区 域 ， 包 括 ： 线 粒 体 、 胞 浆 、 胞 膜 及 胞 核 。 代 理 品 牌 C a y m a n C a y m a n C h e m i c a l C a y m a n C h e m i c a l 在 位 于 密 西 根 安 娜 堡 （ A n n A r b o r , M i c h i g a n ） 6 6 , 0 0 0 平 方 英 尺 的 工 厂 生 产 并 制 作 近 6 0 0 0 多 种 不 同 的 化 合 物 、 抗 体 及 分 析 试 剂 盒 。 向 全 球 科 学 工 作 者 提 供 多 研 究 领 域 的 生 化 、 免 疫 试 剂 和 分 析 试 剂 盒 ， 其 产 品 被 广 泛 应 用 于 肿 瘤 、 氧 化 氮 、 神 经 学 、 凋 亡 、 氧 化 性 损 伤 、 内 分 泌 学 等 不 同 研 究 领 域 。 C a y m a n C h e m i c a l 可 提 供 用 于 检 测 的 特 色 试 剂 盒 ， 也 提 供 多 种 高 质 量 试 剂 代 理 品 牌 E n z o L i f e S c i e n c e s E n z o L i f e S c i e n c e s 成 立 于 1 9 7 6 年 ， 总 部 设 于 美 国 纽 约 ， 在 研 发 、 生 产 、 销 售 生 物 研 究 试 剂 方 面 拥 有 4 0 多 年 的 成 功 经 验 ， 涉 及 靶 标 鉴 定 及 验 证 、 高 通 量 分 析 、 基 因 表 达 分 析 、 蛋 白 质 检 测 及 细 胞 分 析 等 相 关 领 域 ， 可 提 供 蛋 白 、 抗 体 、 多 肽 、 小 分 子 、 标 签 探 针 染 料 及 试 剂 盒 等 一 万 余 种 产 品 。 友 情 链 接 百 度 腾 讯 阿 里 巴 巴 正 品 保 障 正 品 保 障 ， 提 供 发 票 急 速 物 流 急 速 物 流 ， 急 速 送 达 无 忧 售 后 1 5 天 无 理 由 退 换 特 色 服 务 贴 心 的 售 后 服 务 帮 助 中 心 您 的 购 物 指 南 物 流 配 送 免 运 费 政 策 配 送 服 务 承 诺 物 流 查 询 支 付 方 式 售 后 服 务 购 买 延 保 服 务 退 款 说 明 退 换 货 申 请 分 期 付 款 帮 助 中 心 导 购 演 示 免 费 注 册 会 员 等 级 常 见 问 题 市 场 拓 展 培 训 中 心 信 息 公 告 广 告 服 务 网 站 首 页 关 于 我 们 产 品 中 心 代 理 品 牌 荣 誉 资 质 新 闻 资 讯 联 系 我 们 扫 一 扫 C o p y r i g h t © E L I S A 试 剂 盒 酶 联 免 疫 试 剂 盒 高 敏 E L I S A 试 剂 盒 上 海 笃 玛 生 物 科 技 有 限 公 司 官 网 沪 I C P 备 1 5 0 2 3 1 3 4 号 1 3 1 0 1 1 5 0 2 0 1 2 8 2 2 由 D c o d i n g 云 平 台 驱 动 后 台 登 录 入 口 使 用 条 款 展 开 收 缩 Q Q 咨 询 在 线 咨 询 杨 燕 燕 欧 阳 琼 乐 名 孙 涵 电 话 咨 询 1 5 9 2 1 6 5 7 7 0 3 4 0 0 9 6 8 1 7 8 6
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